文献类型： 中文期刊

作者： 杜莎莎 ¹ ; 鲍大鹏 ² ; 马丽娟 ¹ ; 李晓玲 ³ ; 尚俊军 ² ;

作者机构： 1.长春工业大学化学与生命科学学院

2.国家食用菌工程技术研究中心农业部南方食用菌资源利用重点实验室上海市农业科学院食用菌研究所

3.梧州学院化学工程与资源再利用学院

关键词： 启动子;遗传转化;实时荧光定量PCR

期刊名称： 菌物学报

ISSN： 1672-6472

年卷期： 2021 年 008 期

页码： 2065-2073

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 启动子是控制基因转录的重要顺式元件,也是遗传转化实验中驱动外源基因表达的重要工具。在同一真菌中,不同启动子驱动外源基因表达水平可能存在明显差异。因此,选择合适的启动子是提高外源基因表达水平的关键。本研究分别应用花椰菜病毒35S RNA （cauliflower mosaic virus 35S RNA,CoMV35S）和斑玉蕈甘油醛-3-磷酸脱氢酶（Hypsizygusmarmoreus glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,HmGPD）基因的启动子构建了两个遗传转化质粒,在斑玉蕈中分别驱动外源的植物花青素合成基因表达,并利用来自刺芹侧耳的萎锈灵抗性基因进行转基因筛选。两个质粒通过农杆菌介导转化斑玉蕈单核菌株后,对具有萎锈灵抗性的转化子经PCR方法进行转基因验证,并运用实时荧光定量PCR对阳性转化子中外源基因的表达水平进行比较分析。结果表明,CoMV35S和HmGPD基因的启动子均成功驱动了植物花青素合成基因在斑玉蕈中转录,为增强基因表达而引入的内含子在转录过程中均被正确切割。其中,HmGPD启动子驱动外源基因表达水平比CaMV35S启动子驱动外源基因表达水平强22-36倍。