科研产出
三种同型发酵乳酸菌混合培养的发酵特性及对黄曲霉抑菌作用的研究
《饲料工业 》 2019 北大核心
摘要：为探讨植物乳杆菌(L)、乳酸片球菌(P)、凝结芽孢杆菌(B)及三种菌混合培养液对黄曲霉的抑菌作用,试验采用琼脂扩散法对三种菌及其混合培养的上清浓缩液进行了体外抑菌实验.结果表明:三种菌及其混合培养的上清浓缩液均对黄曲霉的生长有抑制作用,乳酸片球菌、植物乳杆菌、凝结芽孢杆菌及其三者混合培养的上清浓缩液的抑菌直径分别为(15.860±0.050)、(15.737±0.155)、(14.287±0.096) mm和(15.173±0.032) mm,其中植物乳杆菌和乳酸片球菌的抑菌直径最大(P<0.05).
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日粮中添加复合酵母培养物对奶牛泌乳性能的影响
《饲料研究 》 2019 北大核心
摘要：试验通过在奶牛日粮中添加复合酵母培养物,研究其对奶牛泌乳性能的影响.试验选取39头泌乳天数100~160 d、产奶量>25 kg、体况相近的中国荷斯坦奶牛,随机分成2组,对照组饲喂基础日粮,试验组在基础日粮中添加200 g/d的复合酵母培养物,试验期为30 d.结果表明,以对照组为基准,试验组奶牛平均产奶量提高1.50 kg/(头·d),持续力较对照组显著提高6.52%(P<0.05),乳蛋白率提高(P>0.05),尿素氮降低(P>0.05),细胞体细胞含量下降87%(P<0.05),乳房炎得到明显控制.以上结果表明,复合酵母培养物可提高奶牛泌乳持续力,并在适度提高牛奶品质的同时,降低乳中体细胞数量,减少乳房炎的发生.
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HA标签的水稻水孔蛋白OsPIP2;7基因植物双元表达载体构建及转基因水稻的获得
《华北农学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：为研究水稻水孔蛋白OsPIP2;7基因在非生物胁迫中的生物学功能,根据OsPIP2;7基因序列设计特异性引物,以水稻品种中花11的三叶龄叶片RNA反转录的cDNA第一链为模板,克隆OsPIP2;7.采用嵌套PCR的方法,将3*HA标签的碱基序列连接在去除终止子OsPIP2;7基因序列的3′端,然后将此核酸片段插入到植物双元表达载体pHB中,构建pHB-OsPIP2;7-3*HA载体.以中花11成熟胚愈伤组织为材料,采用农杆菌介导的方法进行遗传转化,经过在含有潮霉素的培养基上筛选和分化,获得阳性转化子.提取转基因植株的DNA,进行潮霉素阳性植株的筛选.将阳性植株进行RNA表达检测,获得OsPIP2;7基因表达量上升的转基因阳性植株.为了检测转基因植株中OsPIP2;7蛋白的表达情况,提取OsPIP2;7基因表达上升的转基因植株膜蛋白后,用HA抗体进行杂交的Western-blot检测结果显示,OsPIP2;7-HA蛋白在转基因阳性植株体内过量表达.获得的过表达OsPIP2;7转基因新材料,将为研究OsPIP2;7基因的生物学新功能提供试验基础.
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基于高通量测序分析驴皮肤病病灶中细菌菌群组成
《动物医学进展 》 2019 北大核心
摘要：驴皮具有极高的药用价值,但驴皮肤病临床发病率较高,不仅影响驴生长速度,也明显降低驴皮质量。驴皮肤病主要发生在头部和背部,临床表现为脱毛、皮屑、出血等。从天津某养殖基地采集不同症状的驴皮肤病样本37个,从中挑选6份典型皮肤病样品,采用高通量测序分析其细菌菌群组成,为研究其发病机制和防治提供基础资料。结果显示,在送检的6个样品中,发现存在4门、7纲、12目、19科、37属的细菌菌群。在属水平上,有Achromobacter、Stenotrophomonas、Pseudomonas为优势菌属,分别占总菌群的20.30%、15.00%和12.30%。通过PCoA和Venn图分析可知,皮肤出血、未出血病灶菌群组成明显不同;皮肤出血样品的菌群组成相似,Agrobacterium、Paenibacillus、Clostridium丰度较高;皮肤硬化菌群组成相似,Pantoea为主要菌群;多皮屑样品菌群组成有差异,Trichococcus是共有菌群。结果表明,引起驴皮肤病的细菌菌群组成具有明显差异,可为后期发病机制和防治提供科学依据。
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5种乳酸菌对苜蓿青贮营养和发酵品质的影响
《饲料研究 》 2019 北大核心
摘要：为探讨不同乳酸菌在苜蓿青贮中的应用效果,进行了不同来源的2种植物乳杆菌、2种片球菌和凝结芽孢杆菌等3类5种乳酸菌对苜蓿青贮营养发酵品质影响的试验。结果表明,植物乳杆菌处理组可显著提高苜蓿青贮粗蛋白和粗脂肪含量,以及总脂肪酸和乳酸含量,显著降低酸性洗涤纤维、木质素、淀粉、灰分、酸性洗涤不溶蛋白和中性洗涤不溶蛋白的含量,以及pH值,挥发性脂肪酸、乙酸、丁酸和氨态氮含量;片球菌处理组则显著降低了苜蓿青贮粗蛋白的含量和相对饲草价值,其中乳酸片球菌亦可显著降低苜蓿青贮pH值以及总脂肪酸、挥发性脂肪酸、丁酸和氨态氮含量;凝结芽孢杆菌处理组对苜蓿青贮营养和发酵指标的影响均未达显著水平。根据隶属函数法对不同微生物处理苜蓿青贮的营养和发酵品质进行综合评价,以植物乳杆菌处理组效果最佳,其中植物乳杆菌ACCC11016优于CICC20765,片球菌处理组和凝结芽孢杆菌处理虽在一定程度上均优于对照组,但差异未达显著水平。
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禽腺病毒血清4型纳米PCR检测方法的建立与初步应用
《中国预防兽医学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：为建立一种快速有效检测禽腺病毒血清4型(FAdV-4)的方法,本研究根据FAdV-4五邻体(Penton)基因序列,设计合成1对特异性引物,经过条件优化,建立了检测FAdV-4的纳米PCR方法(Nano PCR)。特异性试验结果显示,该方法对鸡新城疫病毒等12种家禽常见病原及国内报导的FAdV-1、FAdV-2、FAdV-8a、FAdV-8b、FAdV-11等5个主要血清型病毒的扩增结果均为阴性,仅FAdV-4检测结果为阳性,特异性较强。敏感性试验结果显示,该方法对FAdV-4的最低核酸检出量为54.0拷贝/μL,较常规PCR方法高10倍,敏感性较高。应用该方法和病毒分离培养法同时对87份临床样品进行检测,二者均检出14份阳性样品,总体符合率为100%。以上结果表明本研究建立的Nano PCR方法特异性好、敏感性高,可以用于FAdV-4的临床检测和分子流行病学调查。
关键词： 禽腺病毒血清4型 五邻体基因 Nano PCR检测
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黄瓜离体雌核发育早期相关基因的转录组初步分析
《华北农学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：研究黄瓜离体雌核发育早期相关基因的表达,为进一步大幅提高黄瓜未受精子房培养胚胎诱导率奠定理论基础。采用基因表达谱芯片和qPCR技术,提取黄瓜未受精子房培养早期胚珠部位总RNA,从转录组水平分析了高频基因型和低频基因型黄瓜未受精子房培养早期差异基因表达。筛选出与胚胎发育相关的基因47个,经qPCR验证,获得8个候选基因,在高频型材料培养的前6 d均呈现高水平表达,在低频型材料培养中呈现低水平表达或总体变化下降的趋势。其中3个基因与响应水杨酸、茉莉酸防御系统,响应脱落酸刺激,生长素诱导结合蛋白以及玉米素合成途径中细胞分裂素脱氢酶的表达相关;2个基因参与POD酶活性表达;3个基因分别与苏氨酸-丝氨酸蛋白激酶、水通道蛋白以及机械敏感性离子通道蛋白相关。初步认为上述8个基因是与黄瓜离体雌核发育早期过程相关的重要基因。
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相对湿度对西州密17号哈密瓜贮藏品质的影响
《食品研究与开发 》 2019 北大核心
摘要：以西州密17号哈密瓜为试材,为探究适宜哈密瓜采后贮藏的环境的相对湿度条件,分别用3种不同的相对湿度[(50±5)%、(70±5)%、(90±5)%]对哈密瓜进行处理,测定哈密瓜的呼吸强度、可溶性固形物的含量、可滴定酸的含量、维生素C的含量以及过氧化物酶(peroxidase,POD)的活性、多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)活性。对比(50±5)%、(70±5)%、(90±5)%3种相对湿度处理方式,(70±5)%的相对湿度处理下哈密瓜的呼吸强度最弱为3.29 mg/(kg·h),可溶性固形物含量上升2.9%,可滴定酸(titratable acid,TA)含量下降了0.03%,维生素C(vitamin C,VC)含量损失27.08 mg/100 g,POD活性变化最小,PPO活性相对较低。因此,(70±5)%的相对湿度处理更有利于西州密17号哈密瓜的贮藏保鲜。
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干扰CREB基因对奶山羊乳腺上皮细胞脂质合成相关基因表达及甘油三酯合成的影响
《畜牧兽医学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：旨在筛选奶山羊cAMP应答元件结合蛋白CREB(cAMP response element binding protein)基因的siRNA,揭示干扰该基因后对乳腺上皮细胞中乳脂合成相关基因表达及甘油三酯合成的影响。本研究通过qRT-PCR方法从西农萨能奶山羊乳腺组织中扩增CREB基因完整的CDS区,进行序列分析和不同泌乳时期表达水平分析,合成靶向CREB基因的siRNA,利用荧光定量PCR筛选有效siRNA,并检测脂质合成相关基因的表达,采用试剂盒检测细胞内甘油三酯含量。结果表明:1)克隆得到全长为984 bp的奶山羊CREB基因的CDS区(GenBank登录号:MK158073),并对其进行生物信息学分析。2)该基因在奶山羊泌乳盛期乳腺组织的表达量为干奶期的1.93倍(P<0.05)。3)成功筛选到靶向CREB基因的有效siRNA,干扰效率为72%(P<0.01);并将其在奶山羊乳腺上皮细胞进行转染,通过qRT-PCR检测脂质合成相关基因的表达,与对照组相比,干扰CREB基因后显著抑制了FASN、ACACA、SCD1、FABP3、LPL、CPT1B、GPAM和DGAT2基因表达量(P<0.05),并显著增加了HSL基因表达量(P<0.05);且细胞内甘油三酯含量被显著下调(P<0.05)。综上所述,CREB基因在奶山羊原代乳腺上皮细胞中很可能通过调控脂质代谢相关基因的表达及甘油三酯含量对山羊的乳脂合成过程发挥重要作用。
关键词： 奶山羊 乳腺上皮细胞 CREB RNA干扰 脂质合成 甘油三酯
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