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南极磷虾羧肽酶A的分离纯化及其酶学性质分析

文献类型： 中文期刊

作者： 吴晶 ; 周德庆 1 ; 王珊珊 1 ; 苏婷; 朱兰兰;

作者机构： 1.中国水产科学研究院黄海水产研究所

关键词： 南极磷虾;羧肽酶A;分离纯化;酶学性质

期刊名称： 南方农业学报

ISSN： 2095-1191

年卷期： 2017 年 48 卷 08 期

页码： 1470-1476

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】建立南极磷虾羧肽酶A的分离纯化方法,并研究分析其酶学性质,为南极磷虾羧肽酶A的开发及应用打下基础。【方法】南极磷虾粗酶液经硫酸铵分级沉淀、HiTrap DEAE FF阴离子交换柱层析和SEC 70凝胶过滤柱层析,纯化得到的羧肽酶A,以SDS-PAGE分析其分子量;通过分析酶系反应温度、pH、金属离子、抑制剂对南极磷虾羧肽酶A活力的影响,明确其酶学性质和酶促动力学。【结果】南极磷虾羧肽酶A分子量为75.0 kD,其最适温度30℃,最适pH 8.0。Mg~(2+)、Zn~(2+)、Mn~(2+)和Ni~(2+)对南极磷虾羧肽酶A有显著的激活作用(P<0.05,下同),且金属离子浓度越高,激活效果越明显;Ca~(2+)、Fe3+、Cu~(2+)和Hg~(2+)对南极磷虾羧肽酶A存在不同程度的抑制作用,以Hg~(2+)的抑制作用最强,Fe~(3+)的抑制作用最弱。金属蛋白酶抑制剂乙二胺四乙酸(EDTA)、3-苯基丙酸(3-phenylpropionic acid)和1,10-菲罗啉(1,10-phenathroline)对南极磷虾羧肽酶A活力有显著的抑制作用,且抑制剂浓度越高,抑制效果越明显。【结论】南极磷虾羧肽酶A具有金属蛋白酶特性,可开发成降解酶制剂在食品工业及医药行业中推广应用。

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