科研产出
桑黄与雷公藤序贯联合治疗对局灶节段肾小球硬化大鼠肾损伤的影响及机制
《中国现代应用药学 》 2021 CSCD
摘要：目的研究桑黄联合雷公藤多苷对局灶节段肾小球硬化（focal segmental glomerulosclerosis,FSGS）大鼠早期肾功能和肾脏病理损伤的干预作用及机制。方法采用单侧肾切除联合2次阿霉素尾静脉注射法建立FSGS大鼠模型,用桑黄水煎剂、雷公藤多苷及联合进行干预治疗。检测血肌酐、尿素氮、血脂等水平,Masson染色观察肾组织病理损伤及纤维化程度,RT-PCR技术检测肾皮质CollageIV、Fibronection、MMP9及TIMP-1的表达水平。结果与正常对照组比较,模型组大鼠肾功能显著降低（P<0.05）,24h尿蛋白、血脂、心肌酶水平等显著增高（P<0.05）。与模型组比较,桑黄、雷公藤多苷以及联合干预均可降低尿蛋白,改善肾功能和血脂代谢,降低心肌酶水平,改善心脏损伤,联合组整体优于单独干预;联合干预或雷公藤多苷干预均可显著降低细胞外基质积聚,并可增高MMP9 mRNA表达,显著降低TIMP-1 mRNA表达水平。结论桑黄联合雷公藤多苷可有效改善FSGS大鼠肾功能及肾脏病理损伤,有望为FSGS的防治提供新的治疗措施。
关键词： 桑黄 雷公藤多苷 局灶节段肾小球硬化 肾损伤 干预机制
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浙江省甘薯种质资源的品质鉴定与聚类分析
《植物遗传资源学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：开展甘薯种质资源的品质鉴定评价,可以系统地了解种质的营养价值、食用品质和加工性能,为甘薯生产的品种选择和种质资源的育种利用提供依据。对2017-2019年浙江省第三次全国农作物种质资源普查与收集行动中征集的62份甘薯种质进行了干物率、胡萝卜素含量、生薯和熟薯可溶性糖含量以及食味的测定,并进行了品质性状的主成分和系统聚类分析。结果表明,在参试种质中,有高干物率品种24份,胡萝卜素含量≥5 mg/100 g·FW的品种5份,生薯可溶性糖含量超过水果甘薯六十日的品种7份,熟薯麦芽糖含量超过迷你甘薯心香的品种6份。生薯和熟薯均含有果糖、葡萄糖、蔗糖和麦芽糖。在生薯中蔗糖含量最高,平均含量为27.00 mg/g·FW,占可溶性糖的47.49%。在熟薯中麦芽糖含量最高,麦芽糖与可溶性糖含量高度相关（r=0.925）。食味与熟薯可溶性糖和还原糖含量、胡萝卜素含量呈极显著正相关,与生薯可溶性糖含量呈显著正相关。主成分F1、F2、F3、F4分别与食用品质、淀粉和油炸薯片加工性能、蔗糖含量有关,可以代表94.15%的甘薯品质变量信息。系统聚类分析表明,参试种质的品质类型可以分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ3个类群和Ⅰ-1、Ⅰ-2、Ⅱ-1、Ⅱ-2、Ⅲ-1、Ⅲ-2 6个亚群,依用途可以简要归类为:淀粉型23份,粮饲兼用型19份,优质食用型16份,油炸薯片型4份。总之,浙江省甘薯种质资源以淀粉型和粮饲兼用型为主,品质类型丰富,在鲜食及淀粉、全粉、薯脯、油炸薯片加工等用途上有较好的利用价值。
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表达猪表皮生长因子重组乳酸乳球菌的构建及其对结肠炎模型小鼠肠道损伤的修复作用
《动物营养学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：本试验旨在构建表达猪表皮生长因子（pEGF）的重组乳酸乳球菌（L. lactis）,并评价其对葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导的结肠炎模型小鼠肠道损伤的修复作用,为将表达pEGF重组L. lactis应用于断奶仔猪肠道保护提供重要的依据。设计含有3个拷贝数的pEGF同向串联基因序列,并进行L. lactis密码子优化,将合成的3pEGF基因片段与表达载体pNZ8148连接,构建表达pEGF的重组L. lactis。选用32只BALB/c小鼠,随机分为4组,每组8只。采用4%的DSS建立小鼠结肠炎模型,各组小鼠具体处理如下:正常对照组,试验第1～12天饮用自来水;DSS模型对照组,试验第1～7天饮用4%的DSS水溶液,第8～12天饮用自来水;L. lactis组,饮水按照DSS模型对照组处理,同时每天口服1×1012CFU L. lactis,连续12 d;重组L. lactis组,饮水按照DSS模型对照组处理,同时口服1×1012CFU表达pEGF的重组L. lactis,连续服12 d。结果显示:1)通过序列鉴定可知,3pEGF基因成功转入L. lactis;Western blot分析表明所表达的pEGF能与特异性抗体相结合,初步证明该重组蛋白具有活性。2)与正常对照组相比,DSS模型对照组小鼠结肠长度显著降低（P<0.05）;与DSS模型对照组相比,重组L. lactis组小鼠结肠长度显著增加（P<0.05）。3)与正常对照组相比,DSS模型对照组小鼠结肠闭锁蛋白（occludin）浓度显著降低（P<0.05）,D-乳酸（D-LAC）浓度显著升高（P<0.05）,二胺氧化酶（DAO）活性极显著升高（P<0.01）;与DSS模型对照组相比,重组L. lactis组小鼠结肠occludin浓度显著升高（P<0.05）,D-LAC浓度显著降低（P<0.05）,DAO活性极显著降低（P<0.01）。4)与正常对照组相比,DSS模型对照组小鼠结肠白细胞介素-10（IL-10）浓度极显著降低（P<0.01）,白细胞介素-4（IL-4）浓度显著降低（P<0.05）,肿瘤坏死因子-α（TNF-α）浓度极显著增加（P<0.01）;与DSS模型对照组相比,重组L. lacits组小鼠结肠IL-10浓度极显著增加（P<0.01）,IL-4浓度显著增加（P<0.05）,TNF-α浓度有降低的趋势。由此可见,本试验成功构建了表达pEGF的重组L. lacits,重组pEGF具有良好生物活性;小鼠口服表达pEGF的重组L. lacits可抑制结肠的缩短,改善结肠结构和通透性,调节细胞因子浓度到达正常水平,这说明表达pEGF的重组L. lacits维护了肠道屏障功能的完整性,对损伤的肠道具有一定修复作用。
关键词： 表皮生长因子 乳酸乳球菌 表达 肠道 损伤修复 结肠炎
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杨梅果渣醇提物降糖活性组分筛选及其功能评价
《中国食品学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：目的:筛选杨梅果渣醇提物降糖活性组分,评价其体内降糖活性。方法:采用AB-8大孔树脂吸附杨梅果渣粗提物,采用不同体积分数的乙醇（10%,30%,50%,70%和90%）洗脱,筛选主要活性成分含量和α-葡萄糖苷酶抑制活性高的组分,采用糖尿病小鼠模型评价其体内降糖活性。结果:30%乙醇洗脱组分（EC30）的总花色苷、总黄酮和总酚含量显著高于其它组分（P<0.05）,分别比粗提液提高了5.5,12.4倍和11.4倍;其对α-葡萄糖苷酶的半抑制浓度【IC50,（0.006±0.001）mg/mL】显著低于粗提物【IC50,（0.056±0.008）mg/mL】（P<0.05）。EC30可缓解Ⅱ型糖尿病小鼠体重减轻症状,降低空腹血糖水平;显著降低糖尿病小鼠总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-c）水平（P<0.05）,并通过增加超氧化物歧化酶（SOD）等抗氧化酶的活性来降低氧化应激作用。此外,EC30对糖尿病小鼠损伤的肝脏和肾脏细胞有一定的修复作用。结论:EC30活性成分含量和α-葡萄糖苷酶抑制活性最高,其通过改善小鼠糖代谢,降低氧化应激等代谢途径对Ⅱ型糖尿病起到改善作用。
关键词： 杨梅果渣 AB-8大孔树脂 α-葡萄糖苷酶抑制活性 Ⅱ型糖尿病小鼠 降血糖
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iTRAQ蛋白质组学分析揭示西瓜响应CGMMV胁迫的蛋白质
《核农学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：黄瓜绿斑驳花叶病毒病（CGMMV）是一种危害西瓜生产的检疫性病害。为了在蛋白质水平研究西瓜对CGMMV的胁迫应答,本研究采用同位素标记相对和绝对定量（iTRAQ）技术对CGMMV接种前后的西瓜叶片进行蛋白质组学分析,获得参与CGMMV胁迫应答的差异表达蛋白质（DEPs）,并对DEPs进行KEGG功能分析;利用Cytoscape构建蛋白质-蛋白质互作（PPI）网络;应用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）验证蛋白质在CGMMV胁迫下的表达。结果共获得61个在CGMMV胁迫下的DEPs,包括核糖体蛋白、光系统PSⅠ和PSⅡ蛋白、ATP合成酶、NADH脱氢酶、热激蛋白HSP22.8、真核细胞翻译起始因子、蔗糖合成酶和乙烯响应因子等;KEGG功能分析表明DEPs参与光合作用、次生代谢物质生物合成和植物激素信号转导等代谢途径;PPI分析显示,48 h0 h、25 d0 h和25 d48 h分别有13、32和43个DEPs在CGMMV胁迫下参与已知的蛋白互作网络;RT-qPCR获得了SUS4、RPL22、NAD7、PSBH、Defensin-like protein 5、ATPF、LSP1和HSP22.8在CGMMV不同侵染阶段的表达模式。本研究结果获得了西瓜响应CGMMV胁迫应答的蛋白质,为后续明确西瓜响应CGMMV的分子机理奠定了一定基础。
关键词： 西瓜 CGMMV iTRAQ 蛋白质互作 RT-qPCR
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基因组DNA快速提取及在转基因大豆检测中的应用
《中国油料作物学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：基因组DNA的提取是DNA分子水平研究和检测的重要环节。为补充完善现场检测方法,根据硅膜吸附DNA的特性,结合过滤膜和注射器,开发一种现场快速提取植物基因组DNA的方法。选取大豆、棉花、油菜、玉米、水稻5种主要作物的叶片和种子为样品提取DNA,利用PCR和普通重组酶聚合酶扩增（recombinase polymerase amplification, RPA）对快速提取和QIAGNE试剂盒提取的DNA进行内源基因的扩增。结果显示,快速方法不需要离心机,现场3分钟完成DNA提取;在DNA得率上要高于QIAGEN方法,但在DNA纯度上低于QIAGEN方法。不过两种方法提取的DNA都能满足PCR和RPA的需要。利用DNA快速提取方法结合普通PCR、荧光RPA和荧光定量PCR对转基因大豆SHZD32-1进行实际检测,3种方法的检测结果一致,均能准确检出大豆SHZD32-1的转基因成分。
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含膳食纤维的儿童成长型营养肉松研制
《浙江农业学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：以猪后腿肉、柑橘纤维、胡萝卜粉为原料开发含膳食纤维的儿童成长型营养肉松。以感官评价得分为指标,通过单因素试验,考查煮制压力、煮制时间、炒松时间对肉松品质的影响,并通过正交试验对工艺参数进行优化。在此基础上,基于脂肪含量、膳食纤维含量和感官评价得分,确定柑橘纤维和胡萝卜粉的添加量。结果显示:基于感官评价得分,优化的工艺参数为:煮制压力40 kPa,煮制时间40 min,炒松时间50 min。炒松结束后,每100 g物料可添加柑橘纤维4 g和胡萝卜粉10 g。按此工艺参数制得的肉松呈金黄色,絮状,肉质松软,甜咸适中,有浓郁肉香,脂肪含量为13.1%,膳食纤维含量为3.54%。
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基于FTIR技术快速测定食用油中叔丁基对苯醌含量的研究
《中国粮油学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：研究傅里叶红外光谱技术(FTIR)快速测定食用油中叔丁基对苯醌(TBBQ)含量的分析方法,系统地比较了 FTIR结合朗伯比尔定律法及FTIR结合偏最小二乘法(PLS)的建模效果.结果表明,原始波谱经差谱和二阶导数预处理后在1 656 cm-1处采用朗伯比尔定律法建模,所得的线性回归方程为TBBQ(μg/mL)=1 089.5Abs-11.35,相关系数R2为0.998 1,15组煎炸油和10组市售食用油的外部验证实验的平均相对偏差分别仅为4.89%和6.80%.采用FTIR结合PLS法对原始波谱建模,建模区间为1 675-1 645 cm-1,模型相关系数R2为0.995 6,校正均方差为0.57,预测均方差为3.32,15组煎炸油和10组市售食用油的外部验证实验的平均相对偏差分别为8.53%和8.40%,说明基于FTIR的朗伯比尔定律法和PLS法均能有效测定食用油中TBBQ含量,其中朗伯比尔定律法预测准确度较高、模型稳定性更好.
关键词： 傅里叶红外光谱(FTIR);建模;预测;食用油;叔丁基对苯醌(TBBQ)
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山核桃仁碱法脱涩工艺研究
《浙江农业学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为探索一种利用NaHCO3对山核桃仁脱涩的碱法脱涩工艺,基于综合了脱涩率与感官评分的响应值,通过单因素试验和响应面试验优化其工艺参数,并对比碱法脱涩与传统的沸水脱涩对山核桃仁游离酚、结合酚含量,以及过氧化值、碘值、酸价等指标的影响。结果显示:优化后的碱法脱涩工艺参数为脱涩温度65℃,脱涩时间100 min, NaHCO3质量分数5%,固液比(g·mL-1)1∶15。在此条件下,山核桃仁的脱涩率为92.04%,感官评分为9.2分,响应值为75.47。与沸水脱涩相比,碱法脱涩既能去除苦涩味,又能更大限度地保留山核桃仁中的结合酚,减少油脂、脂肪酸和不饱和脂肪酸的氧化,从而更好地保持山核桃仁的品质。
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青海高原油菜蜜稳定同位素产地特征与环境响应机制研究
《核农学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为探究青海油菜蜜稳定同位素特征及影响因素,本研究利用元素分析-稳定同位素比率质谱（EA-IRMS）建立了油菜蜜总δ13C值及其内源蛋白质δ13C、δ15N、δ2H、δ18O值的检测方法,分析了青海不同产地、不同年份油菜蜜及其内源蛋白质同位素特征差异,探讨了油菜蜜内源蛋白质稳定同位素与产地环境之间的关系。结果表明,青海省区域内油菜蜜内源蛋白质的δ13C值和δ15N值较稳定,不同产地、不同年份间无显著差异;不同年份油菜蜜内源蛋白质的δ18O值差异极显著（P<0.01）,不同产地油菜蜜内源蛋白质的δ18O值及δ2H值均存在极显著差异（P<0.01）。在环境影响因素中,油菜蜜内源蛋白质δ18O值与生产季节降水量呈显著负相关（r=-0.822,P<0.05）。本研究结果为青海高原油菜蜜真实性鉴别与产地溯源研究提供了理论依据与技术支撑。
关键词： 油菜蜜 内源蛋白质 稳定同位素分析 产地环境因子 分馏响应机制
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