您好，欢迎访问江苏省农业科学院 机构知识库！
江苏省农业科学院机构知识库

全部

  • 全部
  • 标题
  • 学者
  • 机构
  • 关键词

血清4型禽腺病毒六邻体蛋白的原核表达及鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 刘娜 1 ; 刘青涛 1 ; 李银 1 ; 杨婧 1 ; 李祥瑞 1 ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心;南京农业大学动物医学院

关键词： 血清4型禽腺病毒;六邻体蛋白;原核表达

期刊名称： 华北农学报

ISSN： 1000-7091

年卷期： 2018 年 05 期

页码： 106-110

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 通过原核表达的方法得到血清4型禽腺病毒的主要结构蛋白六邻体蛋白;根据GenBank中血清4型禽腺病毒六邻体蛋白的基因序列,设计一对特异性引物,利用普通PCR方法扩增得到hexon基因的全长序列。将PCR扩增得到的血清4型禽腺病毒六邻体基因片段,在其两端插入酶切位点后克隆至载体pMD18T中,经PCR鉴定和测序分析正确后,与原核表达载体pET-32 a进行连接,构建pET-32 a-hexon原核表达载体,并对其进行双酶切和测序鉴定。将构建成功的表达载体转化至BL21(DE3)中,用1 mmol/L的IPTG进行诱导表达,对得到的重组蛋白进行SDS-PAGE分析和Western Blot鉴定;经双酶切鉴定和测序鉴定,pET-32a-hexon原核表达载体构建成功,插入的六邻体蛋白基因片段大小为2 814 bp,在1 mmol/L浓度IPTG诱导3 h时重组蛋白表达量最高,且重组蛋白主要以包涵体形式存在于沉淀中。SDS-PAGE分析结果显示,融合蛋白分子量为118 ku。免疫印迹分析结果显示,融合蛋白可被抗FAdV-4的血清和HIS标签抗体特异性识别;成功表达了血清4型禽腺病毒的主要结构蛋白六邻体蛋白,且得到的重组蛋白具有良好的反应原性,可用于血清4型禽腺病毒的进一步研究中,为血清4型禽腺病毒病的预防和治疗奠定了良好的基础。

  • 相关文献

[1]高致病性血清4型禽腺病毒hexon基因在昆虫细胞中的表达及鉴定. 梅梅,陆吉虎,张雪花,唐应华,侯继波. 2018

[2]鸡血清4型禽腺病毒与HH9亚型禽流感病毒亚型禽流感病毒、新城疫病毒混合感染的鉴定. 梅梅,陆吉虎,张雪花,唐应华,侯继波. 2017

[3]血清4型禽腺病毒fiber-2基因在昆虫细胞中的表达及其免疫原性分析. 梅梅,陆吉虎,张雪花,唐应华,卢宇,侯继波. 2019

[4]鸭源血清4型禽腺病毒的分离鉴定. 卢凤英,孙华伟,张敬峰,刘传敏,范鑫,张晓曦,张小飞. 2018

[5]鹅坦布苏病毒非结构蛋白NS5的原核表达及特性分析. 韩凯凯,李银,黄欣梅,赵冬敏,刘宇卓. 2015

[6]猪Viperin主要抗原区的原核表达及多克隆抗体的制备. 李文良,韩林晓,毛立,杨蕾蕾,张纹纹. 2014

[7]鹅黄病毒E蛋白的克隆与原核表达. 黄欣梅,李银,赵冬敏,刘宇卓. 2012

[8]鹅坦布苏病毒非结构蛋白NS1的原核表达及初步纯化. 赵冬敏,黄欣梅,刘宇卓,张敬峰,韩凯凯. 2012

[9]近期引起免疫失败的传染性法氏囊病病毒VP2基因在大肠杆菌中的表达. 曹冰玉,王永山,范红结,欧阳伟,王忠灿. 2010

[10]BDV E2蛋白的原核表达及鉴定. 毛立,刘霞,李文良,杨蕾蕾,张纹纹. 2013

[11]圆环病毒2型ORF2编码基因原核表达与初步应用. 潘群兴,南京农业大学,何孔旺,黄克和. 2006

[12]近期引起免疫失败的传染性法氏囊病病毒VP2基因在大肠杆菌中的表达. 曹冰玉,王永山,范红结,欧阳伟,王忠灿,唐雨德. 2010

[13]传染性法氏囊病病毒AH1株VP2基因在原核中的表达与抗原性分析. 曹冰玉,欧阳伟,王永山,范红结. 2010

[14]非典型犬瘟热病毒核衣壳蛋白基因序列分析及其在大肠杆菌中的表达. 毕振威,王永山,范红结,王智群. 2012

[15]鹅源坦布苏病毒囊膜蛋白的克隆、原核表达及重组蛋白的应用. 黄欣梅,李银,赵冬敏,刘宇卓,韩凯凯. 2012

[16]猪链球菌2型支链氨基酸转移酶的原核表达及纯化. Wang Rui,王锐,倪艳秀,Ni Yan-xiu,Sun Ke,孙珂,Zhou Jun-ming,周俊明,Wang Dan-dan,王丹丹. 2019

[17]密码子优化的猪瘟病毒荧光抗体的表达及初步应用. 何辉,乔绪稳,陈瑾,于晓明,张元鹏,侯继波,郑其升,孙卫东. 2017

[18]含不同个数基序肽聚糖锚钩蛋白与纳米抗体融合表达对GEM颗粒结合活性的比较. 汪浩,乔绪稳,陈瑾,李图帅,张元鹏,侯继波,郑其升,孙卫东. 2016

[19]金银花糖基转移酶基因LjUGT71E1的克隆及原核表达. 徐道华,亓希武,陈吟,于盱,房海灵,梁呈元. 2018

[20]乳酸乳球菌肽聚糖锚钩蛋白原核表达载体的构建与表达. 李鹏成,孙冰,乔绪稳,郑其升,侯继波. 2013

作者其他论文 更多>>
置顶
购物车
反馈

© 京ICP备09089781号-29 主办单位：江苏省农业科学院

学术资源： 中国农业科学院 农业专业知识服务系统 农科联盟资源共建共享平台 中国农业科技文献与信息服务平台 中国农业期刊集成服务平台