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湖北荆州地区黄颡鱼高效养殖经验总结

渔业致富指南 2016

摘要:荆州市弥市镇漳泊湖渔场位于湖北省荆州市荆州区,全场总人口325人,养殖水面1200亩,是一个以水产养殖为主的湖北地区典型渔场。2013年以前,养殖模式主要以鱼鳖混养和四大家鱼常规养殖为主,但因水源水质较差、病害严重,养殖技术不过关等问题,效益一直不

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福瑞鲤与黄河鲤、建鲤鱼肉品质的比较及影响肉质的主成分分析

食品科学 2016 北大核心 CSCD

摘要:为研究福瑞鲤和黄河鲤、建鲤的肉质差异,选取了体质量相近、相同养殖条件下的3种鲤鱼,分析其质构特性、肉色、p H值变化及营养成分。结果表明:福瑞鲤剪切力、硬度、胶黏性、咀嚼性指标低于黄河鲤和建鲤,而黏附性高于黄河鲤;水分含量、脂肪含量极显著低于黄河鲤及建鲤(P<0.01),灰分含量、蛋白质含量没有显著差异(P>0.05),Ser、Cys含量以及必需氨基酸(essential amino acids,EAA)含量较高,Thr含量较黄河鲤、建鲤有很大提升。整体上来说,福瑞鲤鱼肉品质在质构性能和营养价值上要优于黄河鲤和建鲤。而相关性分析表明剪切力、硬度、胶黏性、咀嚼性4项指标均与粗蛋白、粗脂肪含量两项指标成显著正相关(P<0.05);黏附性与粗脂肪含量成负相关(P<0.05);从12项指标中提取出3个主成分,硬度、剪切力、粗脂肪、粗蛋白为影响肉质性能的最主要因素。

关键词: 福瑞鲤 黄河鲤 建鲤 质构分析 氨基酸

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魁蚶过氧化氢酶基因克隆及表达分析

水产学报 2016 北大核心 CSCD

摘要:采用RT-PCR和c DNA末端快速扩增技术(rapid amplification of c DNA ends,RACE)克隆出魁蚶过氧化氢酶(Sb CAT)基因c DNA全长序列,该基因全长为2181 bp,包括1431 bp的开放阅读框(open reading frame,ORF),96 bp的5'端非翻译区(UTR)和654 bp的3'-UTR。其中ORF编码477个氨基酸,预测分子量为54 ku,理论等电点为8.03。Sb CAT氨基酸序列与其他所选动物的氨基酸序列具有较高的相似性,其相似度为68%~96%,Sb CAT氨基酸具有CAT基因家族的特征性序列,包括CAT活性位点,1个亚铁血红素结合位点及3个催化位点残基。此外,Sb CAT还具有保守的亚铁血红素结合口袋与还原型辅酶Ⅱ(NADPH)结合位点。采用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测了Sb CAT的组织表达特征。结果显示,Sb CAT m RNA在所检测的6种组织中均有表达,在外套膜中表达量较高,在肝胰腺和红细胞中表达量较低。经鳗弧菌和金黄色葡萄球菌刺激后,鳗弧菌刺激组的外套膜表达量一直较低,其他组织均表现出先上升再下降的趋势。研究表明,Sb CAT可能在魁蚶免疫防御中发挥重要作用。

关键词: 魁蚶 过氧化氢酶 RACE qRT-PCR

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黄颡鱼肌细胞生成素基因cDNA克隆及其在雌雄个体中的差异表达

中国水产科学 2016 北大核心 CSCD

摘要:为了探究黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)肌细胞生成素(Myogenin,MyoG)基因的组成结构、功能特性以及在雌雄个体组织中的表达差异,本研究利用RT-PCR和RACE技术克隆获得黄颡鱼MyoG基因1346 bp全长cDNA序列,其中序列包括63 bp的5′非翻译区、521 bp的3′非翻译区和762 bp的开放阅读框(ORF),ORF编码253个氨基酸。氨基酸序列包含MRFs基因家族的Basic结构域和螺旋–环–螺旋(HLH)结构域,不含信号肽,没有跨膜结构,定位于细胞核内。氨基酸序列与蓝鲇(Ictalurus furcatus)同源性高达94.1%,基于氨基酸序列构建的NJ进化树显示黄颡鱼MyoG基因与同属鲇科鱼类关系最近,表明MyoG基因在物种间比较保守。实时荧光定量PCR检测显示,MyoG基因在雌雄个体心脏、肌肉等8种组织中均有表达,但在肌肉中的表达量显著高于其他组织(P<0.05),且在雄性中的表达量显著高于雌性(P<0.05);Western blot检测MyoG蛋白在雄性肌肉中的表达量高于雌性,推测其可能是造成黄颡鱼雌雄生长差异的因素之一。本研究不仅为黄颡鱼雌雄生长差异和肌肉发育调控提供了研究基础,也为黄颡鱼快速生长新品种(系)选育提供理论参考。

关键词: 黄颡鱼 肌细胞生成素 基因克隆 表达分析 雌雄差异

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GH重组蛋白对达氏鲟生长、血液生化和体组成的影响

水生生物学报 2016 北大核心 CSCD

摘要:为研究生长激素(GH)重组蛋白对达氏鲟生长、代谢及鱼体肝组分的影响,构建了GH成熟肽融合原核表达载体pET32a-AdGH,并将其在宿主菌BL21(DE3)中诱导表达,重组蛋白rAdGH以包涵体的形式存在。设置了4个试验组,分别在鲟鱼商品饲料中添加含量为0(对照组)、10(低处理组)、50(中处理组)和100mg/kg(高处理组)的粉状rAdGH,连续投喂8周。结果表明,低水平rAdGH添加能够显著促进鱼体生长,提高特定生长率,降低饵料系数,提高肝体比和脏体比;进一步的分析表明,低水平rAdGH添加可提高除血糖外所有测定的血液指标数值,反映了机体代谢水平的增强。各浓度rAdGH的添加均能提高鱼体肝和肌肉中蛋白质、水分含量,降低脂肪含量。rAdGH对鱼体生长和代谢的影响可能与其剂量相关,低水平的添加可显著增强鱼体代谢水平,加快肝中蛋白质的沉积与脂肪的消耗,促进鱼体生长;高水平的添加进一步增强其代谢水平,但其促生长的功能下降,部分血液指标异常,肝组分异常,疑似肝损伤。研究探索了鲟鱼重组生长激素的生长调控功能,为重组生长激素在鲟鱼养殖中的应用提供了基础。

关键词: 达氏鲟 原核表达 生长激素重组蛋白 生长性能 血液生化指标 体组分

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同步检测7种鱼类病毒的扩增子拯救多重PCR(Arm-PCR)方法的建立和应用

渔业科学进展 2016 北大核心 CSCD

摘要:淋巴囊肿病毒(LCDV)、肿大细胞病毒属虹彩病毒(Mega)、赤点石斑鱼神经坏死病毒(RGNNV)、传染性造血器官坏死病毒(IHNV)、传染性胰脏坏死病毒(IPNV)、病毒性出血败血症病毒(VHSV)和传染性鲑鱼贫血症病毒(ISAV)是养殖鱼类主要的病毒性病原,危害巨大。为实现这7种病原的高通量、同步检测,本研究在分析这7种病毒基因序列的基础上,设计了9组扩增子拯救多重PCR(Arm-PCR)引物,并对扩增体系中的Taq酶、M~g(2+)、d NTP、Primer Mix浓度及退火温度等参数进行调整和优化,结合基因芯片检测技术,建立了同步检测7种鱼类病毒的Arm-PCR方法。优化后的Arm-PCR方法第一步PCR体系为:Taq酶(2.5 U/μl)1.0μl,10×PCR Buffer(含20 mmol/L的M~g(2+))5μl,d NTP(各2.5 mmol/L)5μl,10×Primer Mix(各2μmol/L)9μl,模板1μl,dd H2O补足至50μl,退火温度为56℃。研究结果显示,该方法可以在1支反应管内对上述7种病毒的9个致病基因同步进行扩增和检测,检测灵敏度分别为10~1copies/μl(RGNNV、VHSV、ISAV-NS、ISAV-MA)、10~2 copies/μl(LCDV、Mega、IHNV、IPNV)和10~3 copies/μl(大菱鲆红体病虹彩病毒,TRBIV)。该方法特异性强,与半滑舌鳎、石斑鱼、大菱鲆和牙鲆基因组DNA不产生交叉反应。本研究建立的可同步检测7种鱼类病毒的Arm-PCR方法具有高通量、高灵敏度、高准确性的优势,能有效提高工作效率,在鱼类病毒的筛查和流行病学调查领域有广泛的应用前景。

关键词: 鱼类病毒 多重检测 高通量 多重PCR

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浙江省近海捕捞经营状况调查研究——以宁波市两个渔村为例

渔业信息与战略 2016

摘要:海洋生态环境的恶化及近海渔业资源的日益衰退给沿海渔民的生存带来了巨大压力。为了解我国东南沿海渔村近海捕捞经营状况,作者对浙江省宁波市下辖的两个渔村进行了抽样调查,主要针对受访者的基本信息、渔船生产经营情况、渔船出资构成情况以及受访者对近海捕捞业未来的预期这四个方面进行调研分析。调查结果显示:92%的受访者只有中小学文化水平;样本渔船中单拖网渔船占65%,双拖网渔船占35%;受访者在2012和2013年渔业经营的亏损率分别为33%和36%;有71%的受访者具有退出近海捕捞的意愿;93.4%的受访者不愿让子女继续从事近海捕捞。本文旨在为制定相关政策法规以引导渔民上岸,缓解近海渔业捕捞压力提供借鉴和参考。

关键词: 近海捕捞 经营状况 渔业经营者

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全氟烷基化合物在长江流域水产品中的分布研究

中国渔业质量与标准 2016

摘要:全氟烷基化合物(PFASs)广泛存在于各种环境及生物体中,基于其环境持久性、生物机体的危害性以及难降解性,引起了人们的广泛关注。本研究考察了长江流域5个省份10个城市27种水产品中23种PFASs的残留水平,对长江流域水产品中PFASs污染情况进行分析和研究,得出长江流域水产品中PFASs的残留现状和规律,为全面了解并控制长江流域水产品PFASs残留提供基础数据。生物基质样品采用2%酸化乙腈提取,C_(18)和碳黑(GCB)净化,HPLC-MS/MS法测定。结合各种水产动物的生活习性、生态环境以及产品包装过程等特点,对不同水产品中PFASs的检出比例、种类及区域的检出含量水平进行比较分析,发现黄鳝(Monopterusalbus)中PFASs的检出比例相对较高,为78.95%;河蟹中PFASs的含量水平最高,为6.29μg/kg。湖北省水产品中的PFASs检出的总含量水平较其他省份高,为7.64μg/kg;长江流域5个省份水产品中全氟辛烷磺酸(perfluorooctane sulfonic acid,PFOS)检出含量水平较高,全氟辛酸(perfluorooctanoic acid,PFOA)的含量水平相对较低。本研究对长江流域水产品中PFASs的含量水平和残留特征进行了比较分析,这对于水产品中PFASs残留的消减与控制,具有一定参考价值。

关键词: 水产品 全氟烷基化合物 长江流域 分布 残留

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0#柴油水溶性成分对黑鲷肝脏、鳃、肌肉组织中抗氧化酶活性的影响

海洋渔业 2016 北大核心 CSCD

摘要:采用室内实验方法,研究了不同浓度(0 mg·L-1、0.015 mg·L-1、0.03 mg·L-1、0.06 mg·L-1)0#柴油水溶性成分(WSF)对黑鲷(Sparus macrocephalus)肝脏、鳃和肌肉谷胱甘肽-S-转移酶(GST)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的影响。结果显示:(1)肝脏、鳃、肌肉和组织中GST活性与0#柴油具有明显的时间-效应和剂量-效应关系,肝脏组织中GST活性较肌肉和鳃组织中的更为灵敏;(2)各组织中SOD活性随时间和剂量的变化整体无明显规律;(3)肝脏组织中CAT活性先诱导后抑制,肌肉中始终被诱导,鳃中始终被抑制。CAT活性变化幅度不如GST明显。实验表明,黑鲷肝脏组织中GST更适合作为0#柴油污染响应的生物标志物,用作早期海洋石油污染的预警和监测的指标之一。

关键词: 0#柴油 黑鲷 肝脏 肌肉 抗氧化酶

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一种基于Ⅱ型鲤疱疹病毒衣壳蛋白72的免疫学检测方法

中国水产科学 2016 北大核心 CSCD

摘要:Ⅱ型鲤疱疹病毒(cyprinid herpesvirus 2,Cy HV-2)是引起养殖异育银鲫(Carassius auratus gibelio)造血器官坏死症的致病病原。在临床筛查中基于病毒核酸的PCR和real time PCR技术已经建立,但是稳定性更强的免疫学诊断技术国内外尚无报道。本研究目的是利用Cy HV-2编码的ORF72基因(Gen Bank登录号:AFJ20502.1)所编码的衣壳蛋白作为捕获抗原,通过识别感染病毒的鱼体中的相应抗体,从而对样本进行临床免疫学检测。首先采用PCR方法从纯化的Cy HV-2基因组中扩增ORF72基因,并把该基因克隆至原核表达载体PGEX-4T-3,并转化到大肠杆菌中诱导表达,诱导表达的产物通过SDS-PAGE进行鉴定,对表达的重组蛋白进行纯化。用已纯化的72重组蛋白对小鼠进行免疫,制得72重组蛋白的抗体。Western blot检测表明所制备的多克隆抗体既能识别原核表达的重组蛋白,也可以识别Cy HV-2病毒粒子上的衣壳蛋白72。在上述基础上建立了基于Western blot技术的Cy HV-2抗体检测技术:用纯化的72重组蛋白作为检测抗原,鲫鱼血清用作一抗,兔抗鲫Ig M多克隆抗体作为二抗,酶标羊抗兔作为三抗鉴定鲫鱼是否存在Cy HV-2特异性抗体。在对急性感染期的临床样本检测中,本方法能在所有样本中检测出ORF72特异性抗体存在,表明72重组蛋白作为相应抗体捕获原可以用于确诊鲫鱼是否感染Cy HV-2。本研究建立的实验室免疫学检测方法为商品化免疫学检测技术的开发奠定了基础,对Cy HV-2的检验检疫具有一定的临床应用价值。

关键词: Ⅱ型鲤疱疹病毒 ORF72 原核表达 多克隆抗体 临床检测 异育银鲫

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