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贝类中诺如病毒SYBR Green I实时定量RT-PCR检测方法研究

文献类型： 中文期刊

作者： 苏来金 1 ; 周德庆 1 ; 马丽萍 1 ; 曹慧慧 1 ;

作者机构： 1.农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室

关键词： 贝类;诺如病毒;SYBR Green I荧光染料;荧光定量RT-PCR

期刊名称： 中国食品学报

ISSN： 1009-7848

年卷期： 2009 年 9 卷 06 期

页码： 157-163

收录情况： 北大核心

摘要： 将诺如病毒(Noroviruses,NVs)RT-PCR特异产物纯化后与pGEM-T载体连接并转化至感受态细胞DH5α,经测序鉴定,提取阳性克隆质粒DNA,梯度稀释后作为实时荧光定量PCR的标准质粒。使用SYBR Green I染料建立检测贝类中NVs的实时荧光定量RT-PCR方法。结果表明,本方法标准曲线线性范围可达6个数量级(108～103拷贝),R2为0.9983,比常规RT-PCR方法敏感100倍,且特异性良好,与贝类中的轮状病毒、甲肝病毒均不反应;批内和批间重复性良好,变异系数(CV)分别在0.28%～4.03%和1.47%～5.53%范围。该方法具有简便、敏感、高效、稳定等优点,可用于水产品中NVs的定量检测。

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[9]基于Qbeta噬菌体装甲RNA技术的诺如病毒RNA标准参考样品的研制. 张奇,姚琳,江艳华,李风铃,张媛,许东勤,朱文嘉,郭莹莹,王联珠,翟毓秀. 2018

[10]牡蛎中诺如病毒的感染及其防控研究进展. 赵峰,佟利惠,杨敏,王珊珊,刘楠,孙永,周德庆. 2021

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[17]GⅡ型诺如病毒VP2蛋白在昆虫细胞中的表达与定位研究. 姚琳,寇晓霞,江艳华,王联珠,吴清平,翟毓秀. 2012

[18]贝类健康化生产技术探讨. ^A乔庆林. 2004

[19]无公害贝类生产技术体系研究. 乔庆林.

[20]海水贝类养殖产量与碳汇量动态变化关系研究——以2006-2010年数据为例. 岳冬冬. 2011

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