文献类型： 中文期刊

作者： 朱潇静 ¹ ; 王芮 ¹ ; 张欣欣 ¹ ; 靳家鑫 ¹ ; 路闻龙 ¹ ; 丁大顺 ¹ ; 霍翠梅 ² ; 李青梅 ³ ; 孙爱军 ¹ ; 庄国庆 ¹ ;

作者机构： 1.河南农业大学动物医学院国家动物免疫学国际联合研究中心

2.济宁市畜牧业发展中心

3.河南省农业科学院

关键词： 细菌人工染色体;新城疫病毒;F基因;马立克氏病毒;重组疫苗

期刊名称： 中国生物工程杂志

ISSN： 1671-8135

年卷期： 2021 年 010 期

页码： 33-41

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的:预防马立克氏病病毒（MDV）和新城疫病毒（NDV）混合感染鸡引起的疾病,构建表达NDV F蛋白的MDV疫苗株CVI988 BAC重组载体,并包装成重组病毒,为疫苗免疫提供更多的重组疫苗选择。方法:首先利用PCR扩增带有卡那霉素（Kanamycin,Kana）抗性基因片段的F基因,采用同源重组的方法将其整合到CVI988 BAC上,进一步诱导I-SceI表达敲除Kana基因而获得重组质粒CVI988 BAC-F。通过磷酸钙法转染鸡胚成纤维细胞获得重组病毒。结果:Western blot和间接免疫荧光实验证实重组病毒能够表达F蛋白。病毒生长曲线和蚀斑大小测定结果表明,F基因的插入不影响病毒的体外增殖。结论:利用BAC技术成功构建了整合F基因的重组MDV病毒CVI988 BAC-F,为MDV重组疫苗研发,防控NDV与MDV共感染奠定了基础。