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伪狂犬病毒在BHK-21悬浮细胞中的增殖特性

江苏农业科学 2022 北大核心

摘要:为考察BHK-21悬浮细胞增殖伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)工艺参数及病毒增殖过程中代谢动力学,将PRV接种于BHK-21悬浮细胞,考察接毒时细胞密度、病毒感染复数(MOI)及收毒时间对病毒效价的影响,测定培养过程中葡萄糖(Gluc)、乳酸(Lac)和谷氨酰胺(Gln)浓度,计算病毒增殖过程中各参数代谢速率.结果显示,将MOI为0.01的PRV病毒接种BHK-21悬浮细胞,其病毒滴度在42 h达最高8.5 lgTCID50/mL.代谢参数检测结果表明,BHK-21细胞在接毒36 h后细胞开始出现死亡.PRV在BHK-21悬浮细胞中的增殖特性为伪狂犬病毒的规模化培养及疫苗开发提供了技术基础.

关键词: BHK-21细胞 伪狂犬病毒 悬浮培养 细胞代谢特性

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丛枝菌根真菌对甘薯生物量、根系形态及钾素吸收的影响

江苏农业学报 2022 北大核心 CSCD

摘要:为探究接种丛枝菌根真菌对甘薯钾吸收的影响,以徐薯28为供试植物材料,以摩西斗管囊霉和幼套近明球囊霉为供试丛枝菌根真菌,设置施钾和不施钾2个处理,以不接种丛枝菌根菌根为对照,利用盆栽试验分析甘薯生物量、根系形态、钾和磷的吸收、根际土壤速效钾和有效磷含量.结果表明,2种丛枝菌根真菌均能够与甘薯建立共生关系,且施钾对丛枝菌根真菌的定殖率没有显著影响.在施钾条件下,接种丛枝菌根真菌(尤其是幼套近明球囊霉)能够协调甘薯地上部分和根部生长,降低干物质向叶片和叶柄的分配,有利于干物质向根部的分配,通过优化甘薯根系形态促进甘薯根系干物质的积累,并且促进根部钾的积累.因此,在施钾条件下接种丛枝菌根真菌(尤其是幼套近明球囊霉)是优化甘薯苗期根系形态、促进根系生长的有效手段,有利于后期甘薯根系的生长及膨大,发挥甘薯的增产潜能.

关键词: 甘薯 丛枝菌根真菌 根系形态 钾素吸收

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"双循环"新发展格局下我国甘薯产业链优化路径探析

江苏农业科学 2022 北大核心

摘要:伴随着我国经济发展水平的不断提高,"十四五"时期我国提出要"畅通以国内大循环为主、国际外循环为辅的双循环市场,构建全新的发展格局",这一新概念的提出为提升我国甘薯产业价值链水平提供了全新的发展机遇.对我国甘薯产业链现状进行比较分析可知,目前我国甘薯产业链虽然发展整体向好,但产业链上的加工业仍发展滞缓,整体上面临着研发瓶颈难突破、产业链附加值低、消费市场狭窄、流通效率低下的困境.在新的发展格局下,我国甘薯产业价值链要实现向中高端水平提升,必须立足国内大循环,明确自身定位,补齐短板;加大优质品种研发力度,推广普及优质种苗;积极引进国外先进技术,加强以甘薯为原料的产品深加工链条;利用品牌打造等使产品畅销国内外市场;倡导政府给予更多政策倾斜.既要提高甘薯产业链韧性,保障国内产业链优化升级,也要保障国际供应链的安全稳定.这对于发挥我国甘薯资源优势,打开国内国际市场,融入新发展格局更好地实现甘薯产业链国内外双循环都具有重要意义.

关键词: 双循环新发展格局 甘薯 产业链 优化路径

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9个蚕豆品种生长性状与品质分析及速冻加工品质评价

江苏农业科学 2022 北大核心

摘要:为了解不同蚕豆品种鲜食和加工特性,对9个蚕豆品种的生长性状、外观及营养品质进行分析,并开展速冻加工品质评价。结果表明,不同品种之间的生长性状不同,其中日本大白皮株高最高,通09-110-2出籽率最高,通蚕鲜8号的产量最高。不同品种外观特征有一定差别,通09-110-1的荚长和籽长最长;优3-2的荚宽最宽,鲜籽百粒质量最大,为491.2 g,籽粒色泽最绿。不同品种之间的营养品质差异较大,通09-110-2的水分含量最高,陵西1寸的叶绿素含量最高;各品种支链淀粉含量明显高于其直链淀粉含量,且品种间差异较大,其中日本大白皮的支链淀粉含量最高。速冻后蚕豆叶绿素、可溶性糖、可溶性蛋白及直链淀粉含量均明显下降。主成分与相关性分析结果表明,L*、a*、支链淀粉含量、可溶性糖含量、维生素C含量和叶绿素含量可作为速冻蚕豆籽粒品质评价的核心指标;其中陵西1寸最适合速冻加工,其次为通蚕鲜6号和通蚕鲜7号,通09-110-2、优3-2和通09-110-1不适合速冻加工。该研究结果可为蚕豆的速冻加工提供一定的理论依据。

关键词: 蚕豆 生长性状 外观品质 营养品质 速冻加工

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不同类型桃果实内酯芳香物质构成与重要性评价

中国农业科学 2022 北大核心 CSCD

摘要:[目的]分析不同类型成熟桃果实的内酯芳香物质构成,并评价其对于桃果实芳香的重要性.[方法]以涵盖不同果肉质地、果肉颜色、果实成熟期等的多品种桃果实为试材,采用顶空固相微萃取-气相色谱质谱联用体系检测样品的芳香物质,通过精确的定性和定量分析,明确内酯芳香物质的构成,并结合芳香物质的气味活性值分析评价其重要性.[结果]内酯芳香物质存在于本研究全部桃品种的成熟果实中,样品中共检测到10种内酯芳香物质,包括γ-已内酯、γ-辛内酯、γ-庚内酯、γ-癸内酯、5-羟基-2,4-癸二烯酸-δ-内酯、δ-癸内酯、γ-十一内酯、δ-辛内酯、茉莉内酯、顺式-4-羟基-6-十二烯酸内酯.各内酯物质具有特定的气味属性,主要散发果香(桃/椰子)、甜香、奶油香、焦糖香、花香和草本味等气味.不同品种的桃果实共有的内酯物质是γ-己内酯,较为普遍存在的内酯物质包括γ-癸内酯和δ-癸内酯,部分品种存在特有的内酯物质,如'深州蜜桃'果实中的顺式-4-羟基-6-十二烯酸内酯.果实成熟期时,溶质'白花水蜜''深州蜜桃''橙香''奉化玉露(晚)''肥城红里大桃'等品种中检测到较多种类的内酯芳香物质,硬质'霞脆''秦王''华玉'等品种果实具有较少种类的内酯芳香物质.气味活性值分析表明,由于极低的气味阈值和较高的物质含量,γ-癸内酯存在于大部分品种中,且对于这些品种桃香气的形成具有重要贡献,使溶质'深州蜜桃''橙香''奉化玉露(晚)''白花水蜜'等品种果实均具有较为强烈的典型的桃香气味,溶质'阿初桃'和硬质'华玉'品种的典型桃果芳香较淡,而未检测到该内酯的硬质'秦王''霞脆'品种果实则没有典型的桃果芳香.此外,γ-辛内酯使部分品种(本研究中为'橙香'和'深州蜜桃')桃果实呈现更为强烈的椰果味和非常甜的气味.[结论]内酯是桃果实挥发性芳香物质的一个重要类别,桃果实内酯物质构成丰富,成熟果实至少包含10种内酯芳香物质.内酯物质类别和含量的差异是不同品种尤其是不同果肉质地的桃果实芳香特征的一个重要体现,而不同果肉颜色或成熟期品种的内酯芳香无显著差异.γ-已内酯是品种之间共有的内酯物质,γ-癸内酯和δ-癸内酯是品种之间较为普遍存在的内酯,顺式-4-羟基-6-十二烯酸内酯等是部分品种特有的内酯物质.γ-癸内酯和γ-辛内酯等内酯对于品种的典型桃香气以及独特芳香气味的形成具有重要贡献.

关键词: 芳香物质 内酯 气味活性值 芳香特征 果肉质地

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基于SSR荧光标记的79份桃种质遗传多样性分析

中国农业科学 2022 北大核心 CSCD

摘要:[目的]利用SSR荧光标记毛细管电泳技术对取自国家果树种质南京桃资源圃的79份种质进行基因分型和遗传多样性分析,筛选出多态性高的引物可用于桃品种间鉴定、亲缘关系分析,并用于分子标记辅助选种体系建立.[方法]对母本'中油4号'进行从头测序,以物理距离1 Mb为单位在全基因组范围内开发SSR标记.以79个桃品种为材料进行PCR扩增,扩增产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳检测后筛选目标条带清晰且多态性丰富的标记.对筛选出的标记进行5′端荧光修饰,PCR产物在ABI3730XL测序仪测序,实现对标记的复筛.利用Genemapper 4.0软件对测序结果进行统计,Data Formater 2.1软件将统计得到的bp数据转换成Power Marker v3.25软件所需要的数据格式.对筛选出的引物进行多态性分析,选择多态信息含量(PIC)大于0.45的荧光SSR引物作为79份种质材料的核心引物.以Nei's为参数,利用NTSYSpc 2.1软件中的UPDM聚类方法分析品种间的遗传多样性.利用基于贝叶斯模型的Structure v2.3.4软件解析79份种质的居群遗传结构.[结果]基于79份种质,利用聚丙烯酰胺凝胶电泳对覆盖全基因的SSR标记进行初筛,共筛选出207对多态性良好的引物;利用SSR荧光标记毛细管电泳技术对207对引物进行复筛,最终筛选出26对核心引物,利用其中5对核心引物可将79份品种完全区分开.26对SSR核心引物在79份桃种质中共扩增出174种多态性基因型,每对引物扩增出的基因型为4—13种,平均每对引物扩增出6.69个基因型,每对引物的多态信息含量PIC在0.45以上.基于207对SSR引物在79份种质中扩增出的位点信息,构建了79份种质的遗传关系图谱和居群遗传结构图.207对引物从遗传距离上将79份种质划分为7组,从居群结构上分为2组.79份品种遗传多样性较高,部分品种聚类结果与系谱图相符.[结论]构建了79份材料的聚类分析图和居群遗传结构图,在一定程度上揭示了79份材料的亲缘关系.由于桃复杂的遗传背景,不能依据单一特性对品种间亲缘关系进行判定.本研究筛选出的26对核心引物可用于全基因组范围内连锁性状的鉴定、桃种质资源鉴定、新品种鉴定及保护、分子标记辅助育种体系构建.

关键词: SSR荧光标记 遗传多样性 标记筛选

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山药品种苏蓣8号抗炭疽病基因的转录组测序与表达分析

华北农学报 2022 北大核心 CSCD

摘要:为深入研究炭疽病抗病机制提供候选基因,从分子水平探索炭疽菌侵染对山药炭疽病基因转录水平的影响。苏蓣8号是高感炭疽病品系024经组培诱变所育成的高抗炭疽病山药新品种,为挖掘苏蓣8号炭疽病抗性基因,采用胶孢炭疽菌菌株4-2分别接种苏蓣8号和品系024,以未接种苏蓣8号的叶片为对照,利用转录组测序技术分析抗感材料在接种炭疽菌后不同时间点的差异表达基因。结果表明,抗感材料接种24,48,72,96 h共同差异表达基因个数分别为197,132,187,313个,去除各接种时间点共同差异表达的基因数,共获得711个差异表达基因。GO功能富集显示,差异基因主要与响应生物刺激、防卫反应、细胞壁代谢和氧化还原过程等有关。KEGG富集分析表明,生长素、茉莉酸和乙烯等防御相关的植物激素信号转导途径多个基因表达出现差异,其中5个生长素早期响应基因、茉莉酸和脱落酸合成关键酶基因均上调表达,乙烯响应因子ERF036下调表达,可能负向调控山药炭疽菌的侵染;参与次生代谢产物修饰的多个细胞色素P450基因、泛素连接酶及植物甾醇合成酶、防御素和凝集素基因上调表达;WRKY类、MYB类和TIFY类转录因子正向或负向调控抗病基因的表达,受转录调控的PR蛋白、NBS-LRR抗病基因、受体激酶等大量表达,抗氧化保护酶系统CAT和SOD成员在活性氧信号刺激下表达。此外,与淀粉和蔗糖合成有关酶上调表达,与淀粉分解有关酶下调表达。LAX4、IAA4、IAA21基因表达趋势与转录组测序结果基本一致,且在抗病品种表达量显著高于感病品种,推测生长素信号途径有利于山药对炭疽病的免疫反应。

关键词: 山药 苏蓣8号 炭疽病 转录组 差异表达基因

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薄壳山核桃原花青素合成关键酶基因的克隆与表达分析

南京林业大学学报(自然科学版) 2022 北大核心 CSCD

摘要:【目的】原花青素是广泛存在于植物中一种重要的次级代谢产物,其强抗氧化性增强了植物自身的抗逆能力,同时赋予植物清除人体自由基的保健作用。研究薄壳山核桃种仁中原花青素生物合成途径,对改良薄壳山核桃的种质与品质均具有重要意义。【方法】以薄壳山核桃‘波尼’115和135 d种仁混合样品为材料,通过RT-PCR扩增、克隆和测序后,获得了薄壳山核桃原花青素合成关键酶相关基因CiDFR、CiLAR和CiANR的基因序列,并进行了生物信息学分析和表达水平分析。【结果】CiDFR基因长1 148 bp,包含1 020 bp的开放阅读框(ORF),编码339个氨基酸;CiLAR基因长1 390 bp,包含1 050 bp的ORF,编码349个氨基酸;CiANR基因长度为1 104 bp,包含1 014 bp ORF,编码337个氨基酸。荧光定量PCR检测结果显示,CiDFR和CiANR基因在种仁发育中期(95~105 d)表达量较高,之后快速下降至较低值;CiLAR基因在95 d表达量较高,之后快速降低,在155 d样品中表达量又升至最高点。【结论】CiDFR和CiANR基因表达量与酚类代谢物含量变化相关性较强,而CiLAR基因与之相关性较弱。

关键词: 薄壳山核桃 酚类代谢 基因克隆 生物信息学分析 荧光定量PCR

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中国冬青属物种多样性空间格局

中南林业科技大学学报 2022 北大核心 CSCD

摘要:[目的]中国是冬青属物种的多样性中心之一,探讨冬青属Ilex物种多样性在中国区域尺度上的空间分布格局,为我国冬青属资源保护与合理利用提供理论依据.[方法]以中国冬青属植物物种分布数据为基础,采用地理信息系统技术,以县为空间数据的基本单元,分析并绘制该属和其亚属物种分布图,同时研究了冬青属物种多样性与经纬度的关系.[结果]1)冬青属物种多样性在中国的分布格局表现为整体区域分布广泛,遍及秦岭和淮河以南所有省份.其中,物种丰富度最高的地方在华南地区,尤其是广东和广西境内南岭山脉南侧.从整体区域分布格局来看,冬青属物种多样性热点地区呈现离散分布,但在局地尺度上聚集分布于南岭以及大巴山山脉等山地区域.2)中国冬青属204个物种的分布范围和广度存在差异.3)中国冬青属亚属的多样化格局各有其特点.多核亚属分布最狭窄;冬青亚属分布特征与冬青属极其相似;落叶冬青亚属与冬青亚属相比,分布范围较小且分散,但多样化中心北移且相对聚集.4)冬青属物种多样性在经度、纬度方向上随着因子梯度先增加后减小,均存在最适区间.[结论]我国的冬青属植物资源丰富,但大部分物种分布范围狭小.本研究结果有助于今后中国冬青属资源研究与保护工作的开展.

关键词: 冬青属 地理分布格局 分布中心 物种多样性

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超声和绿原酸联用对杀鲑气单胞菌生物膜的协同杀菌作用

现代食品科技 2022 北大核心

摘要:为了探究超声联合绿原酸处理对杀鲑气单胞菌生物膜的杀菌效果及可能的作用机制,分析了超声(ultrasound,US)、绿原酸(chlorogenic acid,CA,0.5%、1%、2%)以及超声联合绿原酸(US+0.5%CA、US+1%CA、US+2%CA)处理后的杀鲑气单胞菌生物膜.结果表明US+1%CA可在60 min内使得杀鲑气单胞菌生物膜细胞降低8 logCFU/mL,这与2%CA单独处理的杀菌效果一致.胞外多糖含量分析发现US+1%CA能使得生物膜内可溶性多糖与不可溶性多糖含量分别降低到13.01和16.52μg/mL,扫描电镜、激光共聚焦电镜和胞外物质含量分析发现联合处理明显导致生物膜空间结构的瓦解,造成了生物膜内菌体细胞的细胞膜通透性急剧增加,导致胞外核酸和ATP的浓度显著高于对照组(p<0.05).此外,联合处理显著降低了菌体细胞内呼吸链脱氢酶活性(p<0.05).综上可知,US+CA处理能通过协同降低生物膜胞外多糖的含量,破坏菌体细胞的完整性及胞内酶的活性来达到对杀鲑气单胞菌生物膜的控制效果.

关键词: 超声;绿原酸;杀鲑气单胞菌;生物膜;协同作用

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