科研产出
广东花生丛枝病植原体的分子鉴定
《植物保护 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：2020年在广东省湛江市遂溪县田间发现表现明显丛枝、小叶，类似植原体感染症状的花生病株。本研究利用分子生物学技术对其病原进行鉴定。以花生病叶的总DNA为模板，利用植原体16S rRNA和SecY基因通用引物进行PCR扩增，获得广东花生丛枝病植原体（PnWB-GDSX-2020）16S rRNA基因片段（1 430 bp, GenBank登录号为MZ427281）和SecY基因片段（1 709 bp, GenBank登录号为MZ437794）。序列一致性和系统进化分析显示，PnWB-GDSX-2020的16S rRNA序列与16SrⅡ-A、16SrⅡ-D和16SrⅡ-V亚组植原体一致性最高，亲缘关系最近；进一步利用iPhyClassifier对16S rRNA序列进行在线虚拟RFLP分析，结果显示，PnWB-GDSX-2020的虚拟RFLP图谱与16SrⅡ-V亚组的参照株系‘Praxelis clematidea’ phyllody phytoplasma （GenBank登录号：KY568717）酶切图谱一致，相似系数为1.00。因此，PnWB-GDSX-2020属于16SrⅡ-V亚组成员。所获得的PnWB-GDSX-2020 Sec Y基因序列与花生丛枝植原体的一致性最高，亲缘关系最近。本文确定了广东花生丛枝病相关植原体的分类地位，为当地病害诊断、检测以及防控提供科学依据。
关键词： 花生丛枝病 植原体 分子鉴定 16S rRNA SecY基因 序列分析
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功能微生物在生态健康养殖中的应用研究进展
《广东农业科学 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：养殖业中抗生素滥用和环境污染问题已引起国家和行业的广泛关注.功能微生物可以有效替代养殖用化学物质,取代激素和抗生素,提高动物综合生长性能,在生态健康养殖中发挥关键作用.为实现我国养殖业的可持续发展,在动物养殖中应用功能微生物实现生态健康养殖已成为一条重要发展路径.功能微生物的作用贯穿整个养殖前端、过程和末端:利用功能微生物处理饲料原料,可以有效去除抗营养因子,提高饲料转化利用率和营养价值;以养殖功能微生物饲喂动物,可以调节肠道微生物群平衡,维持肠道稳态,调节机体免疫;应用于养殖环境中,可以控制臭气排放和环境病原,在养殖废弃物的无害化处理和资源化利用方面也发挥重要作用.结合有关养殖功能微生物的研究成果,对功能微生物在动物养殖中的应用研究进展进行综述,包括它们在生物饲料加工、动物肠道健康、养殖环境控制和废弃物处理中的应用及相关作用机制,以期为功能微生物在动物养殖中的进一步应用与推广提供参考.
关键词： 禁抗 功能微生物 动物健康 生物饲料加工 废弃物处理
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水稻盐敏感突变体ss2的鉴定与基因功能分析
《生物技术通报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：通过盐胁迫筛选EMS诱变的粳稻突变体库,挖掘盐逆境响应关键基因,鉴定出一个盐敏感突变体.在100 mmol/L NaCl处理下,突变体严重萎蔫,叶片褪绿黄化,地上部Na+的积累显著高于野生型.盐胁迫后,突变体叶片的光合速率和叶绿素含量均显著低于野生型,并且源叶中的蔗糖含量增加,而根中的蔗糖只有野生型的83%.突变体源叶中参与糖转运的几个关键基因表达下调,进一步表明糖分向库器官根系的分配受抑制.突变体库组织中较低的蔗糖含量不能满足生长发育对碳营养的需求,导致水稻耐盐性降低.通过图位克隆确定候选基因,将其命名为SS2,互补实验可以恢复突变体的盐敏感表型,盐胁迫下生长的互补转基因株系与野生型植株无显著差异.综上所述,SS2通过调控体内糖分转运,对水稻的生长和盐胁迫响应起重要作用.
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基于CHO-K1细胞稳定表达的非洲猪瘟病毒CD2v蛋白的间接ELISA抗体检测方法的建立
《中国兽医科学 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：为建立非洲猪瘟病毒(ASFV)抗体的间接ELISA检测方法,将构建的GFP基因与CD2v基因串联的重组真核表达质粒pIRES-GFP-CD2v转染CHO-K1细胞,通过嘌呤霉素筛选并结合有限稀释法,筛选稳定表达CD2v的单细胞克隆株.转染细胞经过PCR鉴定后进行扩大培养,收集并纯化细胞培养液,获得目的蛋白,通过Western-blot验证其反应原性.结果表明,ASFV CD2v蛋白在CHO-K1细胞中被成功表达,并能与ASFV抗体阳性血清反应.以纯化的GFP-CD2v重组蛋白为包被抗原建立检测ASFV CD2v蛋白抗体的间接ELISA方法,通过方阵试验对间接ELISA方法进行优化,最终确定抗原最佳包被质量浓度为1.25 μg/mL,待检血清最佳稀释度为1∶100,酶标抗体最佳稀释度为1∶50000,以此建立的ASFVCD2v蛋白的间接ELISA方法临界值为0.31;该方法仅与ASFV阳性血清发生特异性反应,而与猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、口蹄疫病毒、伪狂犬病病毒、猪圆环病毒2型及猪流行性腹泻病毒等病毒抗体阳性血清均无交叉反应,表明该方法的特异性较强;用该ELISA方法检测阳性血清敏感性可达1∶1 600;批内和批间变异系数均小于10%.结果表明,本试验中建立的间接ELISA方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,可用于ASFV抗体的检测.
关键词： 非洲猪瘟病毒;CD2v;CHO-K1细胞;稳定表达;间接ELISA
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不同类型调理剂对镉污染土壤修复效果和微生物群落的影响
《南方农业学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：[目的]研究土壤调理剂对镉(Cd)污染农田修复效果和微生物群落组成的影响,为应用不同土壤活性组分调理剂原位修复和治理Cd污染农田土壤提供科学依据.[方法]在粤东Cd污染农田开展田间试验,设空白对照,研究不同土壤活性组分调理剂(矿物型、有机型和微生物型)对土壤基本理化性质、Cd有效性和微生物群落结构的影响.[结果]施用土壤调理剂可显著提高土壤pH(0.11~0.24)(P?0.05,下同),增加有机碳含量(21%~47%),降低土壤有效态Cd含量(13%~48%)和糙米Cd含量(26%~42%),其中矿物型和微生物型调理剂对糙米Cd含量的降幅最大.总体上施用调理剂可改善土壤微域环境,高通量测序结果表明,添加调理剂可维持污染土壤中正常微生物群落的多样性和丰富度,显著改变土壤细菌群落的组成和结构,其中脱硫菌门(Desulfobacterota)和拟杆菌门(Bacteroidota)的相对丰度降低.矿物型和有机型调理剂提高土壤中放线菌门(Actinobacteriota)和芽单胞菌门(Gemmatimonadota)的相对丰度,而微生物型调理剂提高酸杆菌门(Acidobacteriota)的相对丰度.同时,矿物型调理剂显著增加真菌的担子菌门(Basidiomycota)的相对丰度,降低子囊菌门(Ascomycota)的相对丰度;而有机型调理剂显著提高被子菌门(Mortie-rellomycota)的相对丰度,降低罗兹菌门(Rozellomycota)的相对丰度;微生物型调理剂显著增加子囊菌门的相对丰度,降低罗兹菌门的相对丰度.可见,微生物型调理剂可显著提高细菌和真菌中优势种群的水平.糙米Cd含量与微生物群落的相关分析结果显示,糙米Cd含量与细菌群落的变形菌门(Proteobacteria)、脱硫菌门和拟杆菌门呈显著正相关.此外,冗余分析和蒙特卡洛检验分析表明,土壤全磷含量是影响细菌和真菌群落结构的重要环境因子.[结论]从降低土壤有效态Cd和糙米Cd含量及对土壤微生物结构的影响方面考虑,微生物型土壤调理剂修复效果最佳,降低水稻对Cd吸收的同时改善土壤菌群结构.
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箭叶淫羊藿种子的休眠类型与萌发研究
《广西植物 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：箭叶淫羊藿具有重要的药用价值和较大的市场需求，但其种子休眠和萌发特性目前仍不够清楚，严重影响了其产业化育苗与栽培。为探明其种子的休眠类型及释放休眠和促进休眠的最适方法，该文以箭叶淫羊藿的成熟种子为材料，研究种子对水分的吸收、种子的脱水耐性，以及温度、层积和植物激素对种子休眠与萌发的影响。结果表明：（1）箭叶淫羊藿种子不具有物理休眠，而具耐脱水性。（2）在4～25℃和黑暗条件下，种子萌发率为零，具有休眠特性。（3）胚与种子的比值非常小，4℃和10℃及变温层积能显著地促进胚的生长发育以及增加种子的萌发速率和萌发率。（4）赤霉素和氟啶酮显著增加种子的萌发速率和萌发率。综上认为，箭叶淫羊藿种子的休眠类型为形态生理休眠（MPD）,释放休眠和促进萌发的最适方法是先将种子在10℃中层积30 d,再置于4℃环境中让其萌发。该研究结果为箭叶淫羊藿的产业化育苗提供了参考。
关键词： 脱水耐性 箭叶淫羊藿种子 萌发 形态生理休眠 层积
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高温长时辉干工艺对广东炒青绿茶香气组分的影响
《食品科学 》 2022 EI 北大核心 CSCD
摘要：为探究高温长时辉干工艺对炒青绿茶香气品质的影响,采用顶空固相微萃取结合气相色谱-质谱联用技术,借助香气感官审评及多元统计分析,研究不同辉干参数下所制绿茶样品的香气特征和挥发性有机化合物.结果表明,8组样品可根据香气特征分为4类,且此差异与辉干温度及时间参数相关.在所有样品组中,共鉴定出58种挥发性有机化合物,其中45种化合物为共有香气组分.基于挥发性有机化合物开展无监督分析,所获聚类结果与感官审评分类情况相似.利用单因素方差分析和偏最小二乘法判别分析,筛选获得对炒青绿茶香气特征变化具有重要影响的32种香气成分.为进一步了解辉干温度和时间对32种挥发性有机化合物含量的影响,基于该2种因素实施了双因素方差分析,发现17种关键香气成分的含量受到温度因素、时间因素和温度-时间交互因素的显著影响(P<0.05),12种关键香气成分的含量受到温度因素和时间因素的显著影响(P<0.05),α-荜澄茄油烯和δ-杜松烯含量受到时间因素和温度-时间交互因素的显著影响(P<0.05),α-甜旗烯含量仅受到温度因素的显著影响(P<0.05).
关键词： 辉干 炒青绿茶 香气 顶空固相微萃取 气相色谱-质谱联用技术
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壳寡糖复合物的制备及其功效研究进展
《食品工业科技 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：壳寡糖是自然界中唯一的碱性寡糖,具有-NH2、-OH等活性基团,易溶于水,具有极高的抑菌、抗炎、抗氧化、抗癌等生物活性,能够与金属离子、蛋白质、多糖、脂类、黄酮类化合物等通过配位络合、静电相互作用、转氨法、美拉德反应及壳寡糖酰胺化、酯化、羧基化等方法形成壳寡糖复合物.壳寡糖复合物稳定性较好,水溶性高,可同时兼备壳寡糖和复合因子的生物活性的特点,有效拓宽复合物质的应用范围并增强其使用效果.此外,壳寡糖复合物的新型复合方式及安全性,是目前的一个重要研究方向.本文对近年来壳寡糖复合物的制备方法、壳寡糖复合因子及壳寡糖复合物在功能生物医药、农业、食品等领域的功效应用进行了总结,以期为壳寡糖复合物的深入研究提供参考.
关键词： 壳寡糖;制备方法;相互作用;复合物;功效
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LC-MS/MS测定3种复合蔬果汁中吡唑醚菌酯、啶虫脒及哒螨灵残留
《中国农学通报 》 2022 CSCD
摘要：为了探究目前蔬果生产中常用杀菌剂、杀虫剂、杀螨剂在复合蔬果汁中的残留情况，本研究建立了3种复合蔬果汁中吡唑醚菌酯、啶虫脒和哒螨灵残留的LC-MS/MS分析方法。选取以不同蔬果进行调和的3种复合蔬果汁为材料，采用含1%（v%）乙酸的乙腈溶液提取，以SPE-NH2柱进行净化，以C18色谱柱分离待测物，采用电喷雾离子化，正离子扫描和多反应监测模式（MRM）检测，基质匹配标准溶液外标法定量。试验结果表明：啶虫脒在5～1000μg/L，吡唑醚菌酯和哒螨灵在1～500μg/L范围内均有良好的线性关系，相关系数（R~2）在0.9984以上。添加浓度为0.010、0.10和0.50 mg/kg时，3种复合蔬果汁中吡唑醚菌酯、啶虫脒及哒螨灵回收率为80.6%～113.4%；相对标准偏差（RSD）介于0.5%～9.3%之间；以最低添加浓度0.010 mg/kg为方法定量限（LOQ）。该方法快捷、简便、准确，满足复合蔬果汁中吡唑醚菌酯、啶虫脒及哒螨灵残留分析的要求。
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黑水虻幼虫蛋白及其酶解产物的抗氧化活性研究
《环境昆虫学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：为了探究黑水虻Hermetia illucens幼虫蛋白及酶解产物的抗氧化活性,以鲜活黑水虻幼虫冻虫为原料,采用碱提酸沉法提取黑水虻蛋白,通过碱性蛋白酶、菠萝蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶对其蛋白质溶液进行酶解,分别从2,2'-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(ABTS)自由基、羟自由基、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基3个方面对黑水虻蛋白及其酶解液的抗氧化能力进行测定.结果表明:黑水虻幼虫蛋白及4种酶解后的蛋白肽具有较好的抗氧化活性,其中黑水虻幼虫蛋白对ABTS自由基、羟自由基、DPPH自由基的半抑制浓度(IC50)分别为2.91、0.232、0.764 mg/mL,而酶解过后的蛋白肽具有更强的抗氧化活性,对ABTS自由基、羟自由基、DPPH自由基的最低半抑制浓度(IC50)分别为0.295、0.082、0.354 mg/mL.本研究初步证明了酶解制备抗氧化肽的可行性,为昆虫蛋白资源的利用和无抗饲料的研制提供了新的研究思路.
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