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一种新型火鸡疱疹病毒细菌人工染色体的构建与鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 王志胜 1 ; 刘芳 1 ; 许梦微 1 ; 乔永峰 1 ; 侯继波 1 ; 王继春 1 ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院/国家兽用生物制品工程技术研究中心

关键词： 火鸡疱疹病毒;细菌人工染色体;糖蛋白C;生长动力学;免疫效力

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2016 年 47 卷 10 期

页码： 2071-2080

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 拟构建一种新型火鸡疱疹病毒(HVT)全基因组细菌人工染色体(BAC),通过同源重组方法将mini-F载体插入HVT基因组的糖蛋白C(glycoprotein C,gC)基因的等位位点得到mini-F重组HVT,提取重组病毒的DNA转入大肠杆菌DH10B细胞,再转入GS1783细胞获得BAC,拯救病毒获得mini-F重组病毒和gC恢复病毒后,与亲本病毒(HVT FC126)比较生长动力学和对鸡马立克病的免疫效力。结果:获得数个BAC阳性克隆,取其中一个克隆(BAC~(HVT-G))成功拯救出HVT mini-F重组病毒(HVT~(BAC-ΔgC)),并成功获得了gC恢复毒株(HVT~(BAC-gC-R))。生长特性和免疫效力试验表明HVT~(BAC-gC-R)与HVT FC126无显著差异,而HVT~(BAC-ΔgC)增殖能力和免疫效力均明显下降。成功构建了HVT全基因组的感染性BAC;HVT的gC基因是一个非必需基因,但对病毒的增殖能力和免疫效力有重要影响。

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