科研产出
对虾肝胰腺细小病毒滚环扩增检测方法的建立
《渔业科学进展 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：根据对虾肝胰腺细小病毒(HPV)保守基因序列,设计特异性的锁式探针及其扩增引物,优化反应条件,建立了肝胰腺细小病毒超分支滚环扩增检测方法。实验中采用一步法连接,探针在Taq DNA连接酶作用下,58℃连接40 min、62℃扩增30 min便可以扩增出明显条带。反应特异性验证实验表明,该体系能够特异性地检测出HPV,而不与供试的其他对虾病原发生交叉反应;灵敏度分析结果显示该方法的检测极限为105 copies/μl,与PCR检测方法相比,一步法连接的滚环扩增的灵敏度低两个数量级。该方法反应过程中温度变化次数少,基本都在等温条件下进行,不需要PCR仪,可发展成为在简便实验条件下使用的简易检测方法。
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2013年罗非鱼产业生产现状及发展趋势分析
《中国渔业经济 》 2014
摘要：论文从罗非鱼苗种生产、成鱼养殖,产品加工和市场贸易四个产业主要环节概述了2013年罗非鱼产业生产现状,总结了罗非鱼产业发展的特点,分析了罗非鱼产业的发展趋势,提出了加强罗非鱼常年繁育技术研究与示范、积极推广生态健康高效的经营方式、提高罗非鱼产品质量,加强质量安全监管和建立自主的销售渠道、大力开拓国内外新市场等建议,以保障罗非鱼产业的可持续发展。
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嗜水气单胞菌诱导的中华鳖SMART cDNA文库构建及相关基因的鉴定
《基因组学与应用生物学 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：以致病性嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)人工感染的中华鳖(Trionyx sinensis)心、肝、脾、肾为材料,应用SMART技术(switching mechanism at 5'end of RNA transcript)构建了嗜水气单胞菌感染组织的cDNA文库。将获得的cDNA片段连接到PGEM-T载体,然后电转化进入大肠杆菌DH5α感受态细胞中,PCR阳性检测结果显示插入片段在0.5~2 kb之间。该库含有4.3×105个重组子,重组效率为92%,本实验分析鉴定了164个≥1000bp的片段,39个序列在中华鳖中首次发现,鉴定的基因包括免疫基因11个;信号转导基因6个:催化类基因15个;转运相关基因3个;结构基因7个;未知基因9个。本实验文库的成功构建,不仅鉴定了中华鳖机体与细菌感染相关的免疫基因,同时为深入展开免疫学、系统发育和病原与机体的互作研究奠定了良好基础。
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柱后衍生高效液相色谱法测定虾中14种磺胺类药物残留量
《色谱 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：建立了虾中14种磺胺类药物残留量的柱后衍生高效液相色谱检测方法。样品在加入内标物磺胺吡啶后用乙酸乙酯提取,提取液浓缩后用4 mL乙酸乙酯溶解残余物,用盐酸溶液反萃取,正己烷去脂,盐酸溶液经滤膜过滤后,加入乙腈、甲醇和3.5 mol/L乙酸钠溶液(体积比为5∶5∶20)的混合溶液混匀后,经高效液相色谱分离,用荧光胺衍生试剂进行柱后衍生,荧光检测器检测。采用基质标样添加法绘制标准曲线,内标法定量。对柱后衍生系统参数进行了优化,确定了荧光胺溶液的浓度、流速和反应温度分别为0.2 g/L、0.15 mL/min和50℃。14种磺胺类药物在5~200μg/L范围内具有良好的线性。磺胺类药物的定量限(LOQ,S/N=10)为1.0~5.0μg/kg。在1.0~100.0μg/kg添加水平内,磺胺类药物的平均回收率为77.8%~103.6%,相对标准偏差(RSD)为2.9%~9.1%(n=6)。实验结果表明该方法灵敏、准确,重复性好,适用于虾中磺胺类药物的残留检测。
关键词： 高效液相色谱 柱后衍生 荧光检测 磺胺类药物 虾 荧光胺 残留
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基于细菌展示技术的高通量抗原表位筛选方法的建立
《中国免疫学杂志 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：目的:本研究旨在利用细菌表面展示技术结合流式细胞术建立一种快速直观的抗原表位的新方法。方法:本研究以传染性法氏囊病毒结构蛋白VP2作为目标蛋白,对该方法的可行性进行检测。将VP2基因分为连续不重叠的5个基因片段(V1~V5)。将各段基因分别克隆至细菌展示载体pAPEx中,转化大肠杆菌DH5α,利用IPTG诱导使蛋白片段锚定表达于大肠杆菌细胞间质侧的内膜上,利用溶菌酶破除细菌外膜(原生质球制备),使蛋白片段暴露于原生质球表面。将该原生质球先后与传染性法氏囊病毒多克隆抗体和FITC标记的兔抗鸡抗体进行孵育,利用流式细胞仪(Flow cytometer,FC)检测原生质球的荧光信号强度。结果:FC结果显示,除V2片段外其余片段均有很强的荧光信号,其荧光强度为V3最强,V1、V4、V5其次。该结果说明V1、V3、V4、V5段存在抗原表位,V2段中无表位。为验证FC结果,本研究利用传统方法对各基因片段进行表达、纯化及Western blot鉴定,结果显示V3与多抗的结合能力最强,V2段无阳性反应,与FC结果相符。此外,本研究利用抗原表位分析软件对各蛋白片段潜在抗原表位进行预测,其结果与FC结果相一致。结论:本研究利用FC对抗原表位筛选过程进行实时监测,通过荧光信号强弱即可判断抗原表位是否存在及强弱,与传统抗原表位筛选方法相比,节省了时间提高了效率。利用该方法可以快速地筛选出优势表位,对于流行病病原的基础研究及疫苗的研制具有重要意义。
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由东海、黄海沉积物中有机碳含量及稳定同位素组成重建200a以来初级生产力历史记录
《海洋学报(中文版) 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：从20世纪80年代以来古生产力的重建研究一直是国内外海洋生态学研究的热点,但已有的大多数研究是在深海区;而陆架区的特点是来自陆源物质的影响往往比较明显,因此,研究难度远较深海区大。利用现代沉积物中的有机碳稳定同位素组成来估算海源碳的含量,在此基础上,结合调查区域表层沉积物中的几个初级生产力的代表性指标(浮游植物总量、叶绿素a浓度以及硅藻含量)的调查资料,寻求岩心中海源碳与古生产力指标的相关关系,再由南黄海冷涡沉积区3个典型柱状沉积物中海源碳重建了200a以来高分辨率的古生产力记录,这对陆架海生态环境演变规律的研究有重要意义。对重建所得到的南黄海近代初级生产演化因素的初步探讨表明,近200a来初级生产力波动升高与海水表层温度的升高趋势是一致的,但其最主要的控制因素还是营养盐的供应,其中陆源营养物质和污染物质的影响起到了重要的作用。
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影响宰后鱼肉能量代谢和质构的酶及其活性测定方法研究进展
《食品科学 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：宰后鱼肉在低温贮藏过程中会发生一系列物理、化学和微生物方面的变化。研究发现,宰后鱼肉能量代谢和质构变化与肌肉中的多种内源性水解酶相关。本文综述了4种肌肉酶,即与能量代谢相关的三磷酸腺苷酶(adenosine triphosphatase,ATPase)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)和与质构相关的钙激活蛋白酶、溶酶体组织蛋白酶的结构特点及其分离纯化和活性测定,为建立宰后鱼肉能量代谢和品质分析的酶学方法提供参考。
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中国渔政管理指挥系统信息化绩效评价——基于AHP层次分析法和模糊综合评价法
《中国农学通报 》 2014 CSCD
摘要：以中国渔政管理指挥系统作为评价对象,将该系统的信息化建设的长远目标和近期目标、内在组织流程和外部影响因素等诸多方面结合在一起,基于AHP层次分析法和模糊综合评价法构建中国渔政管理指挥系统管理信息化绩效评价模型和多层次、多维度的评价指标体系,实现对中国渔政管理指挥系统管理信息化绩效的客观评价。通过对管理信息化绩效评价的研究,将为渔业管理部门提供系统实用的信息化评价方法和工具,帮助渔业管理部门明确在信息化需求和实施绩效方面的优势和薄弱环节,便于管理决策层及时掌握当前的信息化实施状态。
关键词： 中国渔政管理指挥系统 AHP层次分析法 模糊综合评价法 信息化绩效评价
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光周期和光照强度对克氏双锯鱼仔鱼存活、生长和发育的影响
《琼州学院学报 》 2014
摘要：采用实验生态学的方法,研究了光周期和光照强度对克氏双锯鱼(Amphiprion clarkii)仔鱼存活、生长和发育的影响.结果表明,除了全黑实验组外,光周期对克氏双锯鱼仔鱼成活率无显著影响(P>0.05),但光照强度对仔鱼成活率具有重要影响,过强或过弱的光照都不利于仔鱼成活,其中光照强度在100-1000 Lx时成活率较高(47.7-56.0%).光周期和光照强度对克氏双锯鱼仔鱼发育变态均有重要影响.仔鱼发育速率随光周期延长而加快,当光周期为16L:8D时达最大值(0.081±0.002);光照强度在500Lx以下时,随着光照强度的增加,仔鱼发育速率加快,而光照强度达2000 Lx时发育速率显著下降(P<0.05).仔鱼生长速率也随光周期延长而加快;仔鱼在相对较弱的光照强度(100-1000 Lx)获得较高的日生长率(全长),而光照强度太弱(<100 Lx)或者太强(>1000 Lx)均对其生长有较强的负作用.
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