科研产出
利用杆状病毒表达系统表达PRV/gE蛋白及间接免疫荧光抗体(IDF)检测方法的建立
《中国兽医学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：为了建立高效灵敏的伪狂犬病病毒(PRV) gE蛋白的间接免疫荧光抗体诊断方法,本研究将PRV/HN/SMX/2012毒株gE蛋白的自身信号肽及胞外域片段克隆到pFastBacHT B载体上,构建重组质粒pFastBacHTB-gE,并转化至大肠杆菌DH10Bac感受态细胞中,经过3次蓝白斑筛选获得含有gE基因的重组杆粒rBacmid-gE.随后,将该杆粒转染至sf9昆虫细胞中,获得重组杆状病毒rAcMNPV-gE.经Western blot和间接免疫荧光实验(IFA)进行鉴定分析,发现重组gE蛋白在sf9细胞中表达.利用该sf9细胞建立检测血清中gE抗体的间接免疫荧光抗体(IDF)方法,通过反应条件的优化发现,将血清和羊抗猪FITC-IgG分别进行1∶40和1∶2 000稀释时所建立的方法能针对血清中gE抗体产生较强的特异性荧光;通过与商业化的ELISA检测gI/gE试剂盒(IDEXX)比较,所建立的检测方法与商业化试剂盒的总符合率为93.18%(164/176),阳性结果符合率93.75%(120/128),阴性结果符合率91.67%(44/48),2种方法存在很强的一致性(Kappa=0.832,CI=95%);-20℃条件下保存2个月的稳定性和重复性良好.
关键词： 伪狂犬病病毒(PRV) gE基因 杆状病毒Bac to Bac表达系统 间接免疫荧光抗体法(IDF)
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恩施地区葛根花粉活力测定研究
《时珍国医国药 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：目的 探究恩施地区葛根花粉活力情况。方法 采用蔗糖、硼酸和氯化钙基本培养基法测定葛花活力。结果 低温储藏条件下有利于葛根花粉活力的延长。随着蔗糖浓度的升高,葛根花粉萌发率也随之升高,花粉管生长一致性由低变高,然而受硼酸浓度增大的影响,葛根花粉萌发率先增加后减少。当硼酸浓度大于0.1%时,葛根花粉萌发率明显降低;在蔗糖和硼酸浓度一定的条件下,随着氯化钙浓度的升高,葛根花粉萌发率先升高后降低。在自然光和黑暗条件下,葛根花粉萌发率和花粉管生长一致性无明显差别。结论 开展葛花活力测定研究有利于促进葛根资源的开发利用。
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长江中下游地区小麦品种籽粒和面条品质分析
《中国农业科学 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：【目的】分析长江中下游麦区江苏省、安徽省和湖北省等3个省份间小麦品种的品质性状差异,选出重要品质性状指标,以及对面条等加工品质产生重要影响的因素,为长江中下游地区小麦品种品质评价、优质专用小麦品种选育和品质区划等提供理论依据。【方法】在对各品质性状进行方差分析的基础上,对种植于3个省份6个试点13个小麦品种的25个品质性状进行主成分分析,筛选和评价该地区小麦品种重要品质性状;采用正交偏最小二乘法判别分析区分省份间品质性状的差异;对影响面条品质的因素作通径分析。【结果】供试材料所有品质性状在地点、品种、品种×地点间差异均达到极显著水平;主成分分析将所有品质性状分为淀粉糊化指数、面粉吸水指数、粉质仪指数、蛋白质指数、面粉色泽指数、麦谷蛋白指数、淀粉崩解值指数7个主成分,其累计贡献值达81.250%,涵盖绝大多数的品质性状;对总体的品质评价起第一主导作用的是淀粉糊化指数,其次是面粉吸水指数和粉质仪指数;正交偏最小二乘法判别分析结果表明,该麦区3个省份间品质性状差异表现在反弹值、最终黏度、低谷黏度和峰值黏度等淀粉糊化特性上;通径分析结果显示碳酸钠溶剂保持力对面条感官评价的直接正向效应最大,而淀粉糊化的崩解值和面筋表现指数对面条感官评价的负向作用较大。【结论】长江中下游地区的小麦品质在不同品种间和不同种植区间的品质性状存在着极显著差异;淀粉糊化特性指数等品质性状表现易受环境的影响,且是影响该区总体品质评价的第一主导因子;江苏省、安徽省和湖北省等3个省份间小麦品种在反弹值、最终黏度、低谷黏度和峰值黏度等淀粉糊化特性的差异最大,在选育该区中弱筋小麦品种和评价其品质时,应加强对低谷黏度、最终黏度、峰值黏度等淀粉糊特性的重视;影响面条品质(感官评价)的主要因素是破损淀粉率,破损淀粉率高的面粉,适合制作优质面条。
关键词： 小麦 品质 主成分分析 正交偏最小二乘法判别分析 通径分析
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湖北长阳高山蔬菜病虫害用药现状调查及解决对策
《湖北农业科学 》 2019 北大核心
摘要：对湖北省长阳县高山蔬菜种植区域的蔬菜病虫害发生及农药使用情况进行了深入细致的调查,初步掌握了长阳县高山蔬菜病虫害的发生种类、特点及现阶段用药情况,指出了实际生产中高山蔬菜用药存在的问题,并提出了相应的建议.
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非洲菊切花保鲜中的细菌鉴定和8-HQ抑菌保鲜研究
《保鲜与加工 》 2019 北大核心
摘要：非洲菊切花瓶插观赏过程中常出现花茎弯曲和花朵下垂现象,该现象与插花溶液中的细菌滋生有关。本研究分离纯化了非洲菊切花清水瓶插中出现的细菌,通过16S rDNA测序法鉴定出瓶插过程中滋生的细菌主要来自泛菌属、假单胞菌属、寡氧单胞菌属以及克雷伯氏菌属;并研究了8-羟基喹啉(8-HQ)抑制泛菌属细菌增长的最低长效抑菌浓度为150 mg/L;选用8-HQ和蔗糖作为切花保鲜剂主要成分时,其中150 mg/L 8-HQ+6%蔗糖的组合能最有效延长非洲菊鲜切花开放时间,并保持瓶插溶液清亮程度。
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武汉市黄陂区农作物种质资源现状普查与分析
《湖北农业科学 》 2019 北大核心
摘要：依据1956年(解放后)、1981年(家庭联产承包初期)和2014年(农村土地流转时期)3次全国农作物种质资源普查数据,分析了湖北省武汉市黄陂区主要农作物种类和品种的变化趋势.结果发现,国家种质库保存的39份黄陂区地方种质2014年均无种植;主要粮食作物、经济作物和蔬菜作物总种植面积均呈先上升后下降的趋势,果茶作物总种植面积一直处于上升趋势,此4类作物种植面积一直分别保持着后者是前者的1/2、1/10和1/10左右;无论是作物种类还是品种数量,地方种质一直处于减少状态,而培育种质处于增加状态,这种趋势从1981年后尤其显著;2014年黄陂区仅有3个作物种类(豇豆、萝卜和柿)的6个地方品种(地豇豆、红豇豆、麦地湾萝卜、黄州萝卜、沙畈萝卜和山柿)种植,这些种质可成为黄陂区今后加以保护和开发利用的重点.
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6株猪圆环病毒2型全基因组克隆和序列分析
《黑龙江畜牧兽医 》 2019 北大核心
摘要：为了研究猪圆环病毒2型(PCV-2)不同毒株间的基因序列,试验采用PCR方法对有断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)典型症状发病猪的脾脏、淋巴结和肺脏等6份病料(TZ1～TZ6)进行分段扩增PCV-2全基因序列,测序后与GenBank中已知序列进行比对,并用DNAStar软件进行同源性分析及系统进化树的构建。结果表明:测序结果经与GenBank中已知PCV-2序列比较鉴定,确认PCR扩增的6个序列均为PCV-2序列,其长度均为1 767 bp。所得序列与国内毒株JX982227、 KX814348序列的同源性相对较高,为97.7%～99.0%;与国外毒株DQ915584、HQ231328、EF394779、AY424405序列的同源性相对要低一些,为95.8%～96.5%。6株毒株间的同源性较高,为99.1%～100%;TZ3和TZ5与JX982227亲缘关系最密切,6株毒株序列与KX814348的亲缘关系也较近,而与AY424405、HQ231328、EF394779、DQ915584的亲缘关系相对较远。
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茶树果胶乙酰酯酶家族成员的鉴定和生物信息学分析
《茶叶科学 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：茶树是氟的超富集植物,叶片高氟含量与人体健康密切相关.果胶乙酰酯酶(PAE)可能通过调控果胶的去乙酰化作用参与茶树叶片对氟的富集和解毒,然而目前并无茶树PAEs的相关报道.本研究以茶树舒茶早基因组和三代测序数据为基础,利用生物信息学的方法开展了PAEs的鉴定及其特性、进化和定位分析.结果表明,在茶树中,PAE家族有12个蛋白,属于PAE5、PAE8、PAE9、PAE10、PAE12等5个成员,具有CLDG、PxYH、GGGWC、GS、NWN、rYCDG、GCSAG、NaAYDSWQ、HCQ等9个保守基序;在进化关系上,茶树PAEs与葡萄、可可亲缘关系较近;12个CsPAEs氨基酸大小为326~515,分子量为36.7~56.9 kDa,等电点为5.1~8.9;除CsPAE5、CsPAE5-1定位线粒体,CsPAE10-1可能定位胞质外,其他9个CsPAEs定位细胞壁;CsPAE5、CsPAE5-1、CsPAE12和CsPAE12-1为跨膜蛋白.此研究结果将为解析PAE在茶树叶片氟富集和解毒过程中的功能奠定基础.
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真菌SF_50651中抗菌活性化学成分的研究
《湖北农业科学 》 2019 北大核心
摘要：在抗菌活性天然产物的筛选过程中,筛选到1株具有强抗菌活性的真菌SF50651,通过活性跟踪,确定其中的活性组分,经提取和制备高效液相色谱分离得到1个抗菌活性化合物,经紫外、质谱和天然产物词典(DNP)查询确定化合物为稻瘟醇(Pyriculol),进一步的抗菌活性测试表明其具有显著的抗金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)作用.
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