科研产出
Marc-145细胞无血清培养驯化、代谢分析及PRRSV增殖能力比较
《江苏农业科学 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：采用逐步降低培养液中血清用量的方法对Marc-145细胞进行无血清培养驯化并考察其生长代谢、增殖PRRSV(猪繁殖及呼吸综合征病毒)的能力。结果表明,通过在细胞对数生长期更换低浓度血清的培养液或传代操作,Marc-145细胞可完全适应含5%新生牛血清的营养条件,经3次传代后,Marc-145细胞可营正常贴壁生长。然而在1%新生牛血清的营养条件下,初次培养于该条件的Marc-145细胞伪足不伸展,贴壁时间明显延长。经过在该1%血清浓度下10次传代后,Marc-145细胞可贴壁生长,维持较高的存活率,但贴壁较松。由此Marc-145细胞进一步驯化适应无血清悬浮培养条件,筛选获得能够在无血清条件下悬浮生长的Marc-145细胞,且生长状态良好。比较在不同血清浓度及不同培养方式下生长的Marc-145细胞增殖PRRSV的能力,无血清条件下悬浮生长的Marc-145细胞对PRRSV的增殖性能没有改变。
关键词： Marc-145细胞 驯化培养 无血清培养 PRRSV
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陆地棉超矮秆突变体SSH文库的构建及分析
《江苏农业学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：以陆地棉超矮秆突变体超矮1号及其近等基因系M104(正常株高)为材料提取棉花总RNA,以M104为促减物(Dirver),超矮1号为被测物(Tester),利用SSH法建立差异表达cDNA文库;分别以超矮1号和M104的cDNA为探针进行反向Northern杂交,筛选差异表达克隆,进行序列相似性分析。结果表明,通过建立差异表达cD-NA文库共获得2 530个克隆,通过反向Northern杂交共筛选到668个差异表达克隆,测序后得到539个质量合格的EST序列,共得到122个Unigene,有36个重叠群,86个单拷贝序列,平均长度1 319.26 bp。这些EST所涉及的基因,主要是与代谢和次生代谢调节、转录调控、生物合成、细胞凋亡、信号传导有关联。SSH文库的构建为陆地棉超矮秆突变形成的相关基因的克隆和结构功能研究奠定了基础。
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甘蓝型油菜授粉功能缺失突变体及其野生型柱头差异蛋白研究
《中国农业科学 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：【目的】基于蛋白质组学水平分析甘蓝型油菜野生型和授粉功能缺失突变体的柱头差异蛋白。【方法】运用双向电泳技术研究甘蓝型油菜柱头授粉功能缺失的突变体FS-M1及其野生型(宁油10号)柱头差异蛋白的表达,结合质谱(MALDI-TOF-TOF/MS)分析与蛋白质数据检索技术,鉴定甘蓝型油菜野生型柱头上调表达蛋白的性质和功能。【结果】获得了甘蓝型油菜野生型柱头显著上调且可鉴定的蛋白有33个,包括抗胁迫/防御、氧化还原反应平衡调节、碳水化合物代谢、蛋白质水解、蛋白折叠、氨基酸和氮代谢、核苷酸代谢等7类功能蛋白。【结论】甘蓝型油菜野生型柱头中上调表达蛋白功能广泛,这些表达蛋白可能与甘蓝型油菜柱头授粉功能的调控有关。
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改良型通风防虫大棚温湿度变化及其对番茄生长的影响
《江苏农业学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：常规塑料大棚两侧通风窗较窄,导致棚内通风不良,病害严重,作物生长受到严重影响。本试验在8.00 m宽普通钢架大棚的基础上,通过加大两侧通风口高度、增开两端通风窗、将大门与通风窗覆盖20目防虫网,对钢架大棚结构进行了改进,同时研究了改良型通风防虫大棚在高温季节对番茄生长的影响。试验结果表明:2012年5月晴天气候条件下改良型通风防虫大棚内温度比普通大棚降低了7.5℃,相对湿度提高了12.5个百分点。与普通大棚相比,改良型通风防虫大棚内番茄生长旺盛,病虫害大幅减少,品质好,每株果实数增加了22.2%,单果重增加了16.7%,产量提高了43.6%。
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蓝藻堆肥中养分及微囊藻毒素含量变化
《江苏农业学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：为探索和优化开放环境中脱水藻泥堆肥化处理工艺,以滇池打捞的蓝藻藻泥为原料,采用室外堆肥方法,研究米糠、麦麸、酒糟作为填充剂对蓝藻堆体的养分含量、发芽指数和微囊藻毒素(MCs)含量的影响,并对这些因子之间的相关性进行了分析。结果表明:堆肥结束后,碳素损失率为23.2%～36.2%,氮素损失率为40.7%～56.9%,总磷、总钾和灰分含量均增加;堆肥结束后,各处理的总养分含量(N+P2O5+K2O)均能满足有机肥料标准,堆肥50 d后各处理发芽指数都超过80%,MC-RR低于检测底限10μg/kg,MC-LR的降解率也达到90%以上。综合各类指标,麦麸作为填充剂的效果最好。堆肥过程中MC-RR含量和MC-LR含量间有极显著的相关性,微囊藻毒素含量与堆体有机碳和总氮含量呈显著正相关,而与总磷、总钾、总养分含量以及灰分呈显著负相关。
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洋葱胞质雄性不育系及其保持系花蕾内源激素含量和脯氨酸含量的动态变化特征
《华北农学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：以洋葱胞质雄性不育系63A及其同核异质保持系63B为试材,研究了花蕾发育过程中IAA、GA3、ZR、ABA含量以及脯氨酸含量的动态变化规律,探讨洋葱不育性与内源激素、脯氨酸含量的关系。结果显示,洋葱不育系花蕾的IAA、GA3、ZR和脯氨酸含量在败育过程中显著低于保持系,而ABA含量则较保持系有不同程度的盈积。且在花药的发育过程中,二者的差异主要发生在单核期,即不育系小孢子败育的主要时期。据此认为,IAA、GA3、ZR、ABA和脯氨酸含量的异常与洋葱雄性不育的发生有关。
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传统肉制品中一株植物乳杆菌的分离筛选及鉴定
《江苏农业科学 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：从传统发酵酸肉中分离出一株乳酸杆菌(XC10001),利用API鉴定系统、16S rDNA同源性分析以及recA基因多重PCR特异性扩增3个方法对该菌株进行鉴定,API鉴定结果和16S rDNA同源性分析结果都表明该菌株同植物乳杆菌的同源性最高;多重PCR扩增后发现一条约300 bp的recA基因特异扩增片段,对该片段测序后发现同植物乳杆菌ATCC14917序列完全相同,因此将该菌确定为植物乳杆菌。菌株XC10001的16S rDNA序列的国际基因序列注册号为HM446157。
关键词： 酸肉 植物乳杆菌 分离鉴定 16S rDNA recA基因
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海岛棉MYB转录因子GbMYB5基因启动子的克隆及其在拟南芥中的表达特性分析
《江苏农业学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：海岛棉GbMYB5基因属于MYB家族转录因子,该家族基因可能参与调控与生物或非生物逆境相关的一系列基因表达。为了进一步研究该基因的功能,利用PCR技术从棉花基因组DNA中分离到GbMYB5基因上游2.2 kb的启动子序列。软件分析和预测结果表明,该序列具有典型的启动子结构,并含有多种光响应元件、脱落酸和赤霉素等激素响应顺式作用元件、干旱等逆境胁迫响应顺式作用元件以及水杨酸响应顺式作用元件。将克隆到的启动子序列置换PBI101中的CaMV35S启动子,驱动其下游的GUS基因,构建植物表达载体pGbMYB5-GUS,通过花序浸染法转化拟南芥,获得转基因植株。组织化学染色结果表明,在GbMYB5启动子的驱动下,报告基因GUS在拟南芥的根部、叶尖部及生长点均有表达,因此该启动子可能是一个组织特异性启动子。
关键词： 海岛棉 GbMYB5基因 启动子 拟南芥 表达分析
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基于网络的昆虫发育进程自动模拟系统
《应用昆虫学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：为了有效的预测害虫的发生期,开发了昆虫发育自动模拟系统,该系统基于网络平台,应用PHP丰富的函数库和计算功能设计有效积温运算模块,通过公共气象信息系统建立了气象数据库,并根据实时及预报的公共气象信息,即逐日最高及最低气温,昆虫发育有效积温相关的生物学参数,运用正弦法计算每天的有效积温及一段时间的累计积温,自动模拟昆虫在不同时期的发育虫态和虫龄。服务器端基于Apache+PHP+MySQL架构,操作简单,调试和维护方便。经与2011年江苏通州烟粉虱Bemisia tabaci(Gennadius)、灰飞虱Laodelphax striatellus(Fallén)系统调查数据比对,符合实际发生情况,可在生产上推广应用。
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