科研产出
猪肺炎支原体黏附宿主细胞间接免疫荧光检测方法的建立
《江苏农业学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：为了建立一种用间接免疫荧光技术检测猪肺炎支原体黏附宿主细胞的方法。以抗猪肺炎支原体单克隆抗体为一抗,异硫氰酸荧光素(FITC)标记的羊抗小鼠IgG为二抗,通过对一抗、二抗工作浓度的优化确定合适的抗体浓度;通过以1×107CCU/ml猪肺炎支原体与PK15细胞作用不同时间,确定其黏附细胞需要的时间;通过不同滴度的猪肺炎支原体与PK15细胞37℃作用4 h,确定其黏附细胞需要的滴度。猪肺炎支原体单克隆抗体P463G11的最适工作浓度为1∶1 000倍稀释,FITC-羊抗小鼠IgG的最适工作浓度为1∶200倍稀释,猪肺炎支原体黏附PK15细胞需要的时间为4 h以上,黏附PK15细胞需要的滴度为1×105CCU/ml以上。表明间接免疫荧光技术可以用来检测猪肺炎支原体对宿主细胞的黏附作用。
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SQR基因在大肠杆菌和乳酸菌中的表达
《江苏农业学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：为了研究硫化物-醌氧化还原酶(SQR)基因的乳酸菌表达载体pMG36e-SQR-Myc的构建及其在大肠杆菌DH5a和乳酸菌MG1363中的表达,通过限制性内切酶酶切大肠杆菌-乳酸菌穿梭表达载体pMG36e与目的片段SQR-Myc,回收纯化并用T4连接酶进行连接,连接产物通过KCM法转化到大肠杆菌DH5a中,提取所得到阳性大肠杆菌菌株质粒pMG36e-SQR-Myc进行双酶切鉴定与普通PCR鉴定;并通过电转化将重组质粒导入乳酸菌MG1363中,采用SDS-PAGE电泳和Western-blotting检测SQR蛋白质在其中的表达情况。结果显示,SQR乳酸菌重组表达载体pMG36e-SQR-Myc被成功构建,目的蛋白质SQR在大肠杆菌和乳酸菌MG1363中被成功检测到。因此,乳酸菌MG1363可以用来表达硫化物-醌氧化还原酶(SQR)。
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泥鳅ACE抑制肽的体外活性研究
《食品工业科技 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：以泥鳅蛋白为原料,酶解制备具有降血压活性的短肽,研究该肽的稳定性。在加热温度≤80℃条件下加热2h,泥鳅降血压肽(<2.5ku)的ACE抑制活性没有显著变化。当2.0≤pH≤8.0时,泥鳅降血压肽的ACE抑制活性变化不显著。冷冻干燥优于喷雾干燥。Mg2+对泥鳅降压肽的降压活性起到促进作用,而Zn2+和Mn2+抑制了肽的降压活性。葡萄糖对降压肽活性的影响程度明显大于蔗糖,随着浓度的升高,其ACE抑制活性逐渐降低,褐变程度加深;氯化钠对降压活性的影响不明显。在模拟胃肠道消化体系中,胃蛋白酶的消化显著提高了产物的降压活性;胰酶的消化降低了产物的降压活性。泥鳅多肽属于底物型ACE抑制肽。
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番茄根结线虫病抗性基因的研究进展
《江苏农业学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：已发现的番茄根结线虫病的抗病基因有9个,命名为Mi-1、Mi-2、……Mi-9。其中,只有Mi-1基因被克隆,并且成功转育到栽培番茄材料中,在番茄抗根结线虫病方面发挥了重大作用。但是该基因在土壤温度高于28℃时就会丧失抗性,而且突破Mi-1基因抗性的线虫群体也对番茄造成了威胁,而有些番茄抗根结线虫的基因可以较好地弥补Mi-1基因的不足,选育含有这些抗病基因的番茄材料十分必要。此外,对于Mi-1基因作用机理方面的研究也取得了很多成果。本文主要介绍番茄根结线虫抗病基因及其作用原理方面所取得的研究进展。
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水葫芦治污试验性工程对滇池草海水体修复的效果
《江苏农业学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：结合历史数据与现场取样监测数据,探讨了2011年滇池草海水葫芦治污试验性工程对草海水体溶氧量和总氮、氨态氮及总磷含量的影响。结果表明,水葫芦试验性工程并没有引起草海水体溶氧量的下降;2011年草海水体总氮、氨态氮及总磷含量显著低于2007～2010年(P<0.05),说明水葫芦在滇池草海的治理中效果显著。此外,对湖泊水体物质输入-输出平衡估算结果显示,在水葫芦种养期(2011年5月～11月),水葫芦吸收磷量约占草海水体磷总削减量的139.0%,说明水葫芦不仅能有效去除水体中的磷,而且能去除湖泊底泥中可释放态磷。
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鹅副粘病毒HN蛋白的原核表达与免疫学鉴定
《浙江农业学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：以GenBank登录的鹅源副粘病毒GPMV ZJI株基因组全序列为模板,在HN基因开放阅读框上下游设计一对特异性引物,利用RT-PCR方法扩增得到HN基因,将目的基因克隆至pET32a表达载体上,转化至BL21中,通过SDS-PAGE和Western-blot鉴定目的蛋白的表达。由结果可知,通过RT-PCR法扩增出HN基因,大小与预期一致。SDS-PAGE和Western-blot均得到预期条带,说明pET32a表达载体在BL21中成功表达了HN蛋白,为后续相关免疫学研究奠定基础。
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江苏烟粉虱生物型鉴定与危害程度分析
《环境昆虫学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：通过实地调查结合mtDNA COI基因测序方法,分析并鉴定了江苏地区主要作物上烟粉虱的危害程度及烟粉虱的生物型组成。序列检测表明,江苏地区烟粉虱种群生物型为Q型和B型,其中Q型烟粉虱占所测总样本94.40%,Q型烟粉虱在苏南、苏中和苏北的比例分别是97.5%、96.0%和91.67%,表明Q型烟粉虱已成为在江苏省主要生物型烟粉虱。同源性分析发现,江苏的Q型烟粉虱序列与浙江、美国和日本的Q型烟粉虱碱基序列相似性为100%,江苏的B型烟粉虱序列与巴基斯坦、日本和中国北京的B型烟粉虱序列同源性为100%。在江苏地区烟粉虱主要危害茄科的番茄、长茄、甜椒,葫芦科的黄瓜、西葫芦及锦葵科的苘麻、棉花,表现出虫口密度大,植株受害重,而十字花科的小白菜、大白菜、萝卜及豆科的菜豆、豇豆等受害较轻,苋科的苋菜和菊科的生菜受害最轻。
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