复合水产养殖环境中气单胞菌耐药性及其同源性分析

黄玉萍; 邓玉婷; 姜兰; 谭爱萍; 吴雅丽; 王伟利; 罗理; 《中国水产科学 》 2014 北大核心 CSCD

摘要：从广东省佛山市4个不同畜禽-鱼复合养殖场采集分离猪/鸭源、鱼源、水源、泥源气单胞菌(Aeromonas)共57株,通过K-B药敏纸片法,测定其对8类24种药物的敏感性;提取基因组DNA,进行肠杆菌基因间重复序列PCR(ERIC-PCR)及脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子分型。57株气单胞菌对氨苄西林、阿莫西林/克拉维酸、利福平具有较高耐药率;不同菌株间存在耐药谱差异。57株气单胞菌通过ERIC-PCR分型,可分为24个基因型;采用PFGE分型可分为46个簇。两种分型方法均发现来源于同一养殖场的菌株存在相同或相似图谱的分离株,并且有相似的耐药谱,提示此为同一克隆株。实验结果表明,ERIC-PCR及PFGE分子分型技术均适用于气单胞菌的相关性分析及其耐药性克隆传播追踪;复合水产养殖环境有可能有利于耐药菌从畜禽向水产养殖环境转移。本研究通过对不同来源气单胞菌进行耐药性分析及溯源追踪,旨在为规范畜禽-鱼复合养殖模式用药及建立健康的水产养殖模式提供参考。

关键词： 气单胞菌 复合养殖 耐药性 PFGE ERIC-PCR 克隆传播

 全文链接 请求原文

养殖沉积环境中气单胞菌属细菌的实时荧光定量PCR检测方法的建立

姜娓娓; 李秋芬; 刘淮德; 李晓龙; 《渔业科学进展 》 2014 北大核心 CSCD

摘要：利用GyrB基因的特异性引物建立沉积环境中气单胞菌属细菌的实时荧光定量PCR检测方法。将已知浓度的气单胞菌菌液加入灭菌的沉积物样品中,作为模拟沉积物样品。通过选择和优化沉积物DNA提取方法、特异性引物、标准曲线模板,建立沉积环境中气单胞菌属细菌准确检验的实时荧光定量PCR方法,同时验证该方法的特异性、灵敏性、重复性。结果表明,采用改进的溶菌酶-SDS温和裂解法提取沉积物DNA,以扩增GyrB基因片段的IAF和IAR为特异性引物,并直接以模拟沉积物样品DNA为标准品构建标准曲线,可以建立适用于定量检测沉积环境中气单胞菌属细菌的实时荧光定量PCR方法。该方法可灵敏、特异、准确地定量检测刺参养殖池塘底泥中气单胞菌属中不同种的细菌,检出效率可达103CFU/g。统计分析显示,变异系数为0.21%-0.80%,均小于5%,表明重复性良好。

关键词： GyrB基因 沉积环境 气单胞菌属 实时荧光定量PCR

 全文链接 请求原文

津鲢与长江鲢遗传多样性分析

阮瑞霞; 李建林; 宣云峰; 陈文华; 王荣泉; 《水产养殖 》 2014

摘要：随机选取津鲢和长江鲢各36尾,用16个微卫星标记进行遗传多样性分析。结果显示:16个微卫星位点在2个群体中共检测到等位基因105个,基因型241种,每个位点等位基因数3～15个,平均6.6个,基因型4～37种,平均15.1种。2个鲢群体平均观察杂合度(Ho)分别为0.5393和0.5392,平均期望杂合度(He)分别为0.5887和0.5762,结果表明该2个鲢群体遗传多样性水平较高。2个鲢群体平均多态信息含量(PIC)分别为0.5602和0.54,固定系数(FIS)表明这2个鲢群体表现为杂合子缺乏(FIS>0)。2个鲢群体之间的遗传距离为0.0566,平均遗传分化系数(Fst)值为0.021,说明仅有2.1%的遗传变异来源于群体间。

关键词： 鲢 群体 微卫星标记 遗传多样性

 全文链接 请求原文

淡水石斑鱼胚胎发育观察

何杰; 孙兴驰; 隋东海; 《长江大学学报(自科版) 》 2014

摘要：通过人工繁殖方法获取淡水石斑鱼(Cichlasoma managuense)受精卵,对其胚胎发育过程进行了观察。结果表明,受精卵形状为椭圆形,短轴(1.19±0.11)mm,长轴(1.51±0.13)mm。在水温(25.7±0.3)℃的环境中,从受精卵开始至早期鱼苗,历时56h,其胚胎发育过程可划分为8个时期:胚盘形成期、卵裂期、囊胚期、原肠胚期、神经胚期、器官形成期、出膜期、卵黄期。并对发育过程中35个阶段的显著特征进行了描述。

关键词： 淡水石斑鱼(Cichlasoma managuense) 胚胎发育 分期特征

 全文链接 请求原文

半滑舌鳎性别特异微卫星标记的SCAR转化及其应用

刘洋; 陈松林; 高峰涛; 孟亮; 胡乔木; 宋文涛; 邵长伟; 吕为群; 《农业生物技术学报 》 2014 北大核心 CSCD

摘要：半滑舌鳎(Cynoglossus semiliaevis)性别控制与全雌育种相关研究需要一种快速、准确的性别特异分子标记。本研究通过对半滑舌鳎共显性性别特异微卫星标记筛选,得到Z、W染色体同源片段相差35bp的位点,对其进行克隆和测序,针对所得测序结果,重新设计引物进行序列特异扩增区间(sequence characterized amplified region,SCAR)转化,增大35 bp差异片段在扩增片段中的所占比例;并摸索得到4%琼脂糖凝胶,150 V,25 min为最适电泳条件,所得SCAR标记可在雌性个体中扩增出169和134 bp两种DNA条带,雄性个体中扩增出169 bp DNA条带,超雌个体中扩增出134 bp DNA条带;将其应用于生产实践中,对半滑舌鳎生理雄性亲鱼576尾进行快速检测,在保证存活的前提下,剔除了亲鱼中的100尾伪雄鱼,有助于提高后代的雌性比例。本研究所得半滑舌鳎性别特异SCAR标记,可用于实验室对半滑舌鳎雌性、雄性和超雌个体遗传性别的准确测定和养殖场简易环境下养殖亲鱼雄鱼中伪雄个体的快速检测。

关键词： 半滑舌鳎 性别特异标记 序列特异扩增区间(SCAR) 快速检测

 全文链接 请求原文

盐酸环丙沙星在导电碳黑糊电极上的伏安行为及其检测应用

刘文文; 张旭志; 郭萌萌; 陈碧鹃; 丁东生; 曲克明; 《化学研究与应用 》 2014 北大核心 CSCD

摘要：本文研究了盐酸环丙沙星(Cipro)在导电碳黑糊电极上的伏安行为,结果表明:B-R缓冲溶液(p H 4.0)中,该药物分子发生2质子、2电子转移的不可逆电化学氧化,过程受吸附控制,电子转移系数α为0.37,表面反应标准速率常数k's为0.95 s-1。实验研究了支持电解质种类、p H值、离子强度、富集电位与时间等对其伏安响应的影响,并据结果对检测条件进行优化,进而建立了Cipro的电化学检测方法。优化条件下,Cipro的氧化峰电流(ipa)与其浓度(C0)在2.5×10-7~6.0×10-5mol·L-1范围内呈良好的线性关系,检测限为9.5×10-8mol·L-1(S/N=3)。将该方法应用于测定淡水渔业水样中痕量Cipro,得到了较满意的结果(平均回收率102.73%)。

关键词： 盐酸环丙沙星 导电碳黑糊电极 伏安法 快速检测 渔业环境监测

 全文链接 请求原文

饲料蛋白水平对斑节对虾生长、血液生化指标及体成分的影响

姜松; 杨其彬; 黄建华; 邱丽华; 江世贵; 李晓兰; 《海洋渔业 》 2014 北大核心 CSCD

摘要：研究了蛋白含量为34%、38%和42%的3种饲料对斑节对虾(Penaeus monodon)血液生化指标和体成分组成的影响。实验结果表明,斑节对虾的特定生长率(S GR)在不同的饲料组中均有显著性差异(P<0.05),特定生长率随着饲料蛋白水平的上升而上升;存活率(S R)在各饲料组中差异显著(P<0.05),在38%蛋白水平饲料组中最高。斑节对虾血液中的谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)两种酶的活性和总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)的含量表现出随着蛋白水平的增加而上升的趋势,且在各饲料组中均有显著性差异(P<0.05);血液中葡萄糖(GLUC)的含量也随着饲料蛋白水平的上升而上升,但上升的趋势不明显;血液中甘油三酯(TG)和胆固醇(CHOL)的含量在34%和38%蛋白水平饲料组中趋于一致,在42%蛋白水平饲料组中TG和CHOL的含量均有所上升,CHOL的上升趋势更为明显。随着饲料蛋白水平的增加,斑节对虾全虾蛋白质含量上升;水分含量下降,但下降趋势不明显(P>0.05);灰分和脂肪的含量没有规律性的变化。

关键词： 蛋白水平 斑节对虾 生化指标 体成分

 全文链接 请求原文

渔业船舶液压货机故障分析及措施

林锡坤; 黄应邦; 杨北胜; 陈余海; 潘灶林; 《中国水运(下半月) 》 2014

摘要：现今,起货机在许多渔业船舶中占有相当重要的地位,而液压起货机又是起货机中工作性能最好,应用最为广泛的,所以研究液压起货机的故障分析并给出预防措施,具有普遍意义和实际意义。本论文重点从液压故障,电气故障,机械故障,操纵故障等方面分析了液压起货机的故障,以使操作人员在工作中及时发现故障并排除故障;并在此基础上提出了预防措施。

关键词： 起货机 液压货机 故障分析 措施

 全文链接 请求原文

新型水处理技术在水产养殖中的应用

刘兴国; 《科学养鱼 》 2014 北大核心

摘要：一、当前应用的水产养殖废水处理技术1.物理化学处理法(1)固-液分离技术:固-液分离技术主要是针对养殖废水中悬浮固体去除的废水处理技术,按照悬浮颗粒物的特性(密度、颗粒的大小),又可分为机械过滤和重力分离两种技术。机械过滤是水产养殖系统中用来进行固-液分离的主要手段,通常可去除粒径60~200微米的颗粒物。常用的机械过滤设备有固定筛、旋转筛、振动筛、砂滤器,其中砂滤器是采用填充一定粒径的介质

 全文链接 请求原文

尼罗罗非鱼MHC IIB基因多态性及其与链球菌病抗性的关系

高风英; 庞纪彩; 卢迈新; 朱华平; 可小丽; 刘志刚; 《中国农学通报 》 2014 北大核心 CSCD

摘要：为了解MHC IIB基因多态性与尼罗罗非鱼链球菌病抗性的相关关系,本研究用2b-snp-sf和2b-snp-sr引物分别从尼罗罗非鱼40尾感病个体和40尾抗病个体的基因组DNA中扩增MHC IIB基因片段,扩增产物长度为775~797 bp。在775~797 bp核苷酸序列中,抗病群体的多态核苷酸位点有265个(33.2%),感病群体中有255个(31.9%)。在该扩增片段编码的101个氨基酸位点中,抗病群体与感病群体分别有32个和33个多态位点。对80个个体的441个阳性克隆测序,发现有7种不同的MHC IIB等位基因主型,编码7个不同的氨基酸序列。大部分等位基因是两个群体共有的。等位基因Orni-DAB*0201和Orni-DAB*0401在抗病群体中出现的频率(15.5%、5.6%)显著高于在感病群体中出现的频率(7.4%、1.8%),而等位基因Orni-DAB*0501和Orni-DAB*0601只出现在抗病群体。抗病群体中70%的个体出现2~4个等位基因,30%的个体出现1个等位基因;感病群体中42.5%的个体出现2~4个等位基因,57.5%的个体只出现1个等位基因。这提示个体中等位基因数量的多少与其对链球菌病的抵抗力有着明显的关系。个体中具有的MHC IIB等位基因数越多、抗病力越强。本研究结果为抗病尼罗罗非鱼选育奠定了基础。

关键词： 尼罗罗非鱼 主要组织相容性复合体 多态性 链球菌病抗性

 全文链接 请求原文