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大球盖菇漆酶的分离纯化及酶学性质研究

文献类型: 中文期刊

作者: 钱磊 1 ; 张业尼 1 ; 陈雪 1 ; 刘金福 1 ; 张志军 1 ; 刘建华 1 ;

作者机构: 1.天津市林业果树研究所;天津农学院食品科学与生物工程学院

关键词: 大球盖菇;漆酶;纯化;酶学性质

期刊名称: 生物技术通报

ISSN: 1002-5464

年卷期: 2018 年 04 期

页码: 127-132

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 从大球盖菇Sr-01菌株液体发酵液中分离漆酶,研究温度、p H和金属离子对酶活的影响。采用硫酸铵分级沉淀、Q-Sepharose阴离子交换层析和Superdex 200凝胶过滤层析对大球盖菇漆酶进行分离纯化。以ABTS[2,2-连氮基-双-(3-乙基苯并二氢噻唑啉-6-磺酸)]为底物,分光光度法测定酶活。结果表明,纯化后的漆酶比活力为152.79 U/mg,回收率为35.8%。SDSPAGE显示该漆酶为单体蛋白,相对分子质量约40 k D。该漆酶的最适反应温度和p H分别为35℃和4.0,Mg~(2+)、Cu~(2+)对酶活有激活作用,Fe~(2+)、Cd~(2+)、Hg~(2+)则有显著抑制作用。在最优反应条件下,纯化后的漆酶比活力可达222.93 U/mg。

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