科研产出
园艺地布在现代果园行间管理中的应用
《安徽农业科学 》 2013 北大核心
摘要：园艺地布覆盖是在果园行间铺设地布作为覆盖物的一种果园管理方法,在我国果园生产管理中应用起步较晚,缺乏研究。果树行间覆盖园艺地布具有保持土壤湿度、提高肥料利用率、增加果实产量、保持水土、减少氮素流失等重要作用。比较目前常见的果园行间管理方式与园艺地布覆盖的优缺点,分析投资成本,指出园艺地布覆盖技术要点,为该技术在现代果园中应用奠定基础。
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单端孢酶烯3-0-乙酰转移酶编码基因Tri101的原核表达及多克隆抗体制备
《中国农业科学 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：[目的]克隆Tri101并通过原核表达获得纯化蛋白,通过免疫SPF大白兔获得高效价、高灵敏度的多克隆抗体,为Tri101蛋白及转Tri101作物的检测提供抗体基础.[方法]以禾谷镰刀菌(Fusarium graminearium)F3210为材料,PCR法获得Tri101并连接至表达载体pET29a(+),将重组表达载体转化大肠杆菌BL21 (DE3)后利用IPTG进行诱导表达.利用纯化表达产物制备多克隆抗体.[结果]SDS-PAGE分析结果表明,Tri101在大肠杆菌BL21(DE3)中得到表达,重组蛋白大小为50 kD左右,以包涵体形式存在.利用HisTrap亲和柱纯化重组蛋白,最佳咪唑洗脱浓度为200 mmol.L-1.采用烟草蚀纹病毒蛋白酶切除重组蛋白中的His标签,酶切产物经HisTrap亲和柱再次纯化后免疫SPF大白兔,制备多克隆抗体.经ELISA法检测抗体效价为1∶12 000,检测灵敏度为0.05×10-6μg·mL-1.Western blotting结果证明制备的多克隆抗体对Tri101具有较好的专一性.[结论]通过Tri101的克隆及原核表达,获得了纯化的融合蛋白,通过免疫动物制备了兔源多克隆抗体,可用于Tri101蛋白及转Tri101小麦的检测.
关键词： 单端孢酶烯3-0-乙酰转移酶 Tri101 原核表达 多克隆抗体 小麦赤霉病
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高效液相色谱-串联质谱法测定小麦和土壤中氨氯吡啶酸的残留量
《农药学学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：建立了小麦植株、麦粒、面粉、麦麸和土壤样品中氨氯吡啶酸的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)检测方法。样品用丙酮提取,经N-丙基乙二胺(primary secondary amine,PSA)串联石墨化炭黑柱净化,以Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱分离,以电喷雾电离串联质谱正离子多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)模式进行测定。结果表明:在0.01、0.1、0.5、1 mg/kg 4个添加水平下,氨氯吡啶酸在小麦植株、麦粒、面粉、麦麸和土壤中的平均回收率在78.9%~97.9%之间,相对标准偏差在3.6%~9.6%之间。该方法样品前处理简单、快速、分析时间短,灵敏度、准确度和精密度均符合农药残留检测要求,适用于小麦和土壤中氨氯吡啶酸残留的检测。
关键词： 氨氯吡啶酸 高效液相色谱-串联质谱 固相萃取 小麦 残留
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猪链球菌2型溶血素成熟蛋白的原核表达及其生物学特性与免疫保护性
《江苏农业学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：根据猪链球菌2型溶血素(SLY)的基因序列设计引物,以江苏分离株SS2-1的基因组为模板,扩增除信号肽序列外的溶血素成熟蛋白基因,并克隆到表达载体pET-32α(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3)。重组菌经1 mmol/L IPTG诱导,在37℃下4 h时表达产物(分子量约为7.2×104)达到高峰,表达量约占菌体总蛋白质的20%,表达产物在上清和包涵体中各占一半。将上清经镍柱亲和层析纯化,纯化蛋白质经Western blotting鉴定呈阳性,对绵羊红细胞、鸡红细胞的溶血效价分别为1.707×105HU/mg、4.267×104HU/mg,并可引起HEp-2和Vero细胞的颗粒增多、圆缩和脱落。纯化蛋白质对BALB/c小鼠的免疫保护率为83.3%(5/6)。这为进一步研究SLY致病机理和研制猪链球菌新型疫苗奠定了基础。
关键词： 猪链球菌2型 溶血素成熟蛋白 原核表达 生物学特性 免疫保护性
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不同粗饲料组合对波尔×徐淮山羊肉品质和血液生化指标的影响
《中国畜牧杂志 》 2013 北大核心
摘要：试验旨在研究青贮、稻草和苜蓿不同组合对山羊肉品质和血液生化指标的影响。选取30只3月龄、体重(14±2)kg的波尔×徐淮杂交山羊,随机均分至3组,试验羊分别采食青贮:稻草:苜蓿为3∶1∶0(A组)、1∶1∶2(B组)、2∶0∶2(C组)。预试期7 d,正试期112 d。结果表明:C组背肌系水力显著高于B组(P<0.05),B组显著高于A组(P<0.05);C组股肌剪切力显著高于A、B组(P<0.05),C组系水力显著高于A组(P<0.05),A、B间差异不显著(P>0.05);C组背肌脂肪含量显著高于A、B组(P<0.05),A、C组股肌与臂肌蛋白含量显著高于B组(P<0.05);B组臀肌蛋白含量显著高于A、C组(P<0.05),A、C组脂肪含量显著高于B组(P<0.05);C组血液中总蛋白显著高于A组(P<0.05);B、C组白蛋白显著高于A组(P<0.05);C组球蛋白显著高于A组(P<0.05)。
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发酵床育肥猪舍内湿热环境与通风状况研究
《江苏农业学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：为探讨不同发酵床猪舍结构和管理因素对舍内湿热环境和通风状况的影响,选择彩钢瓦和大棚膜两种结构类型的半钟楼式发酵床猪舍,采用猪舍环境数据自动监测系统,对发酵床猪舍的温度、湿度、CO2浓度进行连续监测,分析冬季、春季和夏季舍内湿热环境状况,确定发酵床猪舍的通风量。结果表明,测试期间不同类型的发酵床猪舍内平均温度为20.3℃,湿度为77.8%,CO2浓度为1 720 mg/m3,通风量为3 018 m3/h;两种发酵床猪舍内平均温度差异不显著(P>0.05),大棚膜结构猪舍内湿度和CO2浓度显著高于彩钢瓦结构猪舍(P<0.05),冬季发酵床猪舍CO2浓度显著高于夏季(P<0.05);两种发酵床猪舍平均通风量差异不显著(P>0.05),夏季通风量最大,平均为4 460 m3/h,冬季通风量最小,平均为786 m3/h。供试的两种猪舍结构基本满足江苏地区发酵床生猪饲养对温度和通风环境的需求,但需要进一步增加舍内空气流动以降低舍内湿度过高对生猪生产带来的影响。
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发酵床猪舍内气载需氧菌的分布状况
《江苏农业学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：本研究以选择性培养基(营养琼脂、虎红氯霉素琼脂、甘露醇氯化钠琼脂、伊红美兰琼脂及沙门和志贺菌属琼脂)为采样介质,采用自然沉降法,通过培养计数,对发酵床猪舍和水冲清粪猪舍的气载需氧菌(细菌总数、真菌总数、葡萄球菌、大肠菌群、沙门氏菌)进行了监测。研究结果表明发酵床猪舍气载细菌总数、真菌总数、葡萄球菌含量、大肠菌群含量分别为4.57×104~8.71×104CFU/m3、1.26×104~2.27×104CFU/m3、3.10×104~5.59×104CFU/m3和1.86×103~3.07×103CFU/m3,水冲清粪猪舍气载细菌总数、真菌总数、葡萄球菌含量、大肠菌群含量分别为6.00×104~10.00×104CFU/m3、1.54×104~2.60×104CFU/m3、3.62×104~6.52×104CFU/m3和1.77×103~2.57×103CFU/m3,沙门氏菌在2种猪舍中都未检出。发酵床猪舍环境气载需氧菌季节性波动较大,需氧总菌含量(细菌总数、真菌总数)夏季最高,秋季最低,而冬季的气载葡萄球菌含量最高。采用磷酸盐、硅酸盐的复合粉剂在消毒后1 h可明显降低夏季发酵床猪舍气载微生物浓度,而不影响发酵床垫料微生物含量。
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