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实用WSSV定量检测方法的建立及其应用于脊尾白虾病毒感染规律的研究

文献类型： 中文期刊

作者： 李新苍 1 ; 周俊芳 1 ; 房文红 1 ; 董建波 2 ; 朱磊 1 ; 王元 1 ;

作者机构： 1.中国水产科学研究院东海水产研究所

2.江苏省海洋渔业指挥部

关键词： 脊尾白虾;白斑综合征病毒;检测与定量;感染规律

期刊名称： 水产学报

ISSN： 1000-0615

年卷期： 2012 年 36 卷 10 期

页码： 1554-1562

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为优化当前白斑综合征病毒(WSSV)定量检测方法,实验结合当前WSSV诊断与定量方法应用的实际,试图通过设计两对普通PCR引物来建立一种实用的WSSV绝对定量方法,并利用此方法进一步探明WSSV在脊尾白虾体内的增殖规律及致病性。首先根据WSSV的囊膜蛋白VP28基因序列设计了两对特异引物(F1,R1)和(RF2,RR2),分别用于标准品质粒的构建和扩增子的扩增,以开展SYBR Green染料法定量检测WSSV的研究;随后利用该定量检测方法分析了WSSV在脊尾白虾体内的组织分布及感染规律。研究结果显示:(1)以定量引物RF2和RR2建立的SYBR Green绝对定量检测方法具有敏感度高、特异性强、定量范围广且准确等特点;(2)WSSV能感染脊尾白虾鳃、肝胰腺、肌肉、头胸甲下结缔组织、胃及肠等组织,其中头胸甲下结缔组织病毒含量最高(1.1×107copies/μg),其次是鳃组织(4.1×106copies/μg);正常脊尾白虾感染WSSV,首先经过一个约48 h潜伏期,而后开始大量增殖并造成部分虾死亡,死亡率约为20%。

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