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荔枝SRAP-PCR反应体系的优化

基因组学与应用生物学 2009 北大核心 CSCD

摘要:SRAP(sequence-related amplified polymorphism)是基于基因的内含子和外显子区域进行检测的新型分子标记技术,具有多态性高、重复性好、易测序、便于克隆目标片段等特点,在荔枝(Litchi chinensis Sonn)中还没有相关的研究报道。为了建立适合荔枝的SRAP反应体系,对反应体系中的DNA模板、Mg2+、dNTP、引物、Taq DNA聚合酶诸因子的用量进行了探索,确立了适合荔枝的SRAP反应体系为:在20μL反应体系中,模板DNA为40ng,Mg2+浓度2.5mmol/L,dNTP0.3mmol/L,引物5mmol/L,Taq DNA聚合酶1.0U。扩增程序为:94℃预变性3min,反应前5个循环在94℃ 1 min、35℃ 1 min、72℃ 1 min的条件下运行;随后的35个循环退火温度提高到50℃;最后72℃延伸10min。利用该反应体系对荔枝10个不同品系进行SRAP反应,用5%的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,结果显示:不同品系间DNA谱带多态性丰富。证实该体系稳定可靠,可以用于荔枝的分子标记研究。

关键词: 荔枝 SRAP-PCR反应体系 优化

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EM菌剂对银合欢草粉发酵脱毒的研究

饲料工业 2009 北大核心

摘要:以EM菌剂为发酵菌种,对银合欢草粉的发酵脱毒条件进行了研究。研究结果表明:有效微生物菌群能够有效降解银合欢草粉中的含羞草素,同时又使草粉保存较多的有效养分和具有较高的生物活性。有效微生物菌群处理银合欢草粉的适宜发酵条件为:发酵温度30℃,有效微生物菌群的发酵浓度2%,银合欢草粉的含水量70.47%,发酵时间35d以上,银合欢草粉的含羞草素的降解率为60%~70%,单宁降解率为60%~70%。发酵后样品中含酵母菌、乳酸菌等有益菌。

关键词: EM 银合欢草 脱毒

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酶法提取椰子蛋白质及其对亚基的影响

果树学报 2009 北大核心 CSCD

摘要:研究酶制剂的种类、用量、提取温度、pH、料液比等因素对椰子蛋白质提取率的影响,通过正交试验研究最佳的提取条件。得到的椰子蛋白质进行SDS-PAGE分析,研究酶法提取对椰子蛋白质亚基组成的影响。结果表明,添加质量分数0.3%的风味蛋白酶的提取效果最好,各因素对提取率影响的次序为:料液比>pH>温度>提取时间,其中,料液比和pH对提取率的影响达到了显著水平;最佳工艺参数为:酶质量分数0.3%、50℃、pH8.5、料液比1∶15和时间2h,在此条件下,椰子蛋白质的提取率为78.28%。SDS-PAGE分析表明,风味蛋白酶对椰子蛋白的酶解作用十分显著,与缓冲溶液提取的椰子蛋白质相比,酶法提取的椰子蛋白质中小分子质量亚基含量很高。

关键词: 椰子蛋白质 蛋白酶 提取 SDS-PAGE 亚基

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巴西橡胶树K~+通道蛋白HbKCO1的原核表达

中国农学通报 2009 北大核心

摘要:K+通道蛋白在维持细胞离子平衡等生命活动中发挥重要的作用。利用真核或原核表达系统高效表达K+通道蛋白是深入研究其生化特征及生理功能的基础和前提。该研究在成功克隆巴西橡胶树(Hevea brasiliensis)K+通道蛋白基因cDNA全长的基础上,将HbKCO1 cDNA编码区插入pET-28a构建原核表达载体pET-28a(+)-HbKCO1,并分别转化大肠杆菌RosettaTM(DE3)pLysS和BL21(DE3)菌株。经过条件优化,转化的大肠杆菌RosettaTM(DE3)pLysS菌株经1mM IPTG诱导3h能够高效表达HbKCO1重组蛋白,但同等条件下转化的BL21(DE3)菌株仅能微量表达。HbKCO1重组蛋白原核表达具有菌株依赖性。

关键词: 巴西橡胶树 K+通道基因 HbKCO1 高效表达

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小果型西瓜离体诱导四倍体的初步研究

安徽农业科学 2009 北大核心

摘要:[目的]为小果型西瓜三倍体的育种奠定基础。[方法]以二倍体小果型西瓜优良自交系MH-39-1的子叶为外植体进行离体诱导四倍体的研究。[结果]100 mg/L秋水仙素处理子叶的不定芽分化率达66.7%,平均分化不定芽6.7个。400 mg/L秋水仙素处理的四倍体诱导率为20.0%。秋水仙素处理12 h的不定芽分化率为83.3%,处理48 h的不定芽分化率为16.7%。秋水仙素处理24~36 h的四倍体诱导率为16.7%。4.0 mg/L 6-BA处理的不定芽分化率为83.3%,1.0 mg/L 6-BA处理的不定芽分化率为58.3%。再生芽在4种生根培养基上的生根率均在90%以上,在不添加植物生长调节剂的培养基上再生苗的平均生根数仅为6.5条,添加NAA的培养基上再生苗的平均生根数在10条以上,但根短而粗。[结论]初步确定秋水仙素离体诱导小果型西瓜四倍体的适宜浓度和处理时间为400mg/L和24 h。

关键词: 西瓜 四倍体 离体诱导

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黑斑病菌侵染后杨树叶片细胞超微结构的变化

中国农学通报 2009 北大核心

摘要:为了解黑斑病菌侵染杨树叶片后,叶片细胞超微结构的变化,以对黑斑病菌高抗的无性系NL895杨(Populus euramericana CL"NL895")和感染黑斑病菌的加杨(Populus canadensis Moench)叶片为试验材料,进行了扫描电镜和透射电镜分析,这为进一步研究黑斑病菌的致病机制提供了细胞学方面的理论依据。

关键词: 杨树 黑斑病菌 超微结构变化

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椰花汁多糖提取工艺的研究

食品工业科技 2009 北大核心 CSCD

摘要:研究椰花汁多糖的提取工艺。首先采用单因素实验研究料水比、温度、pH、提取时间对多糖提取率的影响;然后采用正交优化实验探讨椰花汁多糖提取的最佳工艺参数。结果表明,椰花汁多糖提取工艺的最佳条件为:料水比1∶10、温度75℃、pH8·0、提取时间120min,在此条件下粗多糖提取率为11·13%。

关键词: 椰花汁 多糖 提取

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叶黄素着色研究进展

安徽农业科学 2009 北大核心

摘要:综述了叶黄素作为着色剂在应用方面的研究进展,从叶黄素的结构性质入手,阐述了其作为着色剂的重要功效。并展望了未来叶黄素发展的广阔前景。

关键词: 叶黄素 着色剂 着色

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植物microRNA及其抗胁迫作用机制研究进展

安徽农业科学 2009 北大核心

摘要:对miRNA的特点、作用机制、合成、主要研究技术方法及植物miRNA在抗胁迫方面的作用进行了综述。

关键词: 植物microRNA 胁迫 基因调控

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枇杷灰斑病菌的生物学特性

果树学报 2009 北大核心 CSCD

摘要:为了抑制枇杷灰斑病菌[Pestalotiopsis eriobotryfolia(Guba)Chen et Chao]的生长发育,防治枇杷灰斑病害的发生,研究了温度、湿度、pH值、光照、营养对枇杷灰斑病菌生长、产孢和孢子萌发的影响。该菌在PDA培养基上菌丝生长的温度为8~36℃,最适24℃;产生分生孢子的温度为8~34℃,最适26℃;分生孢子萌发的温度为8~36℃,最适28℃。在pH3~10的PDA培养基上该菌均能生长和产孢,产生分生孢子最适pH4,分生孢子萌发和菌丝生长最适pH5。分生孢子在饱和湿度或水滴中萌发快,相对湿度低于90%时不能萌发。麦芽糖、蔗糖对分生孢子萌发有促进作用,硫酸铵、磷酸铵、硝酸铵对分生孢子萌发有抑制作用。分生孢子在50℃温水中经10min或55℃温水中经2min处理完全失去活力。菌丝体在50℃温水中经15min或55℃温水中经2min处理完全失去活力。

关键词: 枇杷 枇杷叶拟盘多毛孢 生物学特性

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