科研产出
咪鲜胺和多菌灵对斑马鱼联合毒性效应
《生态毒理学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要:水生生物经常暴露于多种化合物中,多种农药联合会产生不同的毒性作用.在目前农药管理中,仅要求开展单剂的毒性评价,没有考虑到多种混合物对水生生物的联合毒性.咪鲜胺和多菌灵是农业生产中常混用的2种农药,为评价其联合毒性,以斑马鱼为受试生物,采用静态法和实时荧光定量PCR方法,测定了其单剂及混剂对斑马鱼胚胎的急性毒性和对斑马鱼幼鱼甲状腺轴关键基因的影响.急性毒性试验结果显示:咪鲜胺和多菌灵对斑马鱼胚胎96 h-LC50值分别为8.41 mg·L-1和0.81 mg·L-1,表现为中毒和高毒.二元组合时,在24~96 h暴露时间内,对斑马鱼胚胎的急性毒性均表现为拮抗效应.基因表达结果显示:咪鲜胺抑制斑马鱼幼鱼促甲状腺激素释放激素(CRH)、促甲状腺激素(TSH)、甲状腺激素受体(TRα)、脱碘酶(D1、D2)基因的表达,对甲状腺激素转运蛋白(TTR)基因的表达没有显著影响;多菌灵抑制CRH、TSH、D1和D2基因的表达;暴露于二元组合时,低、中剂量组抑制CRH、TSH、D1和D2基因表达;二元组合与单剂相比,高剂量组促进TSH、D1和D2基因的表达,中剂量组促进TRα基因的表达.综上所述,咪鲜胺和多菌灵联合暴露能够干扰斑马鱼幼鱼早期发育,且与单剂相比,对斑马鱼甲状腺轴上基因干扰效应存在差异.因此,在农药风险评估中,应充分考虑农药联合暴露的效应.


绿色杀虫剂对草地贪夜蛾杀虫活性比较测定
《环境昆虫学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要:为了减缓草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda对化学农药抗性的增加,减少传统化学农药的使用量,提高草地贪夜蛾的防控效果。本研究测定了15种生物源、矿物源和昆虫激素类等绿色杀虫剂对草地贪夜蛾卵和2龄幼虫的室内毒杀效果。结果表明,灭幼脲、虱螨脲、短稳杆菌和苏云金杆菌是替代传统化学农药防控草地贪夜蛾的首选农药,其中尤以低毒、易降解的昆虫激素类农药灭幼脲和活体微生物农药短稳杆菌最佳,在实际生产中有较好的推广应用价值。而植物源农药藜芦碱、鱼藤酮、印楝素、苦参碱、除虫菊素、茶皂素以及矿物源农药矿物油对该虫控制效果相对较差,不建议单独大面积推广使用。


氯化钙对食品致腐荧光假单胞菌生物被膜形成的影响
《食品科学 》 2019 EI 北大核心 CSCD
摘要:研究氯化钙(CaCl_2)对食品腐败株荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)生物被膜形成特征的影响。采用结晶紫法、菌体计数、苯酚-硫酸法、共聚焦扫描显微镜和实时荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测Ca~(2+)对荧光假单胞菌的生物被膜形成、多糖分泌、被膜结构及相关基因表达的影响。结果表明,0.1 mmol/L Ca~(2+)刺激荧光假单胞菌生物被膜,随着浓度增加被膜形成增强,其中1 mmol/L促进最明显,而高于10 mmol/L作用减弱,并且Ca~(2+)不影响浮游细菌生长;同时,0.1 mmol/L和1 mmol/L Ca~(2+)对胞外多糖、薄膜和泳动性均呈现促进效果,而高浓度下呈现抑制;共聚焦扫描显微镜观察荧光假单胞菌对照组、1 mmol/L和20 mmol/L Ca~(2+)处理组的成熟生物被膜厚度分别为20.0、40.0μm和25.0μm,其中添加1 mmol/L Ca~(2+)显著增加PF07被膜厚度、菌体和胞外聚合物分泌量,使被膜结构更致密;实时荧光定量PCR检测显示,1 mmol/L Ca~(2+)刺激菌体黏附素lapA、藻多糖alg、鞭毛flgA基因表达量增加3~4倍,并且Ca~(2+)均显著刺激AHLs合成酶luxI基因的表达,提示Ca~(2+)影响生物被膜与群体感应密切相关。可见,食品介质中CaCl_2通过影响菌体黏附行为、胞外分泌物、基因表达导致荧光假单胞菌生物被膜形成特征和结构的改变,该研究为复杂的食品介质中腐败菌生物被膜形成和黏附提供依据。


四种鳞翅目害虫精氨酸激酶基因的表达谱及基于RNAi的功能分析
《昆虫学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要:[目的]精氨酸激酶(arginine kinase, AK)(EC 2.7.3.3)是昆虫体内重要的磷酸原激酶(能量代谢调节因子),也是唯一能够形成有效ATP的磷酰基供体,起着与脊椎动物中肌酸激酶相同的作用.本研究旨在了解鳞翅目害虫AK基因的表达和功能.[方法]利用qRT-PCR方法测定AK基因在大螟Sesamia inferens、二化螟Chilo suppressalis、甜菜夜蛾Spodoptera exigua和斜纹夜蛾Spodoptera litura这4种鳞翅目害虫不同发育阶段和3龄幼虫不同组织中的表达谱;通过终点法检测了这4种害虫不同发育阶段和幼虫不同组织中的AK酶活性;采用RNAi技术抑制该基因的表达并分析其功能.[结果]AK基因在大螟、二化螟、甜菜夜蛾和斜纹夜蛾这4种鳞翅目昆虫的不同发育阶段和3龄幼虫不同组织中均有表达,说明该基因的表达不具有发育时期和组织特异性.不同发育时期和3龄幼虫不同组织中AK酶活性与基因表达量变化趋势大体一致.注射以AK基因为靶标的dsRNA 6 d后,4种害虫体内AK基因的mRNA表达下降30%~50%,AK酶活性降低30%左右;14 d后幼虫的死亡率达50%左右,显著高于对照组幼虫的死亡率.[结论]AK基因在上述4种鳞翅目害虫中为组成型表达,RNAi抑制AK基因的表达可导致4种害虫的幼虫死亡,研究结果为开发以AK基因为靶标的鳞翅目害虫防治新技术提供了理论依据.
关键词: 鳞翅目 大螟 二化螟 甜菜夜蛾 斜纹夜蛾 AK基因 时空表达谱 酶活性 RNAi


肉桂精油对救心菜贮藏品质的影响
《核农学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要:为了提高救心菜的贮藏品质,本研究以救心菜为试验材料,采用不同浓度的肉桂精油熏蒸处理救心菜,通过分析4℃贮藏条件下救心菜的生理生化指标,探究肉桂精油对救心菜贮藏品质的影响.结果表明,适宜的肉桂精油处理可有效维持救心菜的色泽,有效减缓失重率、黄化率、腐烂速率的上升,延缓其Vc、叶绿素、总酚、总黄酮、齐墩果酸含量的下降.肉桂精油熏蒸处理可抑制救心菜的过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)的活性,延缓救心菜的衰老进程.其中,经6μL·L-1肉桂精油熏蒸处理的救心菜色泽最好,其Vc、叶绿素含量最高;经8μL·L-1肉桂精油熏蒸处理的救心菜腐烂率最低,其总酚、总黄酮、齐墩果酸含量最高,且POD、SOD、CAT活性变化最小.综上表明,适合的肉桂精油浓度可以有效保持救心菜的采后贮藏品质,延长其货架期.该研究结果为减少救心菜采后损失提供了技术支持.


菜用大豆籽粒蔗糖积累及蔗糖磷酸合成酶研究进展
《分子植物育种 》 2019 北大核心 CSCD
摘要:菜用大豆品质主要包括食味品质、外观品质和营养品质,食味品质是目前品质改良的主要研究方向.蔗糖是光合作用的最初产物,是同化产物在植物体从源到库转运的主要形式,也是植物果实中最主要的糖,不仅决定着果实的甜度,而且是其它重要品质成分合成的原料,是影响菜用大豆食味品质的最主要因素.蔗糖磷酸合成酶是植物蔗糖合成的关键酶,在蔗糖积累方面发挥重要作用.为系统地认识蔗糖含量对菜用大豆食味品质的影响以及蔗糖磷酸合成酶在蔗糖积累方面发挥的作用,本综述概括地介绍了菜用大豆品质研究现状,蔗糖在菜用大豆品质形成方面发挥的作用,菜用大豆籽粒蔗糖代谢以及蔗糖磷酸合成酶的研究现状,以期为菜用大豆品质改良提供参考.


振动胁迫下PVA基微孔减振包装对草莓品质的影响
《中国食品学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要:为探讨振动胁迫中减振材料包装对草莓果实减损防伤的效果,研究了市售聚苯乙烯、自主研制的聚乙烯醇缩甲醛(PVFM)和抑菌PVFM 3种减振材料对运输振动草莓贮藏品质的影响.结果表明:与无减振处理组相比,抑菌PVFM组明显降低草莓果实失重率,维持果实硬度,延缓VC和可溶性蛋白含量的下降,促进糖类物质的合成,抑制相对电导率和丙二醛含量的升高,保护细胞膜结构的完整,延缓草莓品质的劣变;而异硫氰酸烯丙酯(AITC)的添加,也促使草莓维持较高的总酚和总黄酮含量.采用适当的减振材料包装对草莓的运输具有较好的保鲜效果,抑菌PVFM材料更加有利于贮藏品质的保持,研究结果为草莓物流运输包装提供了参考.


亚麻基因工程研究进展
《分子植物育种 》 2019 北大核心 CSCD
摘要:亚麻是一年生、双子叶、自花授粉的韧皮纤维植物,可分为纤维用、油用和油纤兼用三种类型,广泛用于纺织、造纸、食品、重金属污染土壤修复等方面,开展亚麻育种研究对生态保护、满足人们天然纤维需求及优质健康亚麻油需求具有重要作用.基因工程手段是将从不同的生物中分离克隆获得的或人工合成的优质基因导入植物基因组中,该方法也被应用于亚麻育种研究.本研究总结了近年来国内外亚麻基因工程的研究进展.主要集中在以下几个方面:(1)亚麻转基因遗传转化体系的建立;(2)关于纤维品质改善的转基因亚麻研究;(3)关于抗除草剂和抗病的转基因亚麻研究;(4)关于种子品质提高的转基因亚麻研究;(5)关于抗重金属的转基因亚麻研究.针对基因工程在亚麻上应用的不足,提出了培育具有优良目标性状的环保型转基因亚麻的建议.
关键词: 亚麻(Linum usitatissimum) 基因工程 韧皮纤维作物


菜用豌豆核心种质构建的关键策略
《浙江大学学报(农业与生命科学版) 》 2019 北大核心 CSCD
摘要:利用已搜集的180份菜用豌豆材料进行核心种质构建策略研究.分别对所有种质材料进行单株荚数、每荚粒数、荚长、荚宽、荚厚、百荚鲜质量、百粒鲜质量及产量等性状进行调查,结果表明,搜集的材料具有丰富的遗传多样性.利用上述数据,采用最小距离逐步取样(minimum distance stepwise sampling,LDSS)法,分别选择4种遗传距离、8种取样比例进行核心种质构建策略研究,并采用极差符合率(coincidence rate of range,CR)和变异系数变化率(variable rate of coefficient of variation,VR)2个参数对构建策略进行评价;同时,利用主成分分析法和聚类分析法对构建的核心种质代表性进行鉴定.结果表明,采用LDSS法构建菜用豌豆核心种质的最佳遗传距离为欧式距离,最佳取样比例为25%.该构建策略将为菜用豌豆核心种质构建与高效利用奠定基础.
关键词: 菜用豌豆 核心种质构建 最小距离逐步取样法 欧式距离


穿孔艾美耳球虫浙江分离株的致病性和免疫原性
《中国兽医学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要:兔球虫病是一种严重威胁我国家兔养殖业的重要传染性寄生虫病,目前,世界公认的兔球虫种类有11种,其中,穿孔艾美耳球虫(Eimeria perforans)在我国兔群的感染率最高,为35.2%;然而,国内尚未有关于其分离株致病性和免疫性的报道.本研究通过单卵囊显微挑选和无球虫兔体内传代技术,从浙江地区分离获得了1株穿孔艾美耳球虫,在此基础上,通过分子生物学技术对其进行了分子鉴定,结果显示,浙江分离株与欧洲分离株在18S rRNA基因序列的同源性在99.2%以上,且在进化树上自成一小亚枝.最后,通过动物试验对其致病性和免疫原性进行了鉴定,致病性试验结果如下:以5*10~2(Ⅰ组),5*10~3(Ⅱ组),5*10~4(Ⅲ组)和5*10~5(Ⅳ组)个孢子化卵囊感染无球虫兔,在感染后4~6 d,各感染组均出现饮水、食料和排粪量明显减少,以及粪便形态干小的临床症状,其中,第Ⅲ组中的2只兔在接种后12 d出现腹泻,并在之后第13天死亡1只,死亡兔剖检十二指肠和空肠有弥散性出血点;在感染后6~12 d,各感染组兔平均体质量数值上略小于不感染对照组,但无显著性差异(P≥0.05);在感染后5~13 d,第Ⅰ~Ⅳ组兔的平均排卵囊总量分别为(3.65*10~7±1.86*10~6)/只、(9.92*10~7±3.60*10~6)/只、(4.89*10~7±4.49*10~6)/只和(3.93*10~7±1.56*10~6)/只,以第Ⅱ组兔的平均排卵囊量最大,排卵囊期持续2周以上,有2个排卵囊高峰,高峰值分别出现在感染后第7和10~11天;免疫原性试验结果如下:第Ⅰ~Ⅴ组兔在感染接种后第14天攻毒,攻毒剂量为1*10~6个孢子化卵囊/只,攻毒后第4~6天,第Ⅲ、Ⅳ组和攻毒对照组(Ⅴ组)出现拉稀症状,其中,第Ⅲ组兔分别在攻毒后第6和7天死亡1只,攻毒后死亡率为50%;攻毒后,除第Ⅲ组外,各组兔平均体质量无显著性差异(P≤0.05);攻毒后第5~10天,第Ⅰ~Ⅴ组兔的平均排卵囊总量分别为(3.88*10~5±2.10*10~5)/只、(8.00*10~5±2.83*10~5)/只、(1.89*10~5±2.25*10~4)/只、(3.36*10~5±7.46*10~4)/只和(1.77*10~6±6.34*10~5)/只,相对于攻毒对照组,第Ⅰ~Ⅳ组兔的卵囊减少排出比率分别为78.0%,54.7%,89.3%和81.0%.以上试验结果表明,穿孔艾美耳球虫浙江分离株为致病性毒株,可导致试验兔拉稀和死亡,但免疫原性不强.

