文献类型: 中文期刊
作者: 王永山 1 ; 范红结 2 ; 李银 3 ; 周宗安 1 ; 施正良 1 ; 王选年 4 ; 张改平 4 ;
作者机构: 1.南京军区军事医学研究所
2.南京农业大学动物医学院
3.江苏省农业科学院兽医研究所
4.河南省农业科学院生物技术研究所
关键词: 传染性法氏囊病病毒(IBDV);抗原表位;序列分析
期刊名称: 中国病毒学
ISSN: 1003-5125
年卷期: 2005 年 05 期
页码:
收录情况: CSCD
摘要: 以5株传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)单克隆抗体HNF1、HNF7、B34、2B1和2G8作为筛选分子,对噬菌体展示12肽库进行3轮"吸附-洗脱-扩增"淘洗,从每株单克隆抗体筛选到的噬菌斑中随机挑取12个单克隆蓝色噬菌斑,合计60个,用间接ELISA检测,A值大于1.00;用竞争抑制ELISA分析,单克隆抗体和IBDV抗原均能竞争抑制筛选12肽与固相包被单克隆抗体的反应,抑制率大于40%,表明在该12肽内含有IBDV抗原表位。选取35个单克隆噬菌斑,测定噬菌体gIII部分基因的核苷酸序列,确定了这5个含有不同IBDV抗原表位12肽的核苷酸和氨基酸序列。进一步将其与GenBank中IBDV基因组编码蛋白的氨基酸序列进行比较,发现2B1筛选肽有4个连续氨基酸残基Leu-Ala-Ser-Pro与IBDV基因组A片段编码多聚蛋白的第536-599氨基酸残基一致,推测2B1为线性表位;而HNF1、HNF7、B34和2G8筛选肽均没找到有3个以上连续氨基酸残基与IBDV蛋白序列相同之处,推测可能是构象依赖性表位。
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