Taqman探针实时定量PCR检测猪伪狂犬病毒

张雪寒; 何孔旺; 缪文凯; 茅爱华; 俞正玉; 《江苏农业学报 》 2008 北大核心 CSCD

摘要：选取猪伪狂犬病毒(PRV)基因组中gE基因,设计特异性引物和Taqm an探针,利用实时定量PCR来定量检测PRV。利用PCR技术扩增猪伪狂犬病毒gE基因80 bp片段,并克隆到pMD18-T载体上,阳性重组质粒命名为pgE80。pgE80质粒进行10倍系列稀释,作为荧光PCR检测的标准模板,定量拷贝数,并绘制标准曲线。以提取的PRV、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪细小病毒(PPV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸障碍综合症病毒(PRRSV)和传染性胃肠炎病毒(TGEV)的DNA作为模板,进行特异性检测。该实时定量PCR方法,标准曲线斜率为-0.37,R2=0.992,可以检测到20个拷贝数。PRV能被扩增出S型荧光曲线,而其它病毒均未能扩出。用PRV强毒肌肉注射仔猪,定量PCR比普通PCR更能灵敏而特异地检出呼吸道排毒和血液带毒。建立的实时定量PCR方法可用于临床样品快捷、准确、方便地检测。

关键词： 猪伪狂犬病毒 实时定量PCR Taqman探针 定量检测

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市售大米重金属污染状况及健康风险评价

李优琴; 李荣林; 石志琦; 《江苏农业学报 》 2008 北大核心 CSCD

关键词： 大米 重金属污染 风险评价

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农杆菌介导法将fad2基因的ihpRNA表达框转入甘蓝型油菜

陈松; 浦惠明; 张洁夫; 陈锋; 陈新军; 龙卫华; 戚存扣; 《江苏农业学报 》 2008 北大核心 CSCD

摘要：为获得转基因高油酸油菜新种质,以甘蓝型油菜品种宁油12号带柄子叶为转基因受体,通过与含有油酸脱饱和酶基因(fad2)ihpRNA表达载体(pCNFIRnos)的农杆菌LBA4404共培养,将油菜fad2基因的反向重复序列表达框转入宁油12号,获得转基因植株。结果表明:4日龄的带柄子叶在含有2,4-D 1 mg/L的共培养基中预培养48 h后,再进入不定芽诱导培养基中进行培养,能显著提高不定芽的诱导频率;在含20 mg/L卡那霉素的诱导培养基中抗性绿芽的频率达到5.04%;PCR检测卡那霉素抗性苗的基因组DNA,均扩增出NPTII基因和目的基因序列表达框的特定条带。初步证明目的基因序列已经整合到了油菜的基因组中。

关键词： 转基因油菜 农杆菌 油酸脱饱和酶基因 ihpRNA表达框

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微生物发酵技术在畜禽粪便无害化处理中的应用

汪益峰; 周维仁; 《饲料研究 》 2008 北大核心

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低温贮藏对丝瓜花粉活力和结实的影响

袁希汉; 苏小俊; 高军; 谭云峰; 徐海; 《江苏农业科学 》 2008 北大核心

摘要：冷藏处理没有降低有棱丝瓜和普通丝瓜的花粉活力,对种间杂交授粉的结实率和单瓜结籽数也没有趋势性的影响。有棱丝瓜和普通丝瓜种间正反交F1间没有生殖隔离现象,一般来说,以有棱丝瓜为母本的单瓜结籽数略多。种内和种间杂交组合结实率的差异可能与母本植株长势弱、不易坐果有关。特定杂交组合的结实率偏低,可能与柱头和花粉的亲和性有关。种内杂交有棱丝瓜做母本的单瓜结籽数明显比普通丝瓜做母本的少。普通丝瓜的单瓜结籽数在F0代有正向优势;普通丝瓜种内杂种的单瓜结籽数、种子产量有母体效应。

关键词： 有棱丝瓜 普通丝瓜 冷藏花粉 花粉活力 结实率 单瓜结籽数 生殖隔离 母体效应

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喷雾压力、药液流量和工作风速对生防微生物在不同作物上定殖的影响

刘邮洲; 陈志谊; 傅锡敏; 吴萍; 罗楚平; 龚艳; 刘永峰; 聂亚峰; 《江苏农业学报 》 2008 北大核心 CSCD

摘要：研究了施药机具喷雾压力、药液流量和工作风速对几种生防微生物在不同作物叶片上定殖的影响。试验结果表明:担架式机动喷雾机、机动弥雾喷粉机和背负式机动喷雾器对几种生防微生物(枯草芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌、白僵菌和生物除草剂真菌SF-193)的活性均无不利影响。其中担架式机动喷雾机工作压力超过2.5MPa以上有利于枯草芽孢杆菌和苏云金芽孢杆菌菌落的定殖;机动弥雾喷粉机同一风速档、不同流量档的处理中,流量档4档(2.00 L/m)有利于枯草芽孢杆菌和苏云金芽孢杆菌菌落的定殖。枯草芽孢杆菌在水稻叶片上定殖数量与水稻纹枯病的防效呈正相关的关系。风速档的改变对白僵菌菌落定殖和生防真菌SF-193对空心莲子草的防治效果没有影响。

关键词： 工作压力 流量 风速 生防微生物 定殖

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不同品种冰鲜鸭肉加工特性和游离脂肪酸组成的比较分析

王道营; 诸永志; 徐为民; 《安徽农业科学 》 2008 北大核心 CSCD

摘要：[目的]为生产高品质鸭肉提供参考依据。[方法]测定并比较番鸭、高邮鸭、荆江鸭3种鸭肉中的水分、粗脂肪、蛋白质含量、pH值、失水率、剪切力和游离脂肪酸含量。[结果]3种鸭肉的水分含量、脂肪含量和失水率均存在一定差异。不同品种鸭肉的剪切力差异显著(P<0.05)。一般来说,肌内脂肪含量越高,剪切力值越低。鸭肉肌内脂肪中含量最高的游离脂肪酸为油酸,其在番鸭、高邮鸭和荆江鸭的提取脂肪中含量分别为7.65、16.10和12.80 mg/g。棕榈酸、亚油酸、硬脂酸和花生四烯酸含量也较高,而棕榈油酸和亚麻酸的含量较低。肌内脂肪主要是饱和脂肪酸,其含量占总脂肪酸含量的40%~50%。[结论]肉鸭的脂肪酸组成与地方鸡种和肉鹅类似。

关键词： 鸭肉 加工特性 游离脂肪酸

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小鼠极体重组卵母细胞的体外受精与发育

王公金; 刘文华; 谭晓东; 徐小波; 范必勤; 赵伟; 《农业生物技术学报 》 2008 北大核心 CSCD

摘要：分别以昆明系、ICR系、C57BL/6-Tg(CAG-EGFP)C14-Y01-FM131Osb系(即转绿色荧光蛋白基因小鼠,简称荧光标记小鼠)和无标记C57BL/6J系小鼠(Mus musculus)为试验动物,探索其卵母细胞第一极体核重组卵母细胞的生殖功能。超数排卵后采集小鼠卵丘卵母细胞复合体(COCs),利用链霉蛋白酶酶解法分离出第一极体(PbⅠ);以形态学和台盼蓝染色相结合的方法对不同温度保存条件下COCs中PbI进行活力鉴定和分级;采用显微操作术将PbⅠ核供体注射到去核卵母细胞中,进一步观察重组卵母细胞体外受精和体外培养发育能力。结果表明,注射hCG后12～14h回收的PbⅠ活力最佳,4℃条件下保存48h后PbⅠ仍保持活性;117枚昆明系和ICR系小鼠重组卵母细胞经体外受精获得13枚2-细胞胚胎,38枚荧光标记小鼠的卵母细胞中有3枚卵裂成2-细胞胚胎。初步证明小鼠第一极体重组卵母细胞可体外受精和体外早期发育,为发掘和利用家畜母本基因资源提供了参考依据。

关键词： 小鼠 第一极体 重组卵母细胞 体外发育

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羧酸酯酶和谷胱甘肽转移酶在农药安全性评价中的应用初探

刘贤进; 余向阳; 王冬兰; 《江苏农业学报 》 2008 北大核心 CSCD

摘要：采用半静态法,将河虾(Macrobrachium nipponensis)用亚致死浓度的阿维菌素和三唑磷处理,研究羧酸酯酶和谷胱甘肽转移酶在农药实验性评价中的作用。结果显示:随着处理浓度和时间的递增,河虾体内的羧酸酯酶比活力明显降低,而谷胱甘肽转移酶活性变化不明显;0.100 mg/L阿维菌素和0.025 mg/L三唑磷处理96 h后,羧酸酯酶比活力的抑制率分别为79.70%和80.06%,表明这2种农药对河虾体内的羧酸酯酶有很强的抑制作用;以CDNB(1-氯-2,4-二硝基苯)和DCNB(1,2-二氯-4-硝基苯)为底物,阿维菌素处理后谷胱甘肽转移酶的最高抑制率分别为17.14%和39.33%,三唑磷处理后的最高抑制率分别为19.73%和28.33%;羧酸酯酶可作为一个生物标志物,而谷胱甘肽转移酶只有在一定条件下才能作为生物标志物。

关键词： 农药 安全性评价 羧酸酯酶 谷胱甘肽转移酶

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基于多时相多极化差值图的稻田识别研究

杨沈斌; 李秉柏; 申双和; 谭炳香; 何维; 《遥感学报 》 2008 北大核心 CSCD

摘要：提出了一种基于多时相多极化差值图的稻田识别方法,该方法在简化稻田识别算法的同时,仍具有较好的稻田识别精度。以江西省高安地区的早稻识别为例,利用两景ENV ISAT ASAR交叉极化模式数据(VV/HH)计算了同时相多极化差值图和同极化多时相差值图。由于稻田含有水层和水稻的垂直株型等属性特征,稻田在两时相上VV极化和HH极化后向散射差异都很大,且与其他地物具有明显差别,因此利用同时相多极化差值图可以很好地分辨出稻田来;从时间变化看,HH极化雷达波对水稻生长和稻田的变化比对其他地物的变化更敏感,使稻田分布信息在HH极化多时相差值图中反应突出。而VV极化对地物的时相变化不够敏感。因此,建立最优差值图组合,分别采用阈值分类方法和监督分类方法对差值图组合进行分类提取稻田。通过比较分类结果,认为基于统计分析的监督分类方法更好,其稻田识别的精度达到84.92%。文章最后对提出的稻田识别方法及分类结果进行了分析。

关键词： 水稻制图 影像分类 ASAR

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