中华绒螯蟹EsPrx4基因的克隆及抗菌功能分析

梁猛; 王美垚; 李建林; 颜逢缘; 周军; 唐永凯; 《农业生物技术学报 》 2023 北大核心 CSCD

摘要：近年来，养殖水环境恶化和养殖密度的提高，病害的发生和非生物的胁迫应激，严重影响着中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis）的生长和发育。过氧化物还原酶（peroxiredoxin, Prx）在氧化应激应答过程中发挥重要作用。Prx4为Prx家族的重要成员，为了探讨Prx4在中华绒螯蟹抗菌免疫应答中的调控功能，本研究应用同源克隆技术从中华绒螯蟹的肝胰腺中克隆出EsPrx4基因（GenBank No. ON685195）。序列分析表明，EsPrx4的编码区为738 bp，共编码245个氨基酸。理化性质分析表明，EsPrx4蛋白的分子量为27.31 kD，理论等电点为5.55，总平均亲水性为-0.181，表明EsPrx4蛋白为亲水性蛋白。系统进化分析表明，中华绒螯蟹EsPrx4与拟穴青蟹（Scylla paramamosain）、斑节对虾（Penaeus monodon）和南美白对虾（Litopenaeus vannamei）等虾蟹类的Prx4基因具有高度同源性，表明虾蟹中Prx4具有较高的保守性。qPCR结果显示，EsPrx4在中华绒螯蟹体内广泛表达，在肝胰腺中表达量最高，在肠中表达量最低。在鳗弧菌（Listonella anguillarum）刺激下，EsPrx4迅速应答，在24 h表达量达到最高，72 h时恢复至正常水平，表明EsPrx4参与了鳗弧菌刺激引起的反应，在中华绒螯蟹免疫应答中发挥重要作用。本研究为中华绒螯蟹先天免疫和Prx基因家族的深入研究提供理论支持。

关键词： 中华绒螯蟹 过氧化物还原酶（Prx） 克隆 抗菌 基因表达

 全文链接 请求原文

山东缢蛏人工繁育试验及高盐对幼虫生长的影响

崔玉龙; 姜珊; 吴彪; 曹伟; 于贞贞; 陈聪聪; 赵磊; 《安徽农业科学 》 2023

摘要：研究了山东地区缢蛏人工繁育过程及盐度对幼虫生长的影响。结果发现，山东地区能够顺利培育缢蛏苗种，其受精卵在23℃条件下发育24 h便可进入D形幼虫阶段，浮游期约为8 d,每天生长约15μm,变态后生长速度稳步加快；将幼虫在14、21、28盐度梯度下培育发现，随着盐度的升高，其壳长生长速率显著下降（P＜0.05）。该研究结果可为山东地区开展缢蛏人工繁育提供参考。

关键词： 缢蛏 人工繁育 盐度 幼虫 生长

 全文链接 请求原文

乳酸链球菌素对高水分烤虾贮藏中品质的影响

杨絮; 鲁淑彦; 郭全友; 《食品工业科技 》 2023 北大核心 CSCD

摘要：为研究乳酸链球菌素(Nisin)对高水分烤虾常温下贮藏性的影响,在烤虾样品中分别添加20、60和100 mg/kg的Nisin,以感官结合菌落总数、蜡样芽孢杆菌数、挥发性盐基氮、pH等指标对样品品质进行评价.结果表明,烤虾的感官评分在常温贮藏过程中逐渐下降,菌落总数、蜡样芽孢杆菌数、挥发性盐基氮与pH则呈增长趋势.随着Nisin添加量的增加,菌落总数、蜡样芽孢杆菌数、挥发性盐基氮的增长趋慢.第6 d时,未加Nisin的对照组样品菌落总数达到行业标准《调味烤虾》中规定的限值(3×104 CFU/g),而添加20、60、100 mg/kg Nisin的样品,菌落总数达到规定限值的时间分别被延长至8、12和14 d.本研究表明Nisin对高水分烤虾中蜡样芽孢杆菌等腐败微生物生长有明显的抑制作用,能有效延长产品的货架期.

关键词： 烤虾 乳酸链球菌素 品质变化 蜡样芽孢杆菌 抑菌作用

 全文链接 请求原文

发酵南极磷虾粉对锦鲤生长性能、血清生化指标、肠道结构及菌群的影响

付豪; 梁艺馨; 牟希东; 刘超; 杨叶欣; 刘奕; 宋红梅; 《广东海洋大学学报 》 2023 CSCD

摘要：【目的】为进一步挖掘南极磷虾（Euphausia superba）粉作为水产饲料优质蛋白源的利用价值，探讨发酵南极磷虾粉对锦鲤（Cyprinus carpio）生长性能、血清生化指标、肠道结构及菌群的影响。【方法】以初体质量（4.92±0.22）g的450尾锦鲤为研究对象，将其随机分为5个组，每组设置3个重复，每个重复30尾鱼。其中对照组添加200 g/kg未发酵的脱脂南极磷虾粉，实验组添加200 g/kg由粪肠球菌（Enterococcus faecalis）、植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）、丁酸梭菌（Clostridium butyricum）和其三者复合菌（质量比1:1:1）发酵的脱脂南极磷虾粉，分别命名为A（对照组）、B、C、D和E组。投喂共计70 d，然后测定锦鲤的生长性能、血清生化指标、肠道结构及肠道菌群。【结果】1)实验组锦鲤的末体质量、特定生长率和增重率均显著高于对照组（P ＜0.05），其中E组的生长性能显著高于其余各实验组（P ＜0.05）。2)实验组血清超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、碱性磷酸酶（AKP）、酸性磷酸酶（ACP）活性显著提高（P ＜0.05）。3)肠道组织学发现，各实验组锦鲤肠道肌层厚度和绒毛高度均于对照组，并且各组肠道健康状况较为一致，未发现明显损伤。4)肠道菌群研究结果显示，实验组Chao1指数、香农指数（Shannon）和辛普森指数（Simpson）均有不同程度的提高。在门水平上，各组共有的优势菌群有梭杆菌门（Fusobacteria）、拟杆菌门（Bacteroidetes）、变形菌门（Proteobacteria）、软壁菌门（Tenericutes）、厚壁菌门（Firmicutes）和放线菌门（Actinobacteria）。在属水平上，优势菌群有鲸杆菌属（Cetobacterium）、拟杆菌属（Bacteroides）、气单胞菌属（Aeromonas）。实验组锦鲤肠道内有益菌分布比例（鲸杆菌属和拟杆菌属）有所提高，有利于肠道菌群的稳定和肠道健康。【结论】在脱脂南极磷虾粉添加水平为200 g/kg的锦鲤饲料中，使用复合菌[m（粪肠球菌）:m（植物乳杆菌）:m（丁酸梭菌）=1:1:1]对磷虾粉进行发酵，更有利于锦鲤的生长。

关键词： 发酵南极磷虾粉 锦鲤 生长性能 血清生化指标 肠道形态 肠道菌群

 全文链接 请求原文

半滑舌鳎Cs-UBE2D4基因的克隆、表达模式及启动子活性

程鹏; 陈张帆; 徐文腾; 王娜; 杨倩; 巩志宏; 崔忠凯; 胡元日; 陈松林; 《水产学报 》 2023 北大核心 CSCD

摘要：泛素-蛋白酶体系统作为重要的蛋白质修饰途径,参与多个生物学过程,其中泛素结合酶E2作为关键酶可以决定泛素化对靶蛋白的影响.为了探究泛素结合酶E2在半滑舌鳎雌性性腺发育中的作用,本研究克隆了半滑舌鳎Cs-UBE2D4基因的开放阅读框ORF,检测了该基因在不同组织和不同发育阶段性腺中的表达模式;构建了其启动子报告基因载体(pGL3-Cs-UBE2D4)并进行了启动子活性分析.Cs-UBE2D4开放阅读框为360 bp,编码119个氨基酸,含有保守的泛素结合酶E2结构域.荧光定量PCR结果显示,Cs-UBE2D4在雌鱼的各组织中广泛表达,其中在卵巢和肝脏中表达量较高,而在雄鱼中几乎检测不到表达;在卵巢各发育阶段中,该基因的表达量从90日龄开始上调,6月龄达到峰值,之后开始下调,在1.5龄时表达量最低,在3龄时表达量有所回升,其中6月龄表达量为90日龄表达量的1.97倍.双荧光素酶活性检测结果显示,Cs-UBE2D4启动子具有较强的转录活性.本实验将为进一步开展Cs-UBE2D4基因对半滑舌鳎卵巢发育和性别调控相关机制的研究提供理论依据.

关键词： 半滑舌鳎 泛素-蛋白酶体系统 卵巢发育 UBE2D4基因

 全文链接 请求原文

几种营养源的附加对圆口铜鱼(Coreius guichenoti)亲鱼生长与性腺发育的影响

吴兴兵; 杨德国; 杨少荣; 朱永久; 胡文静; 朱挺兵; 李学梅; 孟子豪; 何勇凤; 《淡水渔业 》 2023 北大核心 CSCD

摘要：通过在基础日粮中添加卵磷脂、维生素E、鱼油或附加动物饵料(黄粉虫、中华圆田螺肉)等营养源,研究了不同营养源或其组合对圆口铜鱼(Coreius guichenoti)亲鱼生长与性腺发育的影响.实验分A、B、C三组进行:A组添加鱼油、卵磷脂、黄粉虫,设置4个实验组(A1、A2、A3、A4);B组添加维生素E,设置2个实验组(B1、B2);C组添加卵磷脂、维生素E和螺肉,设置2个实验组(C1、C2);另对应设置3个对照组(A0、B0、C0,仅投喂基础日粮).结果显示:经过数月的养殖(A、B组300 d,C组240 d),各试验组亲鱼生长总体优于对照组,但差异不显著;雄鱼性腺均能发育成熟,成熟率达到100%;而雌鱼性腺发育则存在较大差异.在基础日粮中单独添加2%卵磷脂组(A2),雌鱼成熟率达到16.13%;同时添加2%卵磷脂、5%鱼油、25%黄粉虫组(A4)雌鱼成熟率19.13%,均高于对照组(A0)的8%.添加0.1%维生素E组(B1)、0.2%维生素E组(B2)的雌鱼成熟率分别为16.22%、21.21%,均高于对照组(B0)的6%.添加0.2% 维生素E和2% 卵磷脂组(C1),雌鱼成熟率为66.67%,高于对照组(C0)的30.02%.添加0.2%维生素E和2%卵磷脂同时投喂25%螺肉组(C2),亲鱼成熟率为55.01%,显著高于对照组(C0),但低于未添加螺肉组(C1).结果表明:在基础日粮中单独或组合添加卵磷脂与维生素E投喂圆口铜鱼亲鱼可以显著提高雌鱼成熟率.

关键词： 圆口铜鱼(Coreius guichenoti) 生长 亲鱼培育 性腺发育 卵磷脂 维生素E 鱼油 黄粉虫(Tenebriomolitor) 螺肉

 全文链接 请求原文

瓦氏雅罗鱼鳃细胞系的建立及其耐碱生长特性初探

徐悦; 梁利群; 孙博; 常玉梅; 《上海海洋大学学报 》 2023 北大核心 CSCD

摘要：为探究碱水环境中自然优势种瓦氏雅罗鱼（Leuciscus waleckii）的耐碱离子调节机制，采用胰蛋白酶消化法对其鳃细胞（Gill cells of Leuciscus waleckii, LWG）进行体外培养，确定该类原代和传代细胞培养的适宜条件并进行耐受实验，用以对瓦氏雅罗鱼在碱生境中的生长特性进行论证。结果表明：瓦氏雅罗鱼原代鳃细胞培养在15℃、含有10%胎牛血清（Fetal bovine serum, FBS）的DMEM培养基（Dulbecco’s modified eagle medium）中可获得稳定、良好的培养效果；36～72 h即可传代，稳定传代后的细胞命名为LWG细胞。传代培养过程中，36 h时LWG细胞生长代谢旺盛可用于后续实验。碱水生境中，为缓解碱离子对鱼体造成的损伤，鳃细胞将启动渗透压胁迫应答机制。对LWG细胞进行碱胁迫实验并检测其细胞活性和功能后发现：LWG细胞在25～50 mmol/L NaHCO₃浓度下耐受3 h时，增殖率约60%并初现细胞凋亡。由此推断，在25～50 mmol/L的碳酸盐碱度胁迫下，LWG细胞具有强渗透压的碱度耐受性并促使细胞发生凋亡现象。对LWG细胞原代培养条件的摸索，为探索瓦氏雅罗鱼碱胁迫下渗透压应激响应机制和相关基因功能的验证提供相对稳定的实验材料。

关键词： 瓦氏雅罗鱼 鳃细胞 原代培养 耐碱 渗透压胁迫响应机制

 全文链接 请求原文

典型水产抗生素基准值推导及生态风险评价

李忠华; 曹国庆; 踪艺纯; 王新池; 裘丽萍; 范立民; 陈曦; 孟顺龙; 宋超; 《环境科学与技术 》 2023 北大核心 CSCD

摘要：抗生素在水产行业被广泛使用,恩诺沙星、氟苯尼考、磺胺甲恶唑作为氟喹诺酮、氯霉素、磺胺类3种典型使用抗生素种类,其在水产养殖中安全使用基准值及自然水域生态风险一直不明确.该研究利用物种敏感度分布法(SSD)来确定该典型抗生素对淡水水产养殖生物基准值,使用SSD正向法与风险熵值评价自然河域3种抗生素的生态风险,结果显示:恩诺沙星、氟苯尼考、磺胺甲恶唑安全基准值为58、267、42 μg/L;潜在影响比例值与风险熵值均得出自然水域3种抗生素无生态风险.研究为抗生素在水产行业中的科学使用以及系统评价水域抗生素生态风险提供科学依据.

关键词： 恩诺沙星 氟苯尼考 磺胺甲恶唑 物种敏感度分布法 生态风险

 全文链接 请求原文

我国水产品品牌评价指标体系构建研究

袁媛; 杨振昊; 赵蕾; 《中国水产 》 2023

 全文链接 请求原文

长江下游干流虾类群落多样性时空特征

赵星; 王银平; 刘思磊; 李佩杰; 刘凯; 《生态学杂志 》 2023 北大核心 CSCD

摘要：为了解长江下游干流虾类群落多样性的时空特征，于2020年9月—2021年8月开展周年季节调查。本调查共采集虾类10种，隶属于3科6属，数量及重量分别为34922尾、62.57 kg,其中沼虾属种类最多为5种，其他5属种类数均为1种，采集到罗氏沼虾和克氏原螯虾2种外来种。长江下游干流虾类群落呈现明显的时空特征，安庆江段采集种类数为10种，数量及重量分别为17815尾、32.55 kg,均显著高于当涂、镇江、常熟江段（P＜0.05）,不同江段间丰富度指数（D）差异不显著（P＞0.05）,但多样性（H）和均匀度（E）指数存在显著差异（P＜0.05）;夏季采集种类数为9种，数量及重量分别为15748尾、26.23 kg,均显著高于春季、秋季和冬季（P＜0.05）,春季均匀度指数（E）显著高于秋季（P＜0.05）,但不同季节间多样性（H）和丰富度（D）指数无显著差异（P＞0.05）;聚类分析表明，在空间和时间上，相似性最低的虾类群落分别位于常熟江段和冬季；安庆、镇江江段虾类群落丰度/生物量曲线发生交叉，表明受到的扰动程度较高，当涂和常熟江段虾类群落受到扰动程度则较轻。长江下游干流虾类群落多样性水平总体偏低，群落受到一定程度的扰动，虾类群落的动态变化及保护措施应加以关注。

关键词： 长江下游 虾类 多样性 群落结构 时空特征

 全文链接 请求原文