科研产出
双拷贝抑制素基因疫苗pcISI的构建和表达及免疫
《畜牧兽医学报 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：为构建高免疫原性的卵泡抑制素(Inhibin,INH)DNA疫苗,将INH基因片段α1-32插入到pcIS中乙肝表面抗原(HBsAg)S基因第112~113氨基酸残基密码子之间,构建含2拷贝INH的融合表达质粒pcISI。酶切和测序鉴定表明,重组质粒pcISI构建成功。脂质体包裹法将pcISI转染HeLa细胞,ELISA检测表达产物的INH免疫反应原性。结果表明,融合目的基因在HeLa细胞获得表达,ISI融合蛋白具有比IS融合蛋白更强的INH抗原抗体反应性。将pcISI免疫6只大鼠后,5/6的大鼠产生了抗INH抗体,抗体P/N值在免疫后第2~6周高于pcIS免疫组。这些结果表明,所构建的质粒pcISI可以表达抑制素,表达产物具有较强的免疫原性。
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水稻抗条纹叶枯病鉴定方法的研究
《植物保护 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：鉴于国内至今尚无水稻条纹叶枯病品种抗性鉴定标准的现状,本文分别研究了接种时间、接种强度与水稻接种苗龄3因素对抗性鉴定的影响。结果表明水稻条纹叶枯病的适合抗性鉴定方法应为:接种时间48～72h,接种强度2～6头/株和水稻接种龄期0.5～1.5叶龄。以本研究结果为基础制定了水稻条纹叶枯病品种抗性鉴定的江苏省地方标准。
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猪CACNA1S基因部分序列的克隆、测序及SNP检测
《中国科学(C辑:生命科学) 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：CACNA1S是钙离子通道主效亚基α1亚单位的编码基因,该基因突变会导致人(Homo sapiens)低钾性周期性麻痹和恶性高温综合征.目前CACNA1S基因的研究主要集中在人和模式动物上,而在家畜中的研究少见报道.本研究以金华猪(115头)、皮特兰猪(30头)、金华猪与皮特兰猪杂交产生的金皮F2代杂种猪(126头)、大约克猪(23头)为研究对象,根据人CACNA1S基因序列设计引物,对猪基因组DNA进行PCR扩增、克隆测序,并与人相应序列作同源性比较,然后采用PCR-SSCP技术检测序列中可能存在的单核苷酸多态(single nucleotide polymorphism,SNP)位点,并对有合适内切酶存在的突变点应用PCR-RFLP技术进行验证.结果表明:(ⅰ)用6对引物对猪基因组DNA进行扩增,共克隆得到猪CACNA1S基因约5211bp的DNA序列,其中外显子区域,猪与人同源性为82.6%,序列已递交GeneBank收录(登录号DQ767693);(ⅱ)在克隆得到的DNA序列中,共检测到57个单核苷酸突变点,其中外显子区域存在24个;(ⅲ)突变位点的PCR-RFLP验证与PCR-SSCP检测结果一致,经与GenBank公布的猪CACNA1S基因EST小片段(Bx914582,Bx666997)比较,相应长度核酸序列内本实验检测到的11个SNP位点中,有8个位点的碱基突变与2个EST片段间存在的碱基差异相同.
关键词： 猪(Sus Scrofa) CACNA1S 单核苷酸多态(SNP) PCR-SSCP PCR-RFLP
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共表达PRRSV修饰的GP5与M蛋白的重组改良型痘苗病毒安卡拉株的构建及其生物学特性
《生物工程学报 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：将猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)修饰的ORF5(MORF5)与ORF6基因分别克隆入笔者构建的改良型痘苗病毒安卡拉株(Modified vaccinia virus ankara,MVA)转移载体pLR-gpt的两个多克隆位点中,构建重组转移载体pLR-MORF5/ORF6。经脂质体介导,将构建好的pLR-MORF5/ORF6转染已感染亲本MVA2h的BHK-21细胞单层,用药物选择性培养基(MXHAT)在24孔板上进行连续筛选纯化,得到带有筛选标记的重组病毒rMVAgpt-MGP5/M。将rMVAgpt-MGP5/M感染表达Cre重组酶的BHK-21细胞(BHK-Cre),获得删除筛选标记的重组病毒rMVA-MGP5/M。PCR证明MORF5与ORF6成功插入MVA基因组中;Western blotting与间接免疫荧光证明重组病毒能表达MGP5与M蛋白;重组病毒的生长特性表明与亲本MVA出现病变的时间及病毒滴度基本一致。结果表明,本研究成功构建了共表达PRRSVMGP5与M蛋白的重组MVA,并且表达产物具有免疫原性;外源基因的插入不影响MVA复制,具较好的稳定性,从而为PRRSV新型基因工程疫苗的研制奠定了良好的基础。
关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒 改良型痘苗病毒安卡拉株 修饰的GP5与M蛋白 共表达
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太湖地区稻田保护性耕作条件下水稻生育期土壤肥力的变化
《江苏农业学报 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：在小麦—水稻、黑麦草—水稻和油菜—水稻3种种植模式下,研究土壤保护性耕作对太湖地区稻田水稻生育期土壤主要养分的变化及产量的影响。结果表明:3种种植模式下水稻成熟期土壤平均有机质、全氮、速效氮及速效磷含量均比移栽期有不同程度的提高,而速效钾含量则呈下降趋势;水稻产量以油菜—水稻种植模式为最高,其次为小麦—水稻和黑麦草—水稻种植模式。保护性耕作(秸秆全量还田、小麦或油菜免耕、水稻2次旋耕)和常规耕作Ⅱ(秸秆全量还田、小麦或油菜旋耕、水稻耕翻加旋耕)处理较少耕秸秆不还田、小麦或油菜免耕、水稻2次旋耕和常规耕作Ⅰ(秸秆不还田、小麦或油菜旋耕、水稻耕翻加旋耕)处理更有利于提高小麦—水稻和油菜—水稻种植模式的土壤有机质、全氮、速效氮、速效磷及速效钾含量,也有利于提高黑麦草—稻种植模式下的全氮、速效氮及速效钾含量。保护性耕作对麦—稻和黑麦草—稻种植模式的增产作用明显。
关键词： 保护性耕作 种植模式 土壤肥力 水稻产量 太湖地区
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稻鸭共作复合系统的生态环境效应研究
《安徽农业科学 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：[目的]为稻鸭共作的实践应用提供理论依据。[方法]通过小区试验研究,分析稻鸭共作条件下,稻田土壤、水体理化性状、稻鸭共作对稻田常发性及危害严重的病虫草的发生情况以及对稻田天敌蜘蛛的影响和稻田生态系统的价值流动。[结果]结果表明,稻鸭共作较明显地改善了表层土壤的理化性状,与对照处理相比,表层土壤容重降低5.30%,土壤总孔隙度提高2.52%,土壤有机质增加6.41%;水体总氮、氧化还原电位、化学需氧量分别比对照增加了9.31%、27.51%、16.46%。稻鸭共作对稻田有害生物也有较明显的控制效应,对稻飞虱和稻纵卷叶螟的防效分别为65.49%和39.27%,对条纹叶枯病、稻田杂草的防效比常规稻作分别高0.62和22.2个百分点。稻鸭共作经济效益比常规稻作高3492元/hm2。[结论]稻鸭共作有利于水稻的生长发育。
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氮磷钾不同配比对小麦产量及肥料利用率的影响
《江苏农业学报 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：应用"3414"田间试验方案研究不同氮磷钾配比对小麦产量的影响,建立丹阳地区小麦产量(Y)与氮(N)、磷(P)、钾(K)肥用量的肥料效应函数Y=141.84+18.16N-2.36N2+8.73P-1.93P2+9.81K-0.97K2+0.07NP+0.46NK+1.32PK,获得在丹阳地区粉沙土中等地力水平下小麦的最佳经济产量为5 152.1 kg/hm2,氮、磷、钾的最佳施用量为N 216.0 kg/hm2、P2O577.2 kg/hm2、K2O 122.6 kg/hm2。肥料效应方程表明,氮肥对小麦的增产增效最明显,其次是钾肥。氮、磷、钾肥料配合施用能促进小麦对氮、磷、钾的吸收。在氮肥处理中,N1水平(94.5 kg/hm2)的氮素利用率为34.5%~44.4%,高于N2水平(189.0 kg/hm2),N3水平(283.5 kg/hm2)最低,仅为29.2%;磷、钾肥利用率的变化趋势与氮肥类似。
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