科研产出
赤霉毒素脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)酶联免疫检测方法研究
《中国农业科学 》 2007 北大核心 CSCD
摘要:【目的】建立快速、灵敏、有效的毒素检测方法,以保证麦类作物的安全生产以及谷物食品的安全性。【方法】以主要赤霉病菌毒素脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)为对象,利用半琥珀酰化脱氧雪腐镰刀菌烯醇的牛血清蛋白偶联物(3-HS-DON-BSA)作免疫原,分别采用腹膜腔注射法和颈、背部多点注射法免疫Balb/c小鼠和豚鼠,获得DON的多抗血清,建立间接ELISA检测方法。【结果】多抗豚鼠血清的效价达到1∶6400,而小鼠混合血清的效价则为1∶12800。引起DON抗体最大结合50%抑制时,所需DON及其类似物3-Ac-DON和T-2毒素的量分别为63μg·ml-1、114μg·ml-1和>1000μg·ml-1;相对交叉反应率分别为100%,55.2%和6.3%。包被抗原的最适工作浓度为1/1500,小鼠血清工作浓度为1/1600。在包被原和小鼠血清的最适工作浓度下,20%以上的甲醇稀释度对DON免疫分析有显著的影响,低于10%浓度的甲醇对DON免疫分析基本无影响。建立的间接竞争ELISA法检测范围为0.01~100μg·ml-1,检出限为0.02μg·ml-1,平均回收率为82%~93%,精密度(CV%)为4.65%~21.3%。【结论】本文提出的毒素检测方法,检测成本低,方便易行,不仅可以应用于小麦赤霉病的病理学研究,也可广泛应用于谷物及其制成品中DON毒素的含量检测,具有较好的应用价值。
关键词: 脱氧雪腐镰刀菌烯醇 免疫学检测 ELISA 小麦赤霉病
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鹅催乳素受体基因克隆与表达
《南京农业大学学报 》 2007 北大核心 CSCD
摘要:应用RACE-PCR技术,克隆了全长3159 bp鹅催乳素受体基因(gPRLR)cDNA。序列分析表明,cDNA含443 bp5-′UTR、2496 bp编码区(含终止密码子TAA)和220 bp 3-′UTR。比对鸡催乳素受体基因并将前330 bp看作第1外显子,则gPRLR基因可划分为14个外显子。推导的蛋白序列含831个氨基酸,与鸡、鸽及火鸡PRLR的同源性分别为87.7%、85.2%和84.8%,其N末端含24个氨基酸的信号肽,成熟蛋白含807个氨基酸。gPRLR mRNA在成年鹅睾丸、输精管、卵巢、输卵管、肾、大肠、小肠、脾组织中均有表达,其中以肾、睾丸、大肠及小肠中表达最为丰富。
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大麦赤霉病抗源的发掘与评价
《麦类作物学报 》 2007 北大核心 CSCD
摘要:为了发掘新的大麦赤霉病抗源,2005、2006年利用禾谷镰刀菌单花滴注和喷雾接种相结合的方法,研究了287份大麦品种对赤霉病的抗扩展性和抗侵染性。结果表明,大麦赤霉病抗性除了抗初侵染类型外还存在抗扩展类型。比较两年单花滴注接种后21 d的病小穗率,筛选得到9个抗源,分别为盐96157、2000品12、秀9744、Vivar、Phoenix、盐94148、鉴35、盐97001、96AC20-30,占全部供试品种的3.44%。通过比较喷雾接种21 d后病小穗率、病穗率、病情指数、反应级等各项指标,发现9个抗源中存在三种类型:盐96157、2000品12、盐94148和Vivar属于既抗扩展又抗侵染的类型,秀977、鉴35和Phoenix属于抗侵染性较弱而抗扩展性强的类型,盐97001和96AC20-30属于抗侵染性强而抗扩展性较弱的类型。在9个抗源中96AC20-30抗侵染性也最强。
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检测CSFV、JEV、PRRSV三种RNA病毒多重RT-PCR方法的建立
《中国预防兽医学报 》 2007 北大核心 CSCD
摘要:猪瘟病毒(CSFV)、流行性乙型脑炎病毒(JEV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是引起严重的种猪繁殖障碍的病原,而且经常混合感染,及时准确诊断是防治的前提。根据GenBank发表序列选取3对引物建立检测CSFV、JEV和PRRSV病毒的多重RT-PCR方法,扩增产物分别为508 bp、380 bp、263 bp。经与IDEXX商品化的检测CSW抗原试剂盒比较,二者的符合率为96.7%;扩增JEV和PRRSV PCR产物分别经EcoR V和Sau3A I酶切得到预期的片段。建立的多重RT-PCR检测JEV、PRRSV和CSFV敏感度分别为12.5个TCID_(50)、10个TCID_(50)和10~(-3)ng总RNA。结果表明该多重RT-PCR方法具有很好的特异性和敏感性,可用于临床三种病毒核酸的检测。
关键词: 猪瘟病毒 流行性乙型脑类病毒 猪繁殖与呼吸综合征病毒 多重RT-PCR
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小麦新品种淮麦23特征特性及其高产栽培技术
《安徽农业科学 》 2007 北大核心 CSCD
摘要:[目的]为了研究淮麦23的特征特性、产量与高产栽培技术。[方法]通过多年田间试验,研究了淮麦23的农艺性状、抗逆性、品质和产量,总结出适用于淮麦23的高产高效栽培技术体系。[结果]淮麦23是江苏徐淮地区淮阴农科所以太谷核不育小麦的Ms2(Tal)基因为工具,采用轮回选择法育成的高产、多抗、馒头专用小麦新品种。2003 ̄2005年度的江苏省淮北片小麦区域试验,平均单产7586.10 kg/hm2,比对照产量略增;2005 ̄2006年度生产试验的平均产为7803.00 kg/hm2,比对照淮麦18增加3.92%。该品种适宜在江苏淮北麦区中上等肥力早中茬口种植。淮麦23基本苗应控制在195万 ̄240万/hm2,有利于群体的合理构建。[结论]该研究为淮麦23的大面积推广种植提供了理论依据。
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梨实生苗枝条高接后枝叶生长及光合特性的变化
《果树学报 》 2007 北大核心 CSCD
摘要:以梨实生苗1年生枝条为接穗,高接在5年生金二十世纪梨上,研究高接后梨实生苗枝条生长及光合特性的变化。结果表明,实生苗高接后生长势显著增强,其单叶面积及叶片厚度极显著增加,净光合速率、气孔导度、胞间CO2浓度均有所提高;自根苗的非光化学淬灭(qN)极显著高于高接树,最大荧光产量(Fm)、光化学淬灭(qP)和实际光化学量子产量(Yield)显著低于高接树。由此可见,实生苗高接后增加了有效光合面积,提高了光能转化效率及光合作用效率,可能是高接可以缩短童期的缘故。
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采用EN 14569-2004 LAL/GNB微生物筛选法鉴别辐照食品的研究
《安徽农业科学 》 2007 北大核心 CSCD
摘要:翻译了欧洲标准"EN 14569-2004 Foodstuffs-Microbiological screening for irradiated food using LAL/GNB procedures"。该方法已成功通过实验室验证,通常适用于新鲜的整禽或胸脯、腿、翅膀等器官以及去皮或未去皮的冷冻或冰冻畜体的鉴别。该方法还可以提供待辐照样品微生物学质量的情况,但只能说明样品可能经过电离辐射。
关键词: 内毒素法(LAL) 革兰氏阴性菌法(GNB) 微生物筛选 辐照食品
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不同品系万寿菊花中叶黄素和叶黄素酯含量的测定
《林产化学与工业 》 2007 CSCD
摘要:采用反相高效液相色谱法测定不同颜色万寿菊花(包括花瓣和花萼)中叶黄素和叶黄素酯的含量。通过与叶黄素标准品比较,并利用相同色谱条件下的色谱图确定万寿菊花中含有叶黄素和6种叶黄素二酯,即月桂酸-肉豆蔻酸酯、二肉豆蔻酸酯、肉豆蔻酸-棕榈酸酯、二棕榈酸酯、棕榈酸-硬脂酸酯及二硬脂酸酯。不同颜色万寿菊花中叶黄素和叶黄素酯的含量差别较大,黄绿色花色素含量为0.024%,橙色花色素含量高达1.148%(均以干花粉计),颜色越深,叶黄素酯含量越高。万寿菊花的色素含量与脂肪含量呈明显正相关(R2=0.974)。
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肉用杜泊绵羊与湖羊和小尾寒羊杂交对比试验
《江苏农业学报 》 2007 北大核心 CSCD
摘要:利用从新西兰引进的优质杜泊绵羊为父本,分别与湖羊和小尾寒羊进行经济杂交试验。湖羊和小尾寒羊群体采用激素诱导同期发情,以杜泊绵羊鲜精进行人工授精配种。统计分析不同羊群受胎率、产羔率以及F1代杂交羔羊生长速度与体尺变化。结果表明:6月龄内杜湖杂交F1代羔羊日增重和体尺变化与同龄纯种湖羊羔羊差异极显著,杜寒杂交F1代羔羊的日增重和体尺与纯种小尾寒羊羔羊之间的差异亦达到极显著水平;杜湖与杜寒杂交羔羊在6月龄内日增重差异极显著,但体尺变化无显著差异。初步杂交试验结果表明杜泊绵羊(父本)与湖羊(母本)或杜泊绵羊(父本)与小尾寒羊(母本)均可作为理想的杂交组合,在江苏省宜选用湖羊为母本,用于进一步培育优质肉用杂交绵羊新品系(种)研究。
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