科研产出
基因Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒VP6 N端蛋白原核表达及多克隆抗体制备
《黑龙江畜牧兽医 》 2025 北大核心
摘要:为了给基因Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒(Grass carp reovirus, GCRV-Ⅱ)诊断方法的建立和相关基因工程疫苗的研制提供材料,试验采用PCR方法扩增了GCRV-ⅡVP6 N端蛋白编码基因,将其克隆至原核表达载体pET-32a(+)中,构建重组表达质粒pET32a(+)-VP6-N,转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,构建重组菌pET32a(+)-VP6-N/BL21,经IPTG诱导并优化诱导条件表达GCRV-ⅡVP6 N端蛋白,并对表达的重组蛋白进行可溶性分析,采用Western-blot分析重组蛋白的抗原性,以纯化的重组蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,采用间接ELISA法测定多克隆抗体效价,采用体外中和试验测定多克隆抗体的体外中和效价。结果表明:扩增出大小为684 bp的GCRV-ⅡVP6 N端蛋白编码基因,构建的重组表达质粒pET32a(+)-VP6-N的PCR鉴定、酶切鉴定结果均与预期大小一致且无碱基突变。重组菌pET32a(+)-VP6-N/BL21诱导后超声破碎沉淀在40 ku处出现特异性条带,与预期蛋白质分子质量大小一致;而上清液未出现明显特异性条带。重组蛋白表达的IPTG最佳诱导浓度为0.6 mmoL/L,最佳诱导时间为6 h。重组蛋白能够与GCRV-Ⅱ阳性草鱼血清发生特异性反应,但与健康草鱼血清不发生反应。所制备多克隆抗体效价为1∶1 000 000,体外中和效价为1∶40。说明试验成功表达了重组GCRV-ⅡVP6 N端蛋白并制备了多克隆抗体,重组蛋白以包涵体形式存在,具有良好抗原性和免疫原性,制备的多克隆抗体效价较高且具有中和活性。
关键词: 草鱼呼肠孤病毒 VP6 N端蛋白 原核表达 多克隆抗体 抗原性 中和活性


基于LeMaRns模型的热带中西太平洋中上层生态系统动态分析
《水产学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要:【目的】热带中西部太平洋渔业资源丰富,是全球主要的金枪鱼渔业作业区域。为了解长期捕捞对中西太平洋中上层生态系统的影响,拟建立基于体长结构的生态系统模型LeMaRns,以模拟分析金枪鱼渔业对常见鱼种和生态指标的影响。【方法】设计F=0 (无捕捞活动)、F=Fmsy(最大可持续产量时的捕捞死亡率)、F=Frecent(最近几年的平均捕捞死亡率)、F=0.8Fmsy和F=1.2Fmsy等5种捕捞策略对10个物种进行模拟捕捞,对资源状况进行10年预测。重点分析5种捕捞策略对生物量(B)、产卵群体生物量(SSB)等2个单鱼种指标以及大型鱼类指数(LFI)、平均最大长度(MML)、典型长度(TyL)、体长分位数(LQ)等4个生态指标的影响。【结果】在无捕捞情况下(F=0),物种的生物量基本趋于平衡;在捕捞情况下,大眼金枪鱼、剑鱼、黄鳍金枪鱼、鲣和长鳍金枪鱼等金枪鱼类的生物量下降0.26%~99.75%;灰鲭鲨、平鳍旗鱼、印度枪鱼的生物量上升0.01%~12.51%;大青鲨的生物量上升36.74%,产卵群体生物量下降60%,其余物种的资源状况几乎无变化。在模拟捕捞的前6年,MML、TyL、LQ随着捕捞努力量的增大而增大,之后随着捕捞努力量的增大而减小;LFI随着捕捞努力量的增大未呈现下降趋势。【结论】在当前捕捞强度下,热带中西太平洋生态系统未来10年中处于可持续状态。LeMaRns模型可用于分析大范围的海洋生态系统,为渔业管理提供基于生态系统的分析手段。
关键词: 渔业管理 LeMaRns模型 捕捞策略 生态系统 生态指标 中西太平洋


草鱼不同月龄性腺组织学观察及性别特征基因cyp19a1a和amh的表达分析
《渔业科学进展 》 2025 北大核心 CSCD
摘要:为探讨草鱼(Ctenopharyngodon idella)性腺发生、性别分化及发育规律,本研究对1、2、3、4、5、6、12、24、36和48月龄草鱼性腺组织结构以及性别特征基因cyp19a1a和amh的表达差异进行了分析。组织切片结果显示,2月龄时,首次在生殖嵴中观察到原始生殖细胞,标志原始性腺形成。3月龄时,雌性草鱼性腺中观察到卵巢腔和卵巢小叶。4月龄时,观察到卵原细胞,表明其在3月龄时出现解剖学分化,4月龄时出现细胞学分化。4月龄雄性草鱼在性腺中观察到输精导管,5月龄时观察到精原细胞,表明其在4月龄出现解剖学分化,5月龄出现细胞学分化。12、24、36和48月龄草鱼卵巢分别处于发育的第Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ期,精巢则分别为发育的第Ⅱ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ期。荧光定量结果显示,雌性特征基因cyp19a1a在卵巢中的表达量总体呈先上升后下降再上升的趋势,2月龄时显著上调(P<0.05),3、6和48月龄时处于峰值。雄性特征基因amh在精巢中表达量总体呈先上升后下降的趋势。2月龄时显著上调(P<0.05),5月龄时达到峰值。综上,草鱼性腺发育启动时间约为2月龄,雌雄性腺分化时间分别约为3月龄和4月龄,至4龄时雌雄性腺发育成熟。本研究结果丰富了草鱼的繁殖生理学资料,也为其性别调控技术研究奠定了基础。


克氏原螯虾饲料亚麻酸与亚油酸的适宜比值
《水生生物学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要:为探究克氏原螯虾(Procambarus clarkii)饲料亚麻酸与亚油酸的适宜比值(ALA/LA),分别制备ALA/LA为0.14 (R1)、0.38 (R2)、0.74 (R3)、1.28 (R4)、2.37 (R5)和4.54 (R6)的6种实验饲料,选取初始体重为(5.99±0.12) g的克氏原螯虾进行为期8周的摄食生长实验。结果显示,R3组克氏原螯虾增重率、特定生长率和肌肉粗脂肪含量最高,且饲料系数最低;R2组性腺指数最高;R3组肌肉粗脂肪和Σn-6PUFA含量最高;R6组肌肉粗蛋白含量最高;血清中谷草转氨酶和谷丙转氨酶活性均在ALA/LA为0.38—0.74时较其他组显著降低;饲料ALA/LA显著影响了肝脏和肠道消化酶活性;肝脏过氧化氢酶和超氧化物歧化酶活性分别在R3组和R4组达到最大值;R3组肝胰腺丙二醛含量最低;肠道绒毛宽度在R3组显著升高;肝胰腺B细胞数量在R4组较其他组显著升高;ALA/LA为0.38—0.74时显著提高了克氏原螯虾的性腺指数。经折线回归分析,克氏原螯虾饲料中适宜ALA/LA为0.45—0.46。


三峡库区夏季和秋季鱼类群落结构及环境影响因子研究
《南方水产科学 》 2025 北大核心 CSCD
摘要:三峡库区鱼类资源丰富,是长江水生生物保护的关键区域。然而,随着库区蓄水和人类活动的加剧,鱼类群落已发生显著变化。基于2018年对三峡库区夏季和秋季鱼类群落结构的调查,研究分析了木洞、涪陵、云阳和巫山4个江段的优势种组成、分布特征及其与环境因子的关系,旨在为后续评估禁捕效果提供科学依据。共调查到鱼类94种,隶属于9目21科,其中包括13种外来种和15种长江中上游特有种。不同江段的鱼类群落结构在空间上具有显著性差异(p<0.05),但季节差异不显著(p>0.05)。优势种分析结果显示,三峡库区鱼类群落具有小型化特征。丰度/生物量曲线分析表明,木洞、云阳和巫山的W值分别为-0.022、-0.078和-0.225,表明这些江段的群落结构受到不同程度的干扰,而涪陵的W值为0.040,表明该江段结构较为稳定。此外,Kendall's Tau相关性分析和冗余分析(RDA)结果显示,蛇鮈(Saurogobio dabryi)和圆筒吻鮈(Rhinogobio cylindricus)的丰度随离坝距离的增加和水深的减少而升高;光泽黄颡鱼(Pelteobagrus nitidus)、翘嘴鲌(Culter alburnus)和短颌鲚(Coilia brachygnathus)的丰度则随离坝距离的缩小和水深的增加而升高;水体透明度与贝氏?(Hemiculter bleekeri)丰度呈显著负相关;水温和叶绿素a与似鳊(Pseudobrama simoni)丰度呈正相关。


西藏水生生物资源与环境本底状况调查(2017-2021)
《水产学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要:【目的】全面了解西藏水生生物资源和生态环境本底状况。【方法】中国水产科学研究院(长江水产研究所,黑龙江水产研究所,资源环境研究中心)、华中农业大学、中国科学院水生生物研究所和西藏农牧科学院水产科学研究所联合对西藏雅鲁藏布江、怒江、澜沧江、巴松错、哲古错、错那、错鄂(三江四湖)的鱼类种类组成、鱼类资源量、渔业生态环境等开展了系统调查。【结果】(1)2017—2021年西藏三江四湖采集到鱼类53种,隶属于2目5科24属,其中土著鱼45种,外来鱼6种,杂交种鱼2种;(2)基于数量和生物量,雅鲁藏布江上游鱼类优势种包括拉萨裸裂尻鱼、双须叶须鱼、异齿裂腹鱼和尖裸鲤,中游鱼类优势种包括异齿裂腹鱼、巨须裂腹鱼、拉萨裸裂尻鱼、拉萨裂腹鱼,加查至桑日江段国家二级保护动物尖裸鲤和黑斑原鮡的重量占比均显著下降,下游鱼类优势种包括弧唇裂腹鱼、西藏墨头鱼、黄斑熠鮡、墨脱裂腹鱼、平鳍裸吻鱼,怒江鱼类优势种包括裸腹叶须鱼、热裸裂尻鱼、怒江裂腹鱼,澜沧江鱼类优势种主要为光唇裂腹鱼和澜沧裂腹鱼,巴松错鱼类优势种包括异齿裂腹鱼和巨须裂腹鱼,哲古错鱼类优势种包括异尾高原鳅、高原裸鲤和拉萨裸裂尻鱼,错那和错鄂鱼类优势种均为热裸裂尻鱼和异尾高原鳅;(3)外来物种主要分布在雅鲁藏布江中游;(4)西藏三江四湖水质基本符合渔业水质标准,雅鲁藏布江上游水域总氮和总磷的浓度均低于中游和下游。【结论】2017—2021年西藏三江四湖调查到的土著鱼物种数(45种)占西藏历史上土著鱼类物种数(72种)的62.50%,异齿裂腹鱼和拉萨裸裂尻鱼是雅鲁藏布江上游和中游均有的优势种,雅鲁藏布江中游加查至桑日江段濒危物种尖裸鲤和黑斑原鮡的重量占比均显著下降;外来物种主要分布在雅鲁藏布江中游;三江四湖水质基本符合渔业水质标准。此次调查为西藏渔业资源与保护、特色资源可持续利用和生态环境可持续发展提供了重要的科技支撑。


基于粒子相对离散探测海洋中的物质输运结构-以海州湾为例
《海洋环境科学 》 2025 北大核心 CSCD
摘要:探究海洋流体中隐藏的物质输运结构对了解物质输运过程具有重要意义。本研究采用区域海洋模拟系统(regional ocean modelling system,ROMS)和粒子追踪模型模拟时变双螺旋流场和海州湾水动力场的物质输运过程,并通过四粒子相对离散(relative dispersion,RD)方法探测隐藏在流体中的物质输运结构。结果表明,四粒子RD方法能够有效识别出近海流场的物质混合屏障及物质聚集区等结构,这些结构有助于对物质的输运趋势进行宏观的预测。四粒子RD方法在海州湾的应用表明,在灌河河口附近的浅滩区域存在逆时针螺旋状的前向RD结构,这些结构形成的物质输运屏障或输运通道,可以阻碍或加快物质的输运过程。


近海大型海藻养殖被严重低估的重要碳汇形式-惰性溶解有机碳
《中国科学(地球科学) 》 2025 北大核心 CSCD
摘要:大型海藻可直接或间接向海水中贡献惰性的溶解有机碳(Recalcitrant dissolved organic carbon, RDOC),因RDOC具有非常强的抗微生物降解能力和化学属性稳定性,可在海洋中被长期储存,成为大型海藻贡献的溶解态碳汇的一种重要存在形式.然而,目前对大型海藻整个生长周期中RDOC贡献的动态变化却尚不清楚,这也限制了对大型海藻RDOC形式的溶解态碳汇效应的全面评估.本研究在桑沟湾养殖区通过对不同生长阶段海带(Saccharina japonica)进行围隔培养,利用基于藻源DOC长期微生物降解的RDOC含量测定技术解析了海带不同生长阶段RDOC贡献的变化规律,并结合海带生长模型,系统全面评估了养殖海带在整个生长周期中RDOC形式的碳汇效应.结果表明,海带从幼苗期至成熟期,其所释放溶解有机碳(DOC)中RDOC比例持续增加(从24%增加至48%),伴随海带的不断生长,平均一株海带的RDOC的贡献速率也由0.2mg C d-1增加至478mg C d-1,海带养殖水体中RDOC的主导地位日益增强.利用养殖海带的动态生长模型,通过对海带完整生长周期内的RDOC贡献进行定积分,揭示整个生长期内一株海带(湿重增加2.0kg)贡献的RDOC总量约为52.7g C,这与海带增加的生物质碳量(60g C)几乎相当.该研究是对大型海藻贡献的RDOC形式的溶解态碳汇的首次全面科学评估,表明大型海藻在整个养殖期间对RDOC形式的碳汇贡献极大,若忽略RDOC,大型海藻养殖的碳汇贡献将被严重低估.


基于有限理性理论视角的乡村治理研究
《农村经济与科技 》 2025
摘要:为提高乡村治理效能,采用文献分析法、田野调查法,基于有限理性理论视角,分析了基层治理实践中非理性现象的碎片化感知与政策的理性设计之间的明显张力。结果表明,基层治理中非理性实践表现为权力运作环境的复杂性与权力中心的波及面、家庭经济的不确定性与乡村治理工作的保守性、政策执行者的模糊理解和面临任务时间压力、个体的本能私心和政策的公共属性等问题,均给政策的理性设计带来了冲击和挑战。基于此研究,提出构建政策冲突协调机制、加强制度建设和顶层设计、完善督查机制和考核体系等提高乡村治理效能的对策建议。


密度胁迫对珍珠龙胆石斑鱼生长和生理的影响
《渔业科学进展 》 2025 北大核心 CSCD
摘要:养殖密度是影响工厂化循环水养殖的重要因素之一,为探究密度胁迫对珍珠龙胆石斑鱼(Epinephelus fuscoguttatus♀×Epinephelus lanceolatus♂)幼鱼生长、消化代谢酶活性、抗氧化酶活性和下丘脑-垂体-肾间组织(HPI)轴相关激素水平及基因表达的影响,实验选取1 800尾规格一致、体格健康的珍珠龙胆石斑鱼,随机分为3个密度梯度:低密度100尾[(3.14±0.13) kg/m3, LD]、中密度200尾[(6.31±0.13) kg/m3, MD]和高密度300尾[(9.56±0.24) kg/m3, HD]进行实验。研究表明,HD组特定增长率、肥满度及存活率显著低于其他各组(P<0.05);饵料系数和变异系数随密度的升高显著上升(P<0.05);HD组抗氧化酶和代谢酶活性显著高于其他各组(P<0.05),而消化酶活性显著低于其他各组(P<0.05);HD组HPI轴相关激素水平显著高于其他各组(P<0.05),HPI轴相关基因(crhr1、nr3c1及nr3c2)的表达量随密度的升高显著上调(P<0.05),crh-bp表达量则相反(P<0.05)。本研究结果可为深入认识密度胁迫对珍珠龙胆石斑鱼生长、消化代谢、氧化应激及内分泌的影响提供科学依据,为实际生产过程中珍珠龙胆石斑鱼幼鱼养殖密度的设定提供理论参考。
关键词: 珍珠龙胆石斑鱼 养殖密度 氧化应激 消化代谢 HPI轴

