文献类型： 中文期刊

作者： 王金斌 ¹ ; 李文 ¹ ; 张俊沛 ¹ ; 赵妍 ¹ ; 陈建中 ¹ ; 祝子坪 ¹ ; 唐雪明 ¹ ;

作者机构： 1.上海市农业科学院上海市农业遗传育种重点实验室;上海海洋大学食品学院;浙江台州学院生命科学学院浙江省植物进化生态学与保护重点实验室

关键词： 草菇;原生质体制备;原生质体再生;响应面分析法;诱变

期刊名称： 分子植物育种

ISSN： 1672-416X

年卷期： 2017 年 15 卷 10 期

页码： 4110-4119

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了提高草菇原生质体在筛选耐低温突变筛选的诱变效率,建立基于草菇原生质体制备产量及再生率的响应面模型,优化草菇原生质体制备体系。本研究以草菇V23为材料,利用Design-Expert 8.0.6软件进行二次回归分析对参数菌龄、酶的浓度、酶解时间、酶解温度等进行了系统的优化研究。结果表明,溶壁酶的浓度为1.71%,酶解温度为31.4℃,菌丝体菌龄为3.42 d,酶解时间为3.21 h,草菇原生质体产量最高,达到2.57×107个/m L;用1.84%的溶壁酶在31.2℃条件下对菌龄为3.68 d的菌丝体酶解3.38 h,原生质体再生率最高,为14.1%。并利用紫外诱变和化学诱变技术对草菇原生质体进行了耐低温诱变初探,筛选获得5株抗冻能力提高的突变菌株。草菇V23原生质体产量和再生率的优化条件的建立,为提高草菇在遗传转化、基因组重排、基因编辑技术等后续分子遗传学操作实验打下了良好的基础。