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黄鳍鲷骨骼肌伴肌动蛋白的纯化及其抗体制备

文献类型: 中文期刊

作者: 杜雪莉 1 ; 周利亘 2 ; 王锡昌 3 ; 熊何健 1 ; 苏文金 1 ; 曹敏杰 1 ;

作者机构: 1.集美大学生物工程学院

2.浙江省农业科学院食品加工研究所

3.上海水产大学食品学院

关键词: 黄鳍鲷;伴肌动蛋白;纯化;抗体

期刊名称: 水产学报

ISSN: 1000-0615

年卷期: 2008 年 32 卷 03 期

页码: 146-152

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 采用Sephacryl S-400凝胶过滤柱层析和电洗脱等纯化方法,首次从黄鳍鲷骨骼肌中分离纯化到伴肌动蛋白,并制备了特异性多克隆抗体。多克隆抗体经Protein A-Sepharose亲和层析柱纯化得到高纯度免疫球蛋白G(IgG)。采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、免疫斑点印迹(Dot-Blot)和免疫印迹(Western-Blot)等方法对纯化的伴肌动蛋白及其多克隆抗体进行分析鉴定,并研究了不同贮藏条件下伴肌动蛋白的变化情况。SDS-PAGE结果显示本研究从黄鳍鲷骨骼肌中分离纯化了高纯度伴肌动蛋白;Dot-Blot检测结果显示兔抗黄鳍鲷伴肌动蛋白多克隆抗体效价为5×104;Western-blot检测表明兔抗黄鳍鲷伴肌动蛋白多克隆抗体能与肌原纤维蛋白中的伴肌动蛋白发生特异性反应,而与其它蛋白不发生免疫交叉反应。

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