文献类型： 中文期刊

作者： 赵冬敏 ¹ ; 黄欣梅 ¹ ; 刘宇卓 ¹ ; 韩凯凯 ¹ ; 杨婧 ¹ ; 谢星星 ¹ ; 刘晓燕 ¹ ; 李银 ¹ ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院兽医研究所/国家兽用生物制品工程技术研究中心/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室

关键词： 鹅坦布苏病毒;E蛋白;结构域Ⅰ;原核表达;免疫原性

期刊名称： 南方农业学报

ISSN： 2095-1191

年卷期： 2014 年 45 卷 12 期

页码： 2259-2263

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】明确鹅坦布苏病毒(GTUMV)E蛋白结构域I的原核表达及免疫原性,为进一步研究GTMUV E蛋白结构的生物学特性、免疫学功能等奠定基础。【方法】通过人工合成方法获得GTMUV E蛋白结构域I的编码基因(EI基因),并与携带GST标签的p GEX-4t-1载体连接,转入大肠杆菌后经诱导表达获得融合蛋白,并以Western blotting鉴定融合蛋白是否有免疫原性。【结果】合成获得的E1基因片段为411 bp,将其插入p GEX-4t-1载体可构建重组表达质粒p GEX-4t-1-EI。阳性重组菌经1 mmol/L IPTG诱导5 h后,融合蛋白的表达量达最高峰,且以包涵体形式存在,分子量约41.0 k Da。Western blotting鉴定结果显示,融合蛋白与GST标签抗体和E蛋白阳性血清均可发生特异性反应,检测到预期的目的条带。【结论】GTMUV E蛋白结构域I可在大肠杆菌中成功诱导表达,且获得的融合蛋白具有良好的免疫原性,可用于GTMUV血清学检测试剂盒的研发。