科研产出
黄颡鱼β-肌动蛋白基因的克隆及表达分析
《江苏农业学报 》 2008 北大核心 CSCD
摘要:β-肌动蛋白广泛存在于真核生物中,在维持细胞结构、细胞运动和细胞分裂等生理活动中发挥着重要作用。本文运用PCR技术首次克隆了黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)的β-肌动蛋白基因,其全长为2124碱基对(bp),由5个外显子和4个内含子组成;cDNA长1128 bp,含有完整的开放阅读框,编码375个氨基酸。黄颡鱼β-肌动蛋白与其它鱼类氨基酸的同源性(Identity)大于98.6%,核苷酸同源性大于87.3%。系统进化分析表明,黄颡鱼β-肌动蛋白在进化上高度保守。RT-PCR结果表明,β-肌动蛋白基因在黄颡鱼的脑、鳃、心脏、肠道、肾、肝、红肌、白肌、卵巢、皮肤、胃、精巢共12种组织中都有表达。
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酶处理工艺对紫心甘薯饮料品质的影响
《江苏农业学报 》 2008 北大核心 CSCD
摘要:紫心甘薯是中国从日本引进的具有较佳保健功能的甘薯品种,有广阔的开发利用价值。研究表明:酶处理工艺可以有效地改善紫心甘薯饮料的品质,添加0.15%高温α-淀粉酶、酶解40 m in,可将甘薯汁中的淀粉充分酶解,能够提高紫心甘薯汁饮料的悬浮稳定性和澄清度;继续添加0.10%的酸性蛋白酶,可以解决紫心甘薯汁贮存过程中的二次沉淀问题,贮存90 d未见浑浊和沉淀;当紫心甘薯汁pH值为4.8、色素含量在0.008~0.012 mg/g时,溶液呈宝石红色,其澄清度和悬浮稳定性均较好;添加10.00%的白砂糖、0.15%的柠檬酸、0.06%甘薯香精、30.00%酶解甘薯汁,可以配制出酸甜可口、色彩亮丽、风味俱佳的紫心甘薯汁饮料。
Taqman探针实时定量PCR检测猪伪狂犬病毒
《江苏农业学报 》 2008 北大核心 CSCD
摘要:选取猪伪狂犬病毒(PRV)基因组中gE基因,设计特异性引物和Taqm an探针,利用实时定量PCR来定量检测PRV。利用PCR技术扩增猪伪狂犬病毒gE基因80 bp片段,并克隆到pMD18-T载体上,阳性重组质粒命名为pgE80。pgE80质粒进行10倍系列稀释,作为荧光PCR检测的标准模板,定量拷贝数,并绘制标准曲线。以提取的PRV、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪细小病毒(PPV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸障碍综合症病毒(PRRSV)和传染性胃肠炎病毒(TGEV)的DNA作为模板,进行特异性检测。该实时定量PCR方法,标准曲线斜率为-0.37,R2=0.992,可以检测到20个拷贝数。PRV能被扩增出S型荧光曲线,而其它病毒均未能扩出。用PRV强毒肌肉注射仔猪,定量PCR比普通PCR更能灵敏而特异地检出呼吸道排毒和血液带毒。建立的实时定量PCR方法可用于临床样品快捷、准确、方便地检测。
关键词: 猪伪狂犬病毒 实时定量PCR Taqman探针 定量检测
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农杆菌介导法将fad2基因的ihpRNA表达框转入甘蓝型油菜
《江苏农业学报 》 2008 北大核心 CSCD
摘要:为获得转基因高油酸油菜新种质,以甘蓝型油菜品种宁油12号带柄子叶为转基因受体,通过与含有油酸脱饱和酶基因(fad2)ihpRNA表达载体(pCNFIRnos)的农杆菌LBA4404共培养,将油菜fad2基因的反向重复序列表达框转入宁油12号,获得转基因植株。结果表明:4日龄的带柄子叶在含有2,4-D 1 mg/L的共培养基中预培养48 h后,再进入不定芽诱导培养基中进行培养,能显著提高不定芽的诱导频率;在含20 mg/L卡那霉素的诱导培养基中抗性绿芽的频率达到5.04%;PCR检测卡那霉素抗性苗的基因组DNA,均扩增出NPTII基因和目的基因序列表达框的特定条带。初步证明目的基因序列已经整合到了油菜的基因组中。
关键词: 转基因油菜 农杆菌 油酸脱饱和酶基因 ihpRNA表达框
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低温贮藏对丝瓜花粉活力和结实的影响
《江苏农业科学 》 2008 北大核心
摘要:冷藏处理没有降低有棱丝瓜和普通丝瓜的花粉活力,对种间杂交授粉的结实率和单瓜结籽数也没有趋势性的影响。有棱丝瓜和普通丝瓜种间正反交F1间没有生殖隔离现象,一般来说,以有棱丝瓜为母本的单瓜结籽数略多。种内和种间杂交组合结实率的差异可能与母本植株长势弱、不易坐果有关。特定杂交组合的结实率偏低,可能与柱头和花粉的亲和性有关。种内杂交有棱丝瓜做母本的单瓜结籽数明显比普通丝瓜做母本的少。普通丝瓜的单瓜结籽数在F0代有正向优势;普通丝瓜种内杂种的单瓜结籽数、种子产量有母体效应。
关键词: 有棱丝瓜 普通丝瓜 冷藏花粉 花粉活力 结实率 单瓜结籽数 生殖隔离 母体效应
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喷雾压力、药液流量和工作风速对生防微生物在不同作物上定殖的影响
《江苏农业学报 》 2008 北大核心 CSCD
摘要:研究了施药机具喷雾压力、药液流量和工作风速对几种生防微生物在不同作物叶片上定殖的影响。试验结果表明:担架式机动喷雾机、机动弥雾喷粉机和背负式机动喷雾器对几种生防微生物(枯草芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌、白僵菌和生物除草剂真菌SF-193)的活性均无不利影响。其中担架式机动喷雾机工作压力超过2.5MPa以上有利于枯草芽孢杆菌和苏云金芽孢杆菌菌落的定殖;机动弥雾喷粉机同一风速档、不同流量档的处理中,流量档4档(2.00 L/m)有利于枯草芽孢杆菌和苏云金芽孢杆菌菌落的定殖。枯草芽孢杆菌在水稻叶片上定殖数量与水稻纹枯病的防效呈正相关的关系。风速档的改变对白僵菌菌落定殖和生防真菌SF-193对空心莲子草的防治效果没有影响。
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