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一株副溶血性弧菌裂解性噬菌体的分离、鉴定及其生物学特性

文献类型: 中文期刊

作者: 江艳华 1 ; 王联珠 1 ; 李风铃 1 ; 翟毓秀 1 ; 姚琳 1 ;

作者机构: 1.中国水产科学研究院黄海水产研究所农业部水产品质量安全检测与评价重点实验室

关键词: 副溶血性弧菌;裂解性噬菌体;分离;生物学特性

期刊名称: 中国生物制品学杂志

ISSN: 1004-5503

年卷期: 2015 年 28 卷 11 期

页码: 1147-1152+1156

收录情况: CSCD

摘要: 目的从贝类样品中分离一株副溶血性弧菌裂解性噬菌体,并对其进行鉴定及生物学特性分析。方法采用双层平板法从贝类样品中分离副溶血性弧菌噬菌体,观察噬菌斑特征;利用聚乙二醇8000浓缩噬菌体颗粒,Cs Cl等密度梯度离心纯化;采用透射电镜观察磷钨酸负染的噬菌体大小和形态,酚-氯仿法提取噬菌体核酸,通过限制性核酸内切酶处理分析其核酸类型;常规方法分析噬菌体的热稳定性、最适培养温度、最适盐浓度、p H稳定性及对氯仿、乙醚的敏感性,并测定噬菌体最佳感染复数(MOI),绘制一步生长曲线。结果分离获得了一株副溶血性弧菌裂解性噬菌体,命名为Vp JYP1;其噬菌斑中心透明区域直径为1.5~2.5 mm,外有晕圈,直径为8~11 mm;透射电镜观察显示,其头部呈二十面体立体结构,直径约60 nm,尾部宽约8 nm,长约20 nm,按国际病毒分类委员会分类标准,其符合短尾病毒科(Podoviridae)特征;Vp JYP1核酸为双链DNA;生物学特性分析显示,Vp JYP1在40~60℃稳定,最佳培养温度为36℃,最适盐浓度为3%~4%,在p H 5~11稳定,对氯仿、乙醚均不敏感,最佳MOI为0.001,感染宿主菌的潜伏期约为5 min,裂解期约为45 min,裂解量约为110。结论分离得到的Vp JYP1属于短尾病毒科裂解性噬菌体,具有副溶血性弧菌生物抑菌剂的应用潜力。

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