科研产出
海洋微生物低温碱性脂肪酶的纯化与性质研究
《海洋与湖沼 》 2004 北大核心 CSCD
摘要：以海洋微生物通过发酵制备的脂肪酶为材料 ,对该酶的分离纯化条件及理化性质进行了研究。在脂肪酶纯化中 ,采用氯仿萃取、中空纤维柱超滤及CM SepharoseFF阳离子交换柱层析等技术对发酵制备的脂肪酶进行了纯化 ,结果得到达到电泳纯的脂肪酶。在脂肪酶理化性质研究中 ,采用SDS PAGE电泳对该脂肪酶分子量进行测定 ,并在实验中以橄榄油为底物采用脂肪酶酸碱滴定测活法 ,对脂肪酶的最适水解条件、各种因素对脂肪酶稳定性的影响进行了研究。结果显示 ,该脂肪酶分子量为 ( 38 0± 1 )kD ,最适水解温度为 35℃ ,最适pH为 8 5 ,为一低温碱性脂肪酶。该脂肪酶可在 35℃以下、pH =4 0— 9 0范围内保持良好的稳定性 ,与常见金属离子、化学试剂等的配伍性较好 ,并且具有良好的耐盐及抗氧化性能。研究中还以p NPL(月桂酸对硝基苯酚酯 )为底物采用脂肪酶化学发光测活法 ,对脂肪酶进行了酶促动力学的研究。结果表明 ,该脂肪酶在最适条件下Km 值为 7 80 5 μmol/L ,Vmax为 1 2 385mmol/ (L·min)。通过对Zn2 +抑制脂肪酶水解活性的研究 ,发现Zn2 +对脂肪酶具有可逆抑制作用 ,从而筛选到该脂肪酶的可逆抑制剂Zn2 +。
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喹乙醇对鲤肝胰脏抗氧化酶系统的影响
《水产学报 》 2004 北大核心 CSCD
摘要：用含不同剂量喹乙醇(0～3200mg·kg-1)的饲料饲喂鲤,分别对鲤在摄食3、6、9和12周时肝胰脏中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH px)等抗氧化酶活性、脂质过氧化物丙二醛(MDA)含量及总抗氧化能力(T AOC)进行了测定。结果表明,SOD活性随饲料喹乙醇剂量的升高总体上呈升高的趋势,试验时间对各个处理组的SOD酶活性影响不大。饲料中喹乙醇对GSH px活性的影响较小,其剂量达1600mg·kg-1以上时GSH-px酶活性变化明显,主要表现为诱导效应。饲料中喹乙醇剂量的改变大体上不对MDA含量产生影响,且随时间的延长,除3200mg·kg-1组外,其余各实验组的MDA含量都有所降低。随喹乙醇剂量的增加和实验时间的延长,T AOC均呈现降低的趋势,其中以1600和3200mg·kg-1组的下降幅度最大。结果提示,高剂量下喹乙醇对抗氧化酶活性影响较大,并伴随着机体抗氧化能力的减弱。
关键词： 鲤 喹乙醇 肝胰脏 抗氧化酶系统 脂质过氧化物 总抗氧化能力
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花鲈肿瘤坏死因子基因及其在LPS和病毒刺激下表达的研究
《高技术通讯 》 2004 EI 北大核心 CSCD
摘要：采用同源克隆和锚定PCR技术,从花鲈(LATEOLABRAX JAPONICUS)中克隆到肿瘤坏死因子α(TUMOR NECROSIS FACTOR α,TNFα)CDNA的全序列.花鲈TNFα的CDNA全长990 BP,3′非编码区域(UTR)为192 BP,5′UTR为72 BP,开放阅读框(ORF)为723 BP,可编码241个氨基酸,分子量大约为26KDA.同源性分析表明该序列与其他鱼类甚至哺乳动物的TNFα基因具有很高的相似性,并含有TNF家族的签名序列(SIGNATURE).同时,利用RT-PCR技术,对不同刺激下该基因在鱼体内的表达情况进行了初步研究,发现TNFα基因在未受刺激鱼体的头肾和脾脏中有明显的表达.脂多糖(LIPOPOLYSACCHARIDE,LPS)和虹彩病毒(IRIDOVIRUS)都可以诱导TNFα基因高水平的表达,但是在不同组织内的表达存在差异.LPS刺激后表达较强的组织是头肾和脾脏,而病毒感染后TNFα在肝脏中的表达较强.研究结果表明花鲈TNFα基因存在组成型和诱导型两种表达调控机制,在抵御病原感染过程中发挥重要作用.
关键词： 花鲈 肿瘤坏死因子(TNFα) 基因克隆 MRNA表达
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兴凯湖翘嘴鲌种群结构的变化
《水生生物学报 》 2004 北大核心 CSCD
摘要：兴凯湖是中俄界湖 ,1982年、1998年对兴凯湖翘嘴捕获群体的生长、年龄进行研究。体重、体长关系式为 :1982 :W =0 0 12 2 3L2 .99743 (r=0 975 7,n =2 2 6 ) 1998:W =0 0 0 784 3L3 10 611(r=0 976 4 ,n =2 5 8)生长方程为 :1982 : L =10 3 15 6 7(1-e-0 1173 (t+ 1 3 682 6) ) W =132 6 6 12 5 2 (1-e-0 1173 (t+ 1 3 682 6) ) 2 .99741998: L =10 5 3910 (1-e-0 12 62 (t+ 0 5970 65) ) W =15 0 4 9 85 5 5 (1-e-0 12 62 (t+ 0 5970 65) ) 3 .10 611在 1982年渔获物中 ,4— 11龄的性成熟鱼占 5 6 0 % ,1998年占 12 8%。 1998年的渔获物中 1龄幼鱼数量剧增 ,占38 7% ,捕捞群体年龄结构严重低龄化 ,1998— 2 0 0 2年中国境内没有发现产卵汛场。
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珠江口近海浮游植物生态特征研究
《应用生态学报 》 2004 北大核心 CSCD
摘要：1998～ 1999年对珠江口近海浮游植物进行了 5个航次现场调查 ,共鉴定出浮游植物 2 39种 .其中 ,硅藻最多 ,占 72 4 % ,甲藻次之 ,占 2 3 8% ,其他门类合占 3 8% .种类组成以暖水种和广温种为主 ;优势种季节更替明显 ,四季的主要优势种依次为伏氏海毛藻 (Thalassiothrixfrauenfeldii)、柔弱菱形藻(Nitzschiadelicatissima)、伏氏海毛藻、细弱海链藻 (Thalassiosirasubtilis) .细胞密度全年变幅 0 2× 10 4～2 76 7 1× 10 4cell·m-3 ,四季平均 98 7× 10 4cell·m-3 ,夏、冬季明显高于春、秋季 .平面分布呈近岸明显高于外海趋势 ,密集区终年出现在西北海域上川岛附近 .Shannon Wiener指数、Pielou均匀度和多样性阈值四季均值变幅分别为 2 6 3～ 3 17、0 5 3～ 0 71和 1 74～ 2 2 3,群落多样性水平较高 ,结构较稳定 .
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鲮生长激素CDNA的克隆及其重组表达产物的促生长活性
《高技术通讯 》 2004 EI 北大核心 CSCD
摘要：利用RT-PCR技术从鲮脑垂体组织中克隆出生长激素CDNA 片段,克隆的MCGH全长567BP,编码由188个氨基酸残基组成的GH成熟肽.构建了表达载体PQE30-MCGH,转化大肠杆菌M15(PREP4),在初步优化发酵条件的基础上实现了鲮MCGH在大肠杆菌中的高效表达,表达的重组蛋白占菌体总蛋白的32.13%,经WESTERN BLOTTING分析证实所表达的重组蛋白是MCGH.表达产物主要以包涵体的形式存在.重组蛋白变性、复性后,经NI-CHELATING SEPHAROSE亲和层析纯化,SDS-PAGE显示,纯化的MCGH纯度约为94%.纯化的MCGH腹腔注射莫桑比克罗非鱼(OREOCHROMIS MOSSAMBICUS),经4周处理后,实验组1和2的体长增长率分别比对照组快9.38%和9.75%,体重增长率分别快23.42%和62.48%.经T检验统计分析表明,表达的重组MCGH具有显著的促罗非鱼生长作用(P＜0.05).
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乳山湾表层沉积物质量现状及其评价
《海洋水产研究 》 2004 北大核心 CSCD
摘要：对乳山湾东流区表层沉积物的综合调查分析表明 ,乳山湾东流区为弱还原环境。总氮、总磷局部超标 ,且其含量与有机质、硫化物的变化特征相似 ,有明显的区域分布 ,在东部湾顶虾池排放口附近含量相对较高 ,说明养殖排放污水对其沉积环境质量有一定的影响。沉积物中的重金属以Cd的污染指数最大 ,平均值为 2 5 4,其他重金属指标的污染指数较低 ,均小于 1 0 ,说明乳山湾沉积物中存在Cd的潜在污染危险。
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漂白粉和敌百虫对净化养鱼水生物膜活性的影响
《环境科学研究 》 2004 北大核心 CSCD
摘要：以附着在固体表面的生物膜为材料,实验研究了渔药漂白粉和敌百虫对其菌类数量及活性的影响。通过分析生化需氧量(BOD5)的曲线,测定实验前后细菌、放线菌、真菌的数量和水中化学需氧量(CODMn)、铵氮(NH+4-N)的质量浓度,并用电子显微镜观察。结果表明:ρ(漂白粉)小于6 17mg L,生物膜的活性能够恢复;ρ(漂白粉)为0 7mg L时,15d后生物膜的活性可恢复80%以上。在实验浓度范围内,虽然敌百虫对生物膜的活性和水质净化能力影响不明显,但也应谨慎使用以防止污染环境。
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鳜鱼Mx蛋白全长cDNA的克隆和序列分析
《中国病毒学 》 2004 CSCD
摘要：Mx蛋白是一类由I型干扰素诱导表达的抗病毒蛋白。本研究以感染了鳜传染性脾肾坏死病毒(Infectiousspleenandkidneynecrosisvirus,ISKNV)的鳜鱼为材料,提取肝脏总RNA,通过逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增出Mx蛋白基因的核心片段序列,再应用3’和5’快速扩增cDNA末端(RACE)方法PCR扩增Mx蛋白cDNA末端,最终获得鳜鱼Mx蛋白cDNA序列(GenBank登陆号:AY392097)。序列分析表明:鳜鱼Mx蛋白cDNA含有2391bp,其中编码区长1881bp,编码627个氨基酸残基,推测蛋白质分子量大小为7.15kDa。鳜鱼Mx蛋白具有脊椎动物Mx蛋白共有的结构特征:一个三联体GTP结合区域(GXXXSGKS/T、DXXG、T/NKXD);一个发动蛋白家族的典型结构特征序列(LPRGS/KGIVTR);以及C端高度保守的Leu拉链结构域。鳜鱼Mx蛋白全基因的获得为下一步研究鱼类Mx蛋白的抗病毒活性、作用机制,以及干扰素的检测奠定了基础。
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真空双筒活鱼提升机的设计与试验
《大连水产学院学报 》 2004 北大核心 CSCD
摘要：研制了一种利用真空气压原理进行活鱼提升的机械,并对该机的活鱼提升性能进行了试验,测定了活鱼提升的吸程、压力、流量等技术参数,确定了鱼水比、鱼损率等性能指标。结果表明,该提鱼机完全满足活鱼提升的特殊要求。在吸程为3 5～7 0m的范围内,鱼水比为1∶1 0时,提升效率较高,活鱼提升量为12～43t/h;可提升最大个体的体长为450mm,体重为2kg;鱼损率为0。
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