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产蛋下降综合征病毒单克隆抗体的制备

文献类型: 中文期刊

作者: 李银 1 ; 陈溥言 2 ; 蔡宝祥 2 ;

作者机构: 1.南京农业大学动物医学院

2.南京农业大学动物医学院,江苏省农科院牧医所

关键词: EDS-76病毒,单克隆抗体,ELISA,HI,中和试验

期刊名称: 中国兽医学报

ISSN:

年卷期: 1996 年 02 期

页码:

收录情况: 北大核心

摘要: 以粗提的EDS-76病毒(NE-4株)作为抗原,按常规方法免疫BALB/c鼠,最后一次免疫后第3天取脾细胞与SP2/0细胞进行融合,采用间接ELISA和HI进行双重筛选,共检出25个阳性孔,阳性率为14.88%。对其中的11个阳性值较高的孔进行3次克隆,最后获得的11株杂交瘤细胞,经长期体外培养和冻存后复苏仍能稳定地分泌抗体;ELISA阻断试验和与其他病毒的交叉试验证明,其分泌的抗体具有高度特异性。经鉴定,11株McAb均为IgG,均无免疫沉淀特性,腹水和细胞培养上清的ELISA效价分别为1:3200~1:51200和1:128~1:2048。杂交瘤细胞的染色体数目为80~112,平均92。尤为重要的是,11株杂交瘤细胞中有4株分泌抗EDS-76病毒血凝素决定簇的中和单抗,细胞培养上清和腹水的HI价分别为210~2 ̄(12)和2 ̄(22)~2 ̄(24),腹水的中和效价为1:1280~1:5120。

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