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半滑舌鳎促黄体激素基因克隆和表达分析及其血清浓度测定

文献类型: 中文期刊

作者: 柳学周 1 ; 史宝 2 ; 王珊珊 2 ; 徐永江 2 ; 李晓晓 2 ;

作者机构: 1.中国水产科学研究院黄海水产研究所

2.中国水产科学研究院黄海水产研究所,农业部海洋渔业可持续发展重点实验室,青岛市海水鱼类种子工程与生物技术重点实验室

关键词: 半滑舌鳎;促黄体激素(LH);cDNA克隆;实时荧光定量PCR;放射免疫测定

期刊名称: 中国工程科学

ISSN: 1009-1742

年卷期: 2014 年 16 卷 09 期

页码: 52-62

收录情况: 北大核心

摘要: 利用RACE技术首次克隆了半滑舌鳎脑垂体中促黄体激素(LH)基因cDNA全长序列。该基因全长670 bp,开放阅读框为477 bp,编码158个氨基酸。与其他脊椎动物的LH成熟肽氨基酸序列同源性比较表明:半滑舌鳎LH与鲽形目和鲈形目同源性高58%~68%。另外,半滑舌鳎LH含有12个保守的半胱氨酸残基和1个N-糖基化位点(19~21 NQT)。实时荧光定量组织表达分析表明,LH mRNA在脑、垂体、卵巢等组织中表达,垂体中表达量最丰富,其他组织尤以脑、性腺表达量较高,推测半滑舌鳎LH可能具有广泛的垂体外生理功能;实时荧光定量PCR方法对繁殖周期雌性半滑舌鳎LH表达水平进行测定,结果表明,LH mRNA在Ⅱ~Ⅵ各繁殖周期的脑、垂体、卵巢3种组织都有表达,但表达水平有差异,在Ⅳ、V期表达量最丰富,说明LH主要促进卵母细胞最终成熟及排卵。利用125I标记的放射免疫测定(RIA)技术检测繁殖周期半滑舌鳎血清LH浓度,结果表明LH在V期含量最丰富,也说明LH主要促进卵母细胞最终成熟及排卵。

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