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梭子蟹肌孢虫SYBR Green I实时定量PCR检测方法的建立与应用

文献类型: 中文期刊

作者: 陈甜甜 1 ; 房文红 1 ; 王元 1 ; 李新苍 1 ; 赵姝 1 ; 周俊芳 1 ;

作者机构: 1.农业部东海渔业资源开发利用重点实验室中国水产科学研究院东海水产研究所;上海海洋大学水产与生命学院

关键词: 梭子蟹肌孢虫;三疣梭子蟹;实时定量PCR方法;SYBR Green I

期刊名称: 南方水产科学

ISSN: 2095-0780

年卷期: 2017 年 06 期

页码: 22-29

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 梭子蟹肌孢虫(Ameson portunus)是感染三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)的常见病原之一,该研究以其SSU rRNA基因为靶标建立了SYBR Green I实时定量PCR检测方法。结果显示:该方法扩增效率为101.45%,检测灵敏度下限可达2.0×10~1拷贝·μL~(-1),特异性、组内重复性和组间重复性均好。利用该荧光定量PCR方法对一批来自"牙膏病"流行区的养殖三疣梭子蟹样品进行检测,梭子蟹肌孢虫检出率为82.35%。检测结果显示,活蟹的每毫克肌肉平均带虫量大幅低于死蟹,表明该地区梭子蟹的死亡与肌孢虫的感染密切相关,而且,当梭子蟹肌孢虫载量达到1.0×10~9拷贝·mg~(-1)时三疣梭子蟹存在暴发疾病甚至死亡的风险。另外,通过对比检测发现,梭子蟹肌孢虫套式PCR方法对这批样品的检出率为64.71%,表明该研究建立的荧光定量PCR方法具有更高的灵敏度。

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