文献类型： 中文期刊

作者： 谢星星 ¹ ; 李银 ² ; 李祥瑞 ¹ ; 赵冬敏 ² ; 黄欣梅 ² ; 韩凯凯 ² ; 刘玉卓 ² ;

作者机构： 1.南京农业大学动物医学院

2.江苏省农业科学院兽医研究所

关键词： 坦布苏病毒;鹅;双抗体夹心ELISA

期刊名称： 畜牧与兽医

ISSN： 0529-5130

年卷期： 2014 年 46 卷 05 期

页码： 24-30

收录情况： 北大核心

摘要： 以鹅源坦布苏病毒JS804毒株制备的多克隆抗体为捕获抗体,抗鹅坦布苏病毒NS1蛋白的单克隆抗体4A9作为检测抗体,建立了检测坦布苏病毒的双抗体夹心ELISA方法。该方法的最佳反应条件为:兔抗鹅坦布苏病毒多克隆抗体的最适稀释度为1∶1 600,单克隆抗体的最适稀释度为1∶160,样品反应时间为1 h,酶标羊抗鼠二抗工作浓度为1∶5 000,以OD450nm≥0.245作为阳性判定标准。该方法的板间、板内重复性变异系数小于10%,病毒最低检测量为386.25TCID50/0.1 mL,与新城疫病毒(NDV)、禽流感病毒(AIV)、传染性支气管炎病毒(IBV)、鸭肝炎病毒(DHV)和鹅细小病毒(GPV)无交叉反应。应用该方法与RT-PCR方法同时检测22份临床样品,符合率达到86.36%。结果表明,建立的双抗体夹心ELISA方法具有特异性好、灵敏性高和重复性好等优点,可用于坦布苏病毒的快速检测。