文献类型： 中文期刊

作者： 李柚 ¹ ; 张岩 ¹ ; 雒嘉炜 ¹ ; 徐丹红 ¹ ; 马娟 ¹ ; 高梦祥 ¹ ; 刘华 ¹ ; 曾海娟 ¹ ; 王金斌 ¹ ;

作者机构： 1.长江大学生命科学学院;上海市农业科学院生物技术研究所农业农村部农业转基因生物安全评价(环境)重点实验室

关键词： 成簇规则间隔短回文重复序列(CRISPR);免扩增检测;体系优化;信号放大

期刊名称： 中国生物工程杂志

ISSN： 1671-8135

年卷期： 2024 年 06 期

页码： 104-115

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 快速准确的分子诊断在食品安全、疾病诊断、环境监测等生命科学领域发挥重要作用。成簇规则间隔短回文重复序列(clustered regularly interspaced short palindromic repeats, CRISPR)及相关蛋白(CRISPR-associated protein, Cas)组成的CRISPR/Cas系统因具有高灵敏度、高特异性、便捷性及快速等优势，已成为精确检测核酸靶标的重要分子诊断工具。基于CRISPR/Cas系统的检测通过预扩增步骤提高靶标浓度，但也随之带来气溶胶污染、操作复杂和检测周期长等问题。因此需要积极开发更多免扩增策略，在最大限度保证灵敏度的同时，一步式实现对靶标的检测。综述了免扩增CRISPR系统的重要性，重点阐述了反应影响因素及相关策略对体系的优化作用，以及数字芯片法、表面增强拉曼光谱法和电化学金属电极法对信号放大效果的前沿进展，并对CRISPR/Cas系统的即时检测应用进行展望，以期为免扩增CRISPR/Cas检测系统的发展提供理论指导。