文献类型： 会议论文
第一作者： 黄欣梅
作者： 黄欣梅 1 ; 李银 1 ; 赵冬敏 1 ; 刘宇卓 2 ;
作者机构： 1.江苏省农业科学院兽医研究所，农业部兽用生物制品工程技术重点实验室，国家兽用生物制品工程技术研究中心，南京 江苏 210014
2.江苏省农业科学院兽医研究所，农业部兽用生物制品工程技术重点实验室，国家兽用生物制品工程技术研究中心，南京 江苏 21001
关键词： 鹅黄病毒;囊膜蛋白;基因克隆;原核表达;免疫原性
会议名称： 中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次人兽共患病学术研讨会暨第六届第十四次教学专业委员会会议
主办单位： 中国畜牧兽医学会
页码： 392-395
摘要： 禽黄病毒是新发现的一种可引起家禽产蛋和采食量下降及死亡的黄病毒属病毒。本研究选取鹅黄病毒囊膜蛋白(E蛋白)基因进行克隆、表达和纯化，以获得能应用于血清学诊断和可作为亚单位疫苗的重组蛋白。根据鹅黄病毒JS804株全基因序列设计了一对引物，采用RT-PCR方法扩增出了鹅黄病毒的E基因，将其克隆到表达载体pET32a(+)中，构建了重组表达质粒pET32a-E，转化大肠杆菌BL21(DE3)，并用IPTG进行诱导表达。结果表明，鹅黄病毒E基因在大肠杆菌中获得高效表达，融合蛋白分子量约为70kDa，主要以包涵体形式存在于菌体中。Western Blot和间接免疫荧光试验发现，重组E蛋白具有良好的反应原性和免疫原性。鹅黄病毒E蛋白的原核表达为进一步研究该蛋白功能、建立血清学检测方法及研制亚单位疫苗奠定了基础。
分类号： S858.33:S852.65
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