文献类型: 中文期刊
作者: 姚琳 1 ; 张奇 1 ; 李风铃 1 ; 张媛 1 ; 逄凤娇 1 ; 江艳华 1 ; 王联珠 1 ; 翟毓秀 1 ;
作者机构: 1.中国水产科学研究院黄海水产研究所农业部水产品质量安全检测与评价重点实验室;獐子岛集团股份有限公司
关键词: 食源性病毒;多联装甲RNA;Qβ噬菌体;阳性质控样品;实时荧光定量逆转录-聚合酶链式反应
期刊名称: 食品科学
ISSN: 1002-6630
年卷期: 2019 年 08 期
页码: 293-299
收录情况: EI ; 北大核心 ; CSCD
摘要: 基于Qβ噬菌体装甲RNA制备平台构建同时含有诺如病毒(norovirus,NoV)、甲肝病毒(hepatitis Avirus,HAV)、轮状病毒(rotavirus,RV)、星状病毒(astrovirus,AstV)检测靶标RNA的多联装甲RNA(multiplexarmoredRNA,AR-MulV),并进行纯化与初步定值。结果表明,重组质粒在大肠杆菌中成功表达,表达产物大小约为14.1 kDa;制备的AR-MulV经纯化后无杂蛋白与残留重组质粒,电镜下可见大量结构形态完整的病毒样颗粒,大小约为25 nm。初步定值结果显示,AR-MulV中GⅠ型NoV、GⅡ型NoV、HAV、RV和AstV检测靶标RNA的含量分别为(1.24±0.2)×10~7、(2.54±0.6)×10~7、(2.24±0.3)×10~7、(2.96±0.5)×10~7 copies/μL和(3.19±0.4)×10~7 copies/μL。本研究基于Qβ噬菌体装甲RNA制备平台成功制备同时包含4种食源性病毒标准方法检测靶标的多联装甲RNA,为食源性病毒的分子检测以及多重实时荧光定量逆转录-聚合酶链式反应阳性质控样品的研发提供新思路。
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