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传染性法氏囊病病毒多表位模拟肽串联基因的表达与免疫原性分析

文献类型： 会议论文

第一作者： 王永山

作者： 王永山 1 ; 江苏省农业科学院兽医研究所 2 ; 范红结 3 ; 张晓民 1 ; 李银 4 ; 肖焕娟 1 ;

作者机构： 1.南京军区军事医学研究所,南京军区疾病预防控制中心,南京,210002

2.南京,210014

3.南京农业大学动物医学院,南京,210095

4.江苏省农业科学院兽医研究所,南京,210014

关键词： 鸡传染性法氏囊病病毒;抗原表位;免疫原性;大肠杆菌;血清抗体

会议名称： 中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会

主办单位： 中国畜牧兽医学会

页码： 854-858

摘要： 用5株传染性法氏囊病病毒(IBDV)单克隆抗体(mAb)从噬菌体随机肽库中得到了5个含有不同IBDV抗原表位的模拟肽序列.在此基础上,将5个抗原表位用GGGS四肽连接构建多表位基因5epis.将该基因合成、克隆后,构建原核表达质粒pET-5epis,在大肠杆菌中表达重组多表位蛋白r5EPIS,经SDS-PAGE分析,r5EPIS占菌体总蛋白的15％、分子量10kDa.用IBDV单克隆抗体和多克隆抗体对r5EPIS进行免疫印迹对比分析,结果表明,r5EPIS具有IBDV特异性和免疫反应性。将r5EPIS经皮下注射免疫兔,400μg/只/次,免疫2次,间隔7d,用IBDV间接ELISA检测血清抗体,第一次免疫7d后抗体效价为1∶4000,第二次免疫14d后抗体效价升高到1∶256000,说明r5EPIS可诱导机体产生IBDV特异性抗体。用r5EPIS加免疫佐剂经肌肉注射免疫鸡,50μg/只/次,免疫2次后,血清抗体效价可达到1∶12800,用200个ELD50IBDV超强毒株GX8/99攻击实验鸡,r5EPIS免疫组全部存活,而对照组的死亡率为93.3％(14/15),证明r5EPIS可诱导机体产生抗IBDV感染的保护性免疫应答,预示构建的5epis可作为IBD多表位疫苗研究的候选基因。

分类号： S858.31`S852.659.4

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