科研产出
香蕉枯萎病菌4号生理小种致病性突变体△Focr4-1422生物学特性研究
《热带作物学报 》 2012 CSCD
摘要:为研究香蕉枯萎病菌4号生理小种致病性突变体相关致病基因的功能,研究了基因敲除子△Focr4-1422与野生型菌株193之间部分致病性相关的表型差异。结果表明,基因敲除子对巴西蕉的致病性减弱,荧光检测显示菌丝能够从根部扩散到根茎交界处的茎部。△Focr4-1422对细胞壁降解酶的抗性大大增强。基因敲除子△Focr4-1422和野生型193在相同的温度、pH值、光照条件和碳氮源培养基下的生长速率均没有达到极显著差异,两者的菌丝和孢子的致死温度也一致。
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玉米DDGS替代豆粕对草鱼幼鱼生长性能、血清生化指标和免疫指标的影响
《饲料工业 》 2012 北大核心
摘要:试验旨在研究玉米DDGS替代豆粕对草鱼(Ctenopharyngodon idellus)幼鱼生长性能、血清生化指标和免疫指标的影响。选用360尾初重为(5.52±0.09)g的草鱼苗,随机分为6个处理组,分别设为D0、D1、D2、D3、D4、D5组,每个处理组设3个重复,每个重复20尾,分别投喂用0、10%、20%、30%、40%、50%玉米DDGS替代豆粕的6种等氮饲料,饲养3周。结果表明:玉米DDGS添加量在30%以下时对草鱼生长性能没有显著影响(P>0.05);添加量在40%~50%时草鱼生长性能显著下降(P<0.05),与对照组比较各试验组血清生化指标无显著差异(P>0.05);免疫指标试验组一氧化氮、超氧化物歧化酶与对照组相比无显著差异(P>0.05);总抗氧化能力50%组显著高于0、10%和30%组(P<0.05);20%组丙二醛含量显著低于对照组(P<0.05);试验组碱性磷酸酶活性与对照组相比有显著差异(P<0.05)。
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柔嫩艾美耳球虫裂殖子全长cDNA文库的构建及应用
《动物医学进展 》 2012 北大核心 CSCD
摘要:为克隆柔嫩艾美耳球虫裂殖子阶段的功能基因的全长序列,利用SMART技术,采用Clontech公司的Creator TMSMARTTMcDNA Library Construction Kit构建了鸡球虫裂殖子的全长cDNA文库。用试剂盒提取mRNA后,以cDNA合成试剂盒合成cDNA。连接至pDNR-LIB载体,用电转化法将重组质粒转化到E.coli DH10B内得到原始文库,扩增后保存于-80℃冰箱内;最后以文库为模板,分别以研究室已成功克隆序列(EtSAG2、EtMIC-2、EtMCAT)及Sanger的部分EST序列(Contig1218)设计引物,进行PCR扩增并测序检验文库的实用性。经测定,构建的初级cDNA文库约含有8.72×107个重组子,插入的片段多在1kb~3kb之间,平均插入片段长度约1.8kb,扩增后文库保存的滴度为2.4×104 cfu/mL;通过文库的PCR扩增,不仅可以成功扩增出研究室已成功克隆的序列(EtSAG2、EtMIC-2),并成功获得EtMCAT和EST序列(Contig1218)的全长cDNA序列,经比对分析Contig1218所编码的蛋白为组织蛋白酶B样半胱氨酸蛋白酶(Cathepsin B)。结果表明,已成功构建了柔嫩艾美耳球虫裂殖子高质量的全长cDNA文库,从而为筛选鸡球虫的功能基因全长序列奠定了基础。
关键词: 柔嫩艾美耳球虫 裂殖子 cDNA文库 SMART技术
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应用抑制性差减杂交筛选副猪嗜血杆菌4型菌株可能毒力基因
《华北农学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要:为了寻找副猪嗜血杆菌可能毒力基因,采用抑制性差减杂交技术,以HPS有毒力菌株SW124(血清4型)和无毒力菌株H465(血清11型)为研究对象,构建差减杂交文库,利用Southern Blot分析和PCR鉴定进行差异基因片段的筛选。从构建的文库中共筛选得到7个特异性差异基因片段,经同源性分析,其中5个片段分别与噬菌体重组蛋白、糖基转移酶/荚膜多糖磷酸转移酶、磷酸核糖甲酰甘氨脒合酶、核糖体蛋白丙氨酸转移酶和ABC型硝酸盐/磺酸盐/碳酸氢盐转运系统周质蛋白等编码的基因有同源性;2个差异基因片段与功能未知蛋白或假定蛋白编码基因有关。利用PCR对上述可能与毒力相关的差异基因片段在9种不同血清型HPS中的分布进行了检测,结果表明,7个片段存在于多数的有毒力菌株(血清4,5,12,14,15型)中,而在无毒力菌株(血清3,11型)中均未检测到。利用SSH技术成功构建了HPS有毒力菌株SW124和无毒力菌株H465的差异表达基因差减文库,筛选获得了7个差异基因片段,且上述片段在HPS不同血清型有毒力菌株中分布广泛。
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高产抗瘟软米三系杂交稻新组合五优376
《杂交水稻 》 2012 北大核心 CSCD
摘要:五优376是广东省农业科学院水稻研究所用不育系五丰A和恢复系广恢376配组育成的高产、稳产、抗稻瘟病的软米三系杂交稻新组合,适宜广东省中北稻作区和粤北稻作区早晚季种植,2012年1月通过广东省农作物品种审定委员会审定,审定编号为粤审稻2012010。
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猪繁殖与呼吸综合征病毒蛋白质研究进展
《中国畜牧兽医 》 2012 北大核心
摘要:猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是一种折叠的正义RNA病毒,属于动脉炎病毒科(Arteriviridae),尼多病毒目(Nidovirales)。除了动脉炎病毒科,尼多病毒目还包括冠状病毒科(Coronaviruses)。15.1~15.2kb长的PRRSV基因组通过互相重叠的开放性阅读框编码蛋白质。ORF1a翻译过程中产生pp1a多聚蛋白。ORF1b表达产生了pp1ab多聚蛋白。pp1a和pp1ab经病毒蛋白酶处理后又生成了14个非结构蛋白。一些非结构蛋白为蛋白酶(NSP1、NSP1β、NSP2和NSP4)、RNA-依赖性RNA聚合酶(NSP9)、解旋酶(NSP10)和核酸内切酶(NSP11)。ORFs2-5编码GP2-GP5,ORF6编码M,ORF7编码N蛋白。ORF2b完全包括在ORF2内,表达小的非糖基化E或2b蛋白。相当一部分的囊膜蛋白是nidoviruses所特有的,所有的结构蛋白都是感染所必需的。
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香蕉凝集素基因启动子5′远端的分离分析及鉴定
《现代农业科技 》 2012
摘要:在已知香蕉果实特异表达凝集素(BanLec)启动子670 bp序列的基础上,利用染色体步移方法,克隆获得该段序列5′端上游远端序列330 bp,从而得到该启动子1 000 bp序列。通过Promoter predictions、Plant CARE软件分析表明,新获得的BanLec启动子5′端330 bp序列中具有更多组织特异性表达调控元件。构建总长度为1 000 bp的BanLec启动子表达载体,以35 S启动子和原有670 bp长度BanLec启动子表达载体为对照,利用基因枪转化香蕉根、叶和果实,测量GUS基因和GFP基因瞬时表达,结果证明长度为1 000 bp BanLec启动子为果实特异表达启动子,启动活性高于原有的670 bp BanLec启动子和35S启动子。
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