科研产出
液相色谱-串联质谱法手性拆分和测定水产品中奥沙西泮和替马西泮对映体
《分析测试学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：建立了液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）手性拆分和测定水产品中奥沙西泮和替马西泮对映体残留量的分析方法。样品经乙腈提取2次，40℃条件下氮气浓缩至近干，残渣加入2 mL 50%乙腈-水溶液溶解，采用分散固相萃取净化，LC-MS/MS测定。使用EnantioPAK?Y1-R（5μm,150 mm×4.6 mm）手性色谱柱，乙腈和0.1%甲酸-5 mmol/L乙酸铵溶液作为流动相，采用等度洗脱方式实现奥沙西泮和替马西泮手性对映体的拆分。目标对映体采用电喷雾正离子（ESI+）模式电离，多反应监测（MRM）模式下，内标法测定。目标对映体在0.5～50μg/L质量浓度范围内线性关系良好，相关系数（r2）均不低于0.999 0。水产品中对映体的检出限和定量下限分别为0.2μg/kg和0.5μg/kg。在5种空白基质中添加低、中、高浓度水平的目标对映体，样品平均加标回收率为82.6%～107%，相对标准偏差（RSD,n=6）为1.6%～9.2%。该方法灵敏可靠、适用性强，可用于不同水产品中奥沙西泮和替马西泮对映体的分析。
关键词： 液相色谱-串联质谱法 对映体 手性拆分 分散固相萃取 水产品
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刺参TRAF7基因克隆及其响应高温胁迫下的表达特征分析
《渔业科学进展 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：肿瘤坏死因子受体相关因子7 (tumor necrosis factor receptor associated factor 7, TRAF7)作为一种细胞内蛋白，参与信号转导，并介导宿主应激防御调控过程。为研究TRAF7在刺参(Apostichopus japonicus)高温胁迫中的作用，本研究利用c DNA末端快速扩增技术(RACE)和实时荧光定量PCR技术(RT-qPCR)，克隆了刺参TRAF7(Aj TRAF7)全长c DNA序列，分析了其结构特征和在基因组中的分布，并检测了该基因在刺参不同组织和高温胁迫过程中体壁组织中的表达变化情况。结果显示，AjTRAF7全长2 576 bp，开放阅读框(ORF)长1 770 bp,5'UTR长345 bp,3'UTR长461 bp，编码589个氨基酸，预测蛋白分子量为65.6 kDa，理论等电点(p I)为7.52。蛋白序列包含1个RING finger结构域、1个Coiled coil结构域和6个WD40结构域，N端包含1个螺旋区域。该基因预测蛋白包含41个丝氨酸磷酸化位点、20个苏氨酸磷酸化位点和3个酪氨酸磷酸化位点，蛋白N端具有3个天冬酰胺糖基化位点。刺参基因组中比对到2个AjTRAF7基因拷贝，第一个拷贝包含18个外显子和15个内含子，第二个拷贝包含17个外显子和14个内含子。系统进化学分析表明，刺参TRAF7氨基酸序列与蝠海星(Patiria miniata)和紫色球海胆(Strongylocentrotus purpuratus)相似性较高，分别为40.58%和38.37%，刺参与蝠海星和紫色球海胆聚在一支。RT-qPCR结果显示，Aj TRAF7在健康刺参各组织中均有表达，其在雌性性腺中表达量最高，体腔细胞中表达量次之，在呼吸树、体壁、肠道、雄性性腺和纵肌中表达量依次降低，各组织间表达量差异显著(P<0.05)。在响应高温胁迫的过程中，与对照组相比，体壁组织中AjTRAF7基因表达量在第2天和第4天显著上升(P<0.05)，第6天基因表达开始下降。综上，AjTRAF7基因可能参与刺参应对高温胁迫的表达调控过程，相关结果将为解析刺参应对高温胁迫的分子机制提供科学依据。
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圆斑星鲽雌性特异DNA分子标记开发及遗传性别鉴定方法的建立
《水产学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：【目的】开发能准确鉴定圆斑星鲽遗传性别的DNA分子标记。【方法】本研究首先通过全基因组重测序对圆斑星鲽雌性特异DNA序列进行了筛选，然后利用PCR扩增的方法对圆斑星鲽雌性特异DNA分子标记进行鉴定，并建立了一种圆斑星鲽遗传性别快速鉴定的方法。【结果】通过对17尾雄性和17尾雌性圆斑星鲽进行全基因组重测序，筛选出359条W染色体和Z染色体同源且W染色体特异性插入的差异DNA片段。根据差异DNA片段两翼保守序列设计雌雄共享引物对，采用PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳方法鉴定出一个插入片段为69 bp的雌性特异DNA分子标记，使用该标记可在雌鱼中扩增出2条DNA条带，在雄鱼中扩增出1条DNA条带。进一步利用该DNA分子标记和PCR扩增方法对另一个养殖群体的117尾圆斑星鲽进行了遗传性别鉴定，鉴定结果与性腺组织切片结果一致。【结论】圆斑星鲽雌性特异DNA分子标记的开发及遗传性别鉴定方法的建立，不仅为圆斑星鲽性别决定机制研究提供了重要的遗传学证据，而且有助于加快圆斑星鲽性别控制育种和全雌苗种培育技术的发展和建立。
关键词： 圆斑星鲽 雌性特异DNA分子标记 遗传性别鉴定 基因组重测序
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多波束宽带渔用声呐旋转扇区扫描发射性能分析
《渔业现代化 》 2025 北大核心
摘要：渔用声呐利用声波来探测水下鱼群分布和活动，通常采用全向发射或指向性扫描发射的方式实现对鱼群位置的初步探测。针对传统全向发射方式信号指向性较差，指向性扫描发射方式波束覆盖不均匀的问题，根据渔用声呐在实际捕捞场景中的需求，提出了一种基于旋转扇区扫描的改进方法。通过水声学算法仿真分析方法，分别仿真分析了扇区数量、边界角度等影响扫描发射性能的因素并进行了水池测试。仿真结果表明，采用4扇区旋转扇区的指向性扫描发射方式，在实现水平360°全向扫描的同时，提高了信号的指向性和探测区域的均匀性：主瓣强度相较全向发射提高8 dB,单个扇区中的发射波束最大强度差小于1.5 dB,波束宽度差在2°以内。综合现有测试条件，通过实验室水池测试了相邻两扇区发射扫描指向性。测试结果表明，所提出的设计方案在两扇区前方64°范围，指向性比全向发射平均高约8 dB,在提高探测效率和精度方面可行且有效，有助于在更广泛的范围内获得准确的鱼群信息。
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印太交汇区八种鱼类群体遗传结构和连通性分析
《热带海洋学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：印太交汇区是海洋生物多样性起源的中心,具有极高的生物多样性。随着全球气候的持续变化和人类活动影响的日益加剧,生态系统逐渐呈现破碎化,此背景下,海洋鱼类在连通破碎化的生态系统和维持生物多样性中发挥重要的生态功能。探究印太交汇区代表鱼类的遗传结构和连通性将有助于明确不同种群间的遗传多样性格局和扩散路径,从而为生物多样性保护提供科学支撑。本研究在印太交汇区5个代表区域(中沙群岛、南沙群岛、西沙群岛、海南岛和菲律宾)收集了八种珊瑚礁栖鱼类(日本刺尾鱼Acanthurus japonicus、波纹钩鳞鲀Balistapus undulatus、尾纹九棘鲈Cephalopholis urodeta、栉齿刺尾鲷Ctenochaetus striatus、金带齿颌鲷Gnathodentex aureolineatus、四带笛鲷Lutjanus kasmira,、黑边角鳞鲀Melichthys vidua和多带副绯鲤Parupeneusmultifasciatus)共309个样本,最终获得515条线粒体细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(cytochrome C oxidase subunit I, COI)基因和16S rDNA序列;为使研究覆盖范围更加广泛,同时在GenBank下载了以上八种鱼类在中国台湾岛、南沙群岛、菲律宾、印度尼西亚海域的线粒体COI基因序列,共86条。基于此,研究分析了以上7个代表区域不同群体间的遗传多样性和遗传分化,结果显示八种鱼类在研究区域整体具有较高水平的遗传多样性和较低的遗传分化,其中多带副绯鲤和波纹钩鳞鲀最为明显;印度尼西亚、中国台湾岛和南海诸岛群体同样具有较高的遗传多样性。研究进一步利用物种分布模型和最小成本路径模型探究了不同种群间的连通性,在此基础上,我们共收集了八种鱼类133047条分布信息,使用最大熵算法(maximum entropy model, MaxEnt)预测当前气候下物种适宜分布的区域,并利用ArcGis 10.2软件SDMtoolbox v2.5工具计算不同种群间的连通性。种群连通性揭示了菲律宾东岸—苏拉威西岛是以上八种鱼类在印太交汇区的重要扩散路径,南海诸岛(南沙、中沙和西沙群岛)连接了中国台湾岛、菲律宾和印度尼西亚的不同群体,起到了物种扩散的连通枢纽作用。综上所述,菲律宾、印度尼西亚、中国台湾岛和南海诸岛应成为维持遗传多样性和保护连通性的优先保护区。本研究强调在生物多样性保护中应综合考虑种群连通性和遗传多样性的重要性,通过结合宏观和微观层面的研究结果,以期实现更为有效的生物多样性保护。
关键词： 印太交汇区 遗传多样性 扩散 种群连通性 生物多样性保护
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长江流域9个鲢养殖群体的形态差异分析
《淡水渔业 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：为探明长江流域不同主养地区鲢(Hypophthalmichthys molitrix)养殖群体的形态特征差异，本研究采用多元统计分析方法对采集的9个鲢群体样本进行分析。结果表明，9个群体的不同形态特征间均产生了显著差异，但变异系数检验显示这种差异尚未达到亚种分化水平。聚类分析显示，湖北武汉和江西瑞昌群体间的欧氏距离最小，重庆长寿群体与其他群体间的形态差异最大。主成分分析显示，9个鲢群体的前5维主成分累计贡献率为84.92%,其中第1和第2主成分主要是头部和体高性状，对9个群体形态差异的贡献度最大。逐步判别分析显示，9个群体的综合判别准确率为69.8%,其中浙江嘉兴和重庆永川群体的判别准确率达100.0%,而不同群体间的判别准确率差异较大，这可能与不同群体的遗传背景和养殖环境有关。这些结果表明，长江流域不同地区的鲢养殖群体产生了一定程度的形态分化。
关键词： 鲢(Hypophthalmichthys molitrix) 形态差异 多元分析
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免漂洗罗非鱼鱼糜凝胶品质改良及机理分析
《南方水产科学 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：免漂洗鱼糜因含有较多的蛋白质和脂肪，风味较好，但凝胶特性不足。以罗非鱼免漂洗鱼糜为原料，探究淀粉、亲水胶体、膳食纤维等物质对其鱼糜凝胶质构特性、流变学特性、色泽、持水性及蒸煮损失率的影响，并从鱼糜水分分布、分子间作用力及蛋白质结构等角度多维分析免漂洗鱼糜凝胶品质增强的机理。结果表明：与对照组相比，淀粉、亲水胶体、膳食纤维等物质均能改善免漂洗鱼糜的质构特性和凝胶强度，提高其持水性且降低蒸煮损失率；在淀粉、亲水胶体及膳食纤维等作用下，免漂洗鱼糜中自由水转换为不易流动水和结合水，且蛋白质分子间的疏水相互作用增强，α-螺旋转变为有序β-折叠；形成十分致密、稳定的免漂洗鱼糜凝胶网络结构，明显改善了免漂洗鱼糜的凝胶品质。优化复配添加物(1.5%羟丙基二淀粉磷酸酯、0.3%聚丙烯酸钠、12%玉米淀粉和1.5%海藻膳食纤维)对免漂洗鱼糜凝胶的改善效果最显著。
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硅胶固相萃取结合气相色谱-质谱法同时测定淡水鱼中的4种土腥味物质
《分析化学 》 2025 EI SCI 北大核心 CSCD
摘要：建立了正己烷提取、石墨化炭黑净化、硅胶固相萃取浓缩和气相色谱-质谱法（Gas chromatographymass spectrometry, GC-MS）同时测定淡水鱼中土臭素（Geosmin, GSM）、2-甲基异冰片（2-Methylisoborneol,MIB）、2-异丙基-3-甲氧基吡嗪（2-Isopropyl-3-methoxypyrazine, IPMP）、2-异丁基-3-甲氧基吡嗪（2-Isobutyl-3-methoxypyrazine, IBMP）4种土腥味物质的定量分析方法。对净化材料和硅胶固相萃取条件进行了优化，确定最佳的实验条件为10 mL正己烷提取2次、0.5 g石墨化炭黑净化、硅胶固相萃取浓缩、1.5 mL正己烷-乙酸乙酯（4∶1, V/V）洗脱及选择离子监测（Selected ion monitor, SIM）模式测定。采用本方法可同时测定4种土腥味物质，在0.5～200 ng/mL浓度范围内呈良好的线性关系（相关系数R2为0.9977～0.9994）, GSM、MIB、IPMP和IBMP的检出限（LOD）分别为0.6、0.6、0.2和0.2μg/kg，方法定量限（LOQ）分别为1.0、1.0、0.6和0.6μg/kg。本方法的回收率为77.5%～112.0%，相对标准偏差为1.56%～9.42%。本方法简单易操作，准确度高，可用于淡水鱼中土腥味物质GSM、MIB、IPMP和IBMP的测定。
关键词： 土腥味物质 正己烷 硅胶固相萃取柱 气相色谱-质谱法 淡水鱼
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大菱鲆耐高温和生长性状的遗传参数评估
《渔业科学进展 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：近年夏季高温期长，使得培育耐高温良种成为大菱鲆(Scophthalmus maximus)养殖业的迫切需求。为评估大菱鲆耐高温性状遗传参数，本研究对来自30个家系的900尾大菱鲆进行高温胁迫实验，使用4种模型(LAM、CLAM、CTAMl和CTAMp)拟合了2种耐高温表型(耐热性上限性状UTT和二元存活性状BTS)，并采用约束最大似然法(REML)估算方差组分。经分析，大菱鲆耐高温性状遗传力为0.110～0.208，属中低等遗传力性状。其中，利用线性模型(LAM和CLAM)估算的遗传力分别为0.110±0.074和0.155±0.082，利用阈值模型(CTAMl和CTAMp)估算的遗传力分别为0.214±0.072和0.208±0.074，表明可以通过遗传选育提高大菱鲆耐高温能力。2种耐高温表型性状与体重的遗传相关分别为–0.07±0.40和–0.13±0.33，表型相关分别为–0.04±0.05和–0.08±0.11,2种相关均为极低相关。对不同模型估算的育种值(EBVs)进行相关性分析的结果显示，不同模型拟合同种耐温表型时，EBVs之间的相关系数>0.97，属于高强度正相关，表明使用同种表型定义时，线性或阈值模型对EBVs排名影响较小。不同模型估算EBVs与不同表型进行相关性分析的结果显示，阈值模型(CTAMl和CTAMp)估算的EBV与表型BTS之间的相关系数高于线性模型(LAM和CLAM)，说明表型BTS比表型UTT更适合作为耐温性状。此外，在线性模型中使用UTT和BTS估算的EBVs之间的相关系数<0.50，说明采用2种表型定义下估算的大菱鲆耐高温性状的EBVs排名不一致，表明大菱鲆耐高温性状使用表型BTS和截面阈值动物模型(CLAMl或CTAMp)估算大菱鲆耐高温遗传参数更有优势。本研究结果是对大菱鲆耐温性遗传参数研究的补充，为制订冷水鱼类耐高温性状育种规划提供了理论依据。
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