科研产出
大豆玉米带状复种模式下种植密度对玉米植株生长和产量的影响
《中国农学通报 》 2023 CSCD
摘要：为了明确江苏沿海地区大豆玉米带状复合种植模式下玉米适宜的种植密度，以‘苏科玉1705’和‘江玉877’为试验材料，设置了3个种植密度（60000、67500、75000株/hm~2），研究了种植密度对玉米植株生长和产量的影响。结果表明，种植密度对2个玉米品种的株高、穗位高、茎粗、叶片性状和产量性状的影响基本一致。随种植密度的增加，玉米株高、穗位高、倒伏率、倒折率、空杆率逐渐提高，茎粗、叶长、叶宽、叶片夹角和产量逐渐降低；在60000株/hm~2密度下‘苏科玉1705’和‘江玉877’产量最高分别为：6299、5431 kg/hm~2，且倒伏、倒折、空杆率最低；在67500、75000株/hm~2密度下，2个品种倒伏、倒折率提高，生产风险加大。品种间比较，相同种植密度下‘苏科玉1705’的叶宽、叶面积、叶片夹角、倒折率、秃尖长较低，穗长和粒重较高，产量显著高于‘江玉877’。综上，在江苏沿海地区，带状复合种植模式下‘苏科玉1705’和‘江玉877’在60000株/hm~2种植密度下可实现高产。
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H9亚型禽流感广谱亚单位疫苗抗原设计及其免疫效力
《江苏农业学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：H9N2 亚型禽流感病毒(AIV)变异快、传染性强,由病毒流行株制备而成的灭活疫苗达不到完全保护的效果,导致H9N2 亚型禽流感时有发生.为研发具有广谱保护性的H9 亚型禽流感疫苗,本研究利用生物信息技术,对H9 亚型AIV HA基因序列进行分析,设计获得HA基因序列.将HA基因构建于杆状病毒表达系统,表达的重组HA蛋白血凝效价为1×212,与不同分支H9 亚型AIV阳性血清具有良好的交叉反应活性.将重组蛋白制备成疫苗(rHA疫苗)免疫 10 日龄雏鸡,免疫后 28d将不同亚分支的H9 亚型AIV流行毒株 115 和YZ株分别以1×106 EID50(半数鸡胚感染量)感染试验鸡,rHA疫苗组交叉保护效力明显优于商品苗组.本研究结果表明H9 亚型禽流感广谱型亚单位疫苗具有较好的应用前景,可以用于防控H9 AIV感染.
关键词： H9亚型禽流感 HA基因 杆状病毒表达系统 广谱亚单位疫苗 免疫
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通过遗传转化Rfo获得青花菜Ogura CMS恢复系
《中国农业科学 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：【目的】将来自萝卜的胞质不育恢复基因Rfo导入到青花菜Ogura细胞质雄性不育（cytoplasmic male sterility,CMS）主栽商业品种‘耐寒优秀’（命名为SFB45）中，获得Ogura CMS恢复系，打破Ogura CMS材料在生产上无法再利用的现状，为优异种质的创制和改良提供新途径。【方法】利用基因合成的方法克隆萝卜Rfo的CDS及其启动子序列，构建表达载体pRfo::Rfo。通过农杆菌介导的遗传转化方法侵染SFB45的具柄子叶和下胚轴，进行再生、抗性苗筛选和PCR鉴定获得阳性植株，开花期观察转基因植株的育性恢复情况；用亚历山大染液分析对照组及阳性株的花粉活力；分别提取对照组及阳性株<3 mm和>3 mm花蕾的RNA并反转录成单链cDNA，设计特异引物，利用RT-PCR分析Rfo及绒毡层和花粉壁发育相关基因在SFB45及对应的育性恢复材料花蕾中的表达差异。【结果】通过遗传转化共获得10个阳性株系，其中8个株系育性得到不同程度的恢复，花粉活力为84.2%—90.4%。RT-PCR分析结果表明，育性恢复植株花蕾中Rfo表达，绒毡层发育关键调节因子DYT1和TDF1及花粉壁主要成分孢粉素合成所必需的基因ACOS5在育性恢复植株<3 mm花蕾中上调表达。绒毡层降解相关基因AMS、四分体胼胝质壁及花粉外壁发育所必需的基因CalS5和CYP703在育性恢复植株>3 mm花蕾中上调表达。分析阳性株系R-1、R-3和R-6自交及杂交后代发现转入的Rfo能稳定遗传，符合孟德尔遗传。【结论】通过遗传转化Rfo获得了优良青花菜Ogura CMS商品种SFB45的育性恢复系，且Rfo的转入使绒毡层及花粉壁发育相关基因恢复正常表达。
关键词： 青花菜 遗传转化 Ogura CMS Rfo 绒毡层和花粉壁发育相关基因
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一种水溶性佐剂CS-GTA-ML对H7N9亚型禽流感灭活疫苗免疫效果评价
《中国兽医学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：旨在合成一种直接溶解在生理缓冲溶剂中、可注射的功能化修饰的壳聚糖衍生物作为兽用佐剂，用于替代铝盐佐剂。壳聚糖中的氨基与环氧丙基三甲基氯化铵(GTA)中的环氧基团发生加成开环反应，偶联成CS-GTA中间体；再与4-(2-氯乙基)吗啉(ML)发生氮烷基化反应生成终产物CS-GTA-ML。产物通过FI-IR、~1H NMR、Zeta电位等表征手段检测其结构及重要成分的嫁接率；通过溶血试验、细胞活性计数(CCK-8)和组织病理分析(HE)方法评估了CS-GTA-ML的生物安全性，为注射剂型的使用提供了安全保障；配伍H7N9亚型流感灭活病毒，对雌性ICR小鼠和SPF鸡进行皮下免疫，测定对其血凝抑制(HI)效价，并通过流式分析仪初步探索脾淋巴细胞活化能力。结果显示，作为抗原递送系统，CS-GTA-ML在不同pH值的水溶液中均可溶解，其中GTA和ML的嫁接率分别约为53%,15%,且带有15.8 mV的正电荷。当质量浓度在1 g/L以下时，体外脾细胞存活率在88%以上，且对机体重要组成器官无损伤；当质量浓度高达10 g/L时，体外红细胞溶血率仅0.5%左右，具有良好的生物相容性。与单一的H7N9疫苗和ISA206+H7N9疫苗对比，CS-GTA-ML有显著的血凝抑制作用。通过相关细胞因子及流式细胞分析发现CS-GTA-ML倾向于CD4~+T细胞分化趋势，具有体液免疫和细胞免疫双重免疫效力。
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高效液相色谱法分析干旱胁迫下烟草中游离氨基酸的含量变化
《分析科学学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：建立了柱前衍生-高效液相色谱高灵敏、快速测定新鲜烟叶中21种游离氨基酸的新方法。新鲜烟叶样品经0.1 mol/L的盐酸超声提取30 min后，以6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚胺基甲酸酯（AQC）作为衍生试剂，反向色谱柱分离，二极管阵列检测器测定。在最佳实验条件下，21种氨基酸在9 min内实现完全分离，在低、中、高3个浓度水平下的加标回收率在84.7%～104%之间，相对标准偏差（RSD）为1.8%～5.1%,定量限在0.02～0.10 mg/g之间。基于该方法，探讨了干旱胁迫下游离氨基酸含量的变化趋势。研究表明，在干旱胁迫下，总游离氨基酸、脯氨酸、天冬酰胺等含量明显升高，且大部分氨基酸在旺长期时变化最大，对明晰游离氨基酸参与烟草抗逆的调控机制提供了数据基础和技术支撑。
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抗无乳链球菌天然产物的筛选
《扬州大学学报(农业与生命科学版) 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：基于MedChemExpress天然产物库筛选对无乳链球菌有抗菌效果的天然产物，采用成药性预测工具Swisse-ADME分析其成药性，并测定抗菌天然产物对人源、奶牛源、鱼源等不同来源菌株的最小抑菌浓度、最小杀菌浓度和最小生物被膜清除浓度。结果表明：从2 443个天然产物中共鉴定出104个对无乳链球菌有显著抗菌效果的天然产物，其中15个成药性前景较好的天然产物，其最小抑菌浓度介于4～256μg·mL-1之间，藤黄酸、血根碱、白屈菜红碱、冬凌草甲素和积雪草酸等5个天然产物对无乳链球菌的最小杀菌浓度介于4～64μg·mL-1之间，最小生物被膜清除浓度介于32～128μg·mL-1之间，具有开发成新型无乳链球菌抗菌药物的潜力。
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黄秋葵种质资源的嫩果表型性状多样性分析
《南方农业学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：【目的】分析150份黄秋葵嫩果的表型性状多样性，为筛选黄秋葵新品种选育材料提供参考。【方法】以150份黄秋葵种质资源为材料，对黄秋葵嫩果的12个质量性状（果实大小、果实弯曲度、果实类型、果实色、果实表面、果实光泽、果顶形状、基部收缩强度、果棱间表面、果柄表面、果柄色和果姿）和9个数量性状（果实棱数、子房室数、单果重、果蒂重、蒴果长度、蒴果宽度、果柄长、果柄宽和果肉厚）进行调查统计，采用主成分分析、相关分析和聚类分析对嫩果表型性状进行多样性分析。【结果】150份黄秋葵种质材料在果实大小、果实弯曲度、果实类型、果实表面、果实光泽、基部收缩强度、果棱间表面、果柄表面和果姿上分布较为集中，在果实色、果顶形状和果柄色上分布较分散。98.0%果实为中果，小果仅占2.0%；果实弯曲度以直果最多（70.7%）；果实类型以棱果最多（82.0%）；果实表面以光滑最多（87.3%）；果实光泽以略有光泽最多（91.3%）；基部收缩强度以无基部收缩最多（66.0%）；果棱间表面以平最多（91.3%）；果柄表面类型以多刺最多（60.7%）；果姿以微斜（58.7%）和直立（36.7%）较多；果实色以绿色（46.0%）和深绿（25.9%）较多；果顶形状以尖（43.4%）和长尖（35.3%）较多；果柄色以绿色（66.0%）和深绿（18.6%）较多。主成分分析结果显示，前3个主成分的贡献率分别为46.413%、18.050%和13.513%，累积贡献率达77.976%。9个数量性状的变异系数为8.73%～25.97%，其变异系数排序为单果重＞果实棱数＞果蒂重＞果柄长＞果肉厚＞蒴果长度＞子房室数＞蒴果宽度＞果柄宽。通过聚类分析表明，供试材料划分为三大类群，果实类型在不同类群间集中分布，其中，第Ⅰ类群几乎为棱果，第Ⅱ类群为圆果，第Ⅲ类群为有棱圆果。【结论】150份黄秋葵种质材料的嫩果果实表型性状具有丰富的遗传多样性，各性状间存在一定的相关性，可作为后续新品种选育材料。
关键词： 黄秋葵 嫩果 表型性状 多样性分析 聚类分析 主成分分析
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溶剂萃取-气相色谱-三重四极杆串联质谱法测定水体和土壤中6种邻苯二甲酸酯
《分析科学学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：采用溶剂萃取分离法提取水体和土壤中的邻苯二甲酸酯（PAEs）,优化了提取剂及提取步骤，建立了简便、快速、高通量测定水体和土壤样本中6种PAEs的气相色谱-三重四极杆串联质谱法（GC-MS/MS）。结果表明，水样和土样的最佳萃取剂分别为正己烷和乙腈，提取容器和涡旋时间是影响PAEs回收率的关键因素，离心温度、超声时间、提取次数和氮吹等步骤对PAEs回收率影响较小。在最优条件下，在0.5～100μg/L范围内6种PAEs的峰面积与浓度线性关系良好（相关系数R~2＞0.9926）。选取了1种河水和2种土壤基质，分别在3个加标水平和2个加标水平下验证了提取方法的准确度和精密度，6种PAEs在水体和土壤中的平均回收率分别为85.6%～112.5%和94.3%～114.3%,相对标准偏差均小于10%。方法适用于水体和土壤等环境样本中PAEs残留的监测。
关键词： 邻苯二甲酸酯 土壤 水 气相色谱-三重四极杆串联质谱法
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鸡DEC-205结合肽的筛选及体外鉴定
《中国兽医学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：为筛选鸡DEC-205的优势结合肽，以小鼠CD8α信号肽、鸡DEC-205具有结合作用的3个C型凝集素样结构域（CTLD-4、CTLD-5和CTLD-6）、人IgG1 Fc和His标签作为目的基因，设计构建重组表达质粒pcDNA3.1-DEC-205-Fc-his和pcDNA3.1-Fc-his（用于对照）;转染293t细胞，Western blot鉴定蛋白表达；镍亲和层析法纯化蛋白，用于噬菌体线性12肽库筛选结合肽，protein G/A交替进行了3轮液相淘选，对第3轮噬斑提取DNA测序并统计肽重复率。对重复率较高的短肽进行合成，ELISA及荧光显微镜观察鉴定肽与重组蛋白的结合效果。Western blot结果显示，转染重组质粒的293t细胞裂解液和细胞上清均可表达目的蛋白，DEC-205-Fc-his蛋白约90 kDa, Fc-his蛋白约35 kDa,与预期大小符合，纯化的蛋白作为靶标进行3轮淘选后，15条序列出现重复，其中DLPVNSVIFPFR（DL）重复率最高（达到6.41%）。ELISA及荧光检测结果显示，合成的DL短肽可结合表达DEC-205-Fc-his的细胞，与表达Fc-his的细胞亲和性较低。筛选获得的DL短肽经体外鉴定，结果显示是鸡DEC-205的潜在配体，相关结果将为研发鸡DEC-205新型靶向策略奠定基础。
关键词： 鸡DEC-205 结合肽 噬菌体展示12肽库 液相淘选
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