科研产出
miR-665靶向BCL2L11调控武安山羊成肌细胞增殖
《畜牧兽医学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：旨在利用分子生物学方法探究miR-665靶向调控BCL2L11对山羊成肌细胞增殖的影响。本研究选取1月龄和9月龄的健康山公羊各3只，各年龄段体重均接近且饲养环境相同。本试验通过RT-qPCR分析BCL2L11在武安山羊不同组织中的表达情况；利用RT-qPCR检测了不同月龄武安山羊背最长肌组织中BCL2L11和miRNA-665的表达情况；构建了BCL2L11 3′UTR野生型和突变型载体，以及miR-665 mimics和对照组，将其共转染到HEK293T细胞，通过使用双荧光素酶报告基因检测系统鉴定了miR-665与BCL2L11存在靶向性关系。在山羊成肌细胞转染miR-665 mimic及阴性对照，采用RT-qPCR检测了细胞凋亡标志因子XIAP和Fas表达水平，同时利用EdU试验分析miR-665过表达对山羊成肌细胞增殖的影响。结果表明，BCL2L11在背最长肌组织中高表达；miR-665和BCL2L11在9月龄和1月龄山羊背最长肌组织中表达情况存在差异，miR-665在1月龄的表达量高于9月龄，而BCL2L11则相反，两者存在负调控现象；通过双荧光素酶报告分析显示，当转染过表达miR-665 mimic后，显著抑制了BCL2L11荧光素酶的活性，同时靶基因BCL2L11的mRNA表达水平也明显降低。为进一步验证miR-665的功能，转染miR-665 mimic后发现细胞凋亡标志基因XIAP与Fas的表达量也显著降低；EdU试验分析显示，过表达miR-665后促进了成肌细胞的增殖。综上所述，在山羊背最长肌组织中miR-665作为BCL2L11的调控元件，能够显著抑制山羊成肌细胞中BCL2L11的表达水平，当miR-665过表达后，能够促进成肌细胞的增殖情况。
关键词： miR-665 BCL2L11 肌肉 武安山羊 成肌细胞
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哺乳动物卵泡发育阶段颗粒细胞增殖与分化的研究进展
《畜牧兽医学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：在哺乳动物的繁殖过程中，精子和卵子的发生以及受精卵的发育都至关重要。目前，有关哺乳动物卵母细胞成熟发育的研究不在少数，但对其保卫细胞-颗粒细胞是如何对卵母细胞发育产生作用的还有待深入探索。在雌性哺乳动物中，早期卵巢颗粒细胞是由卵巢网和卵巢表皮细胞发育而来的；此后的前体颗粒细胞阶段就围绕于卵母细胞周围，通过间隙连接方式为卵母细胞提供营养物质并进行信息交流，并依赖繁殖激素(如AMH、FSH、LH)调节作用进而对卵母细胞成熟进行调控。本文通过综述哺乳动物卵巢颗粒细胞的来源、颗粒细胞在卵泡各发育阶段的分化及其在卵母细胞成熟过程的功能机制，以期为进一步研究哺乳动物卵巢颗粒细胞的生物学功能提供帮助，并为体外卵母细胞成熟培养体系提供优化思路。
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拮抗菌复合保鲜纸的制备及其对苹果保鲜中的应用
《食品工业科技 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：为研究拮抗菌复合保鲜纸的性能及其在室温下对嘎啦苹果的生理品质及保鲜效果的影响，同时解决拮抗菌在应用中难于萌发、受环境影响大等局限性，本研究以膜醭毕赤酵母为拮抗菌，添加至1.16%明胶和2%的海藻糖混合液中，结合纸基材料制备成拮抗菌复合保鲜纸，并对复合保鲜纸进行表征、物理性能和热稳定性能分析，分析其对嘎啦苹果自然发病率、病斑直径、失重率、硬度、褐变度、还原糖、可滴定酸、维生素C和可溶性固形物的影响，综合评价复合保鲜纸对嘎啦苹果的保鲜效果。结果表明，含菌保鲜基液使链格孢霉菌孢子表面皱缩变形，形态破坏。含菌浓度为108 CFU/mL的保鲜液与纸基材料紧密结合。复合保鲜纸的吸水率为768.94%±38.05%，有较高吸水率；厚度为0.232±0.008 mm，抗张强度为13.88±0.59 N/mm2，断裂伸长率6.33%±0.58%，表明复合保鲜纸具有良好的物理性能；在320～450℃范围内存在主要的质量损失，800℃时残留率为5.31%，具有良好的热稳定性。活体应用表明，复合保鲜纸可以有效延缓接种果实的病斑扩展，降低了果实的失重率和褐变度并保持了果实的硬度，延缓了果实维生素C、还原糖和可溶性固形物含量的降低，维持了果实良好的感官品质和生理品质，延长了贮藏时间。该复合保鲜纸具有较好的物理性能和热稳定性能，较好维持了采后嘎啦苹果的贮藏品质，不仅为拮抗酵母的抑菌保鲜提供了新思路，也为新型生物保鲜纸的开发与保鲜应用提供了参考。
关键词： 拮抗酵母 含菌保鲜基液 复合保鲜纸 苹果 保鲜效果
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奶山羊FTO基因对乳腺上皮细胞脂代谢相关基因表达及甘油三酯合成的影响
《家畜生态学报 》 2025 北大核心
摘要：试验旨在通过过表达和干扰技术探究脂肪与肥胖相关基因(fat mass and obesity associated,FTO)对奶山羊乳腺上皮细胞脂代谢相关基因的表达及甘油三酯合成的影响。通过克隆得到奶山羊(Capra hircus)乳腺组织FTO基因的CDS区序列，构建FTO过表达载体，并设计合成靶向FTO的siRNA(small interference RNA),利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术检测过表达或干扰FTO基因后奶山羊乳腺上皮细胞中脂代谢相关基因及甘油三酯含量的变化。结果表明，奶山羊FTO基因的CDS区全长1 518 bp,与绵羊(Ovis aries)(NM＿001104931.1)、牛(Bos taurus)(NM＿001098142.1)和水牛(Bubalus bubalis)(XM＿006043050.4)的序列相似性分别为99%、97%和96%。在乳腺上皮细胞中过表达FTO能够显著上调固醇调节元件结合蛋白1(sterol-regulatory element binding proteins 1,SREBF1)、脂肪酸合成酶(fatty acid synthase, FASN)、二酰甘油酰基转移酶2(diacylglycerol O-acyltransferase 2,DGAT2)的mRNA水平(P<0.05),显著下调甘油三酯水解相关基因如激素敏感脂酶(hormone-sensitive lipase, HSL)的表达水平(P<0.05),同时细胞中甘油三酯含量显著增加。在奶山羊乳腺上皮细胞中干扰FTO得到与之相反的结果。综上，FTO基因在调节奶山羊乳腺上皮细胞脂代谢中发挥重要的作用。
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水稻蔗糖转运蛋白OsSUT4基因的克隆与功能分析
《河南农业科学 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：克隆水稻蔗糖转运蛋白OsSUT4基因，利用酵母异源表达系统验证OsSUT4蔗糖转运功能，并在水稻中过表达，观察转基因植株表型，鉴定其耐盐性和抗旱性，探究OsSUT4基因在水稻抗逆中的作用，为水稻遗传改良提供新的基因资源和理论依据。结果表明，OsSUT4基因主要在拔节期的剑叶中表达；利用酵母异源表达系统首次验证了OsSUT4具有蔗糖转运功能；过表达OsSUT4基因没有明显改变籽粒的形态和千粒质量，但显著提高了株高和盐、干旱胁迫条件下的存活率，增强了水稻的耐盐性和抗旱性。
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谷子SiCDPK9基因的克隆、亚细胞定位与盐胁迫下表达分析
《江苏农业科学 》 2025 北大核心
摘要：杂种优势是指杂交子1代（F1）在生物量、产量、适应性、抗逆性等性状上优于双亲的现象，其广泛使用使得玉米、高粱、水稻等作物产量实现大幅提升。近年来，谷子杂交种选育工作也取得较大进展，但关于杂种优势形成的分子机制和调控网络的研究尚不多见。SiCDPK9是前期通过转录组数据分析获得的谷子产量性状杂种优势相关基因，为阐明其功能及其参与产量性状杂种优势形成的作用机制，本研究以谷子强优势杂交种56229的幼穗为材料，克隆SiCDPK9基因，采用生物信息学方法分析其序列特征，并进行亚细胞定位分析，同时，利用实时荧光定量PCR技术检测其在盐胁迫处理下的表达模式。结果表明，SiCDPK9基因的开放阅读框长度为1 749 bp,编码582个氨基酸，具有典型的丝/苏氨酸蛋白激酶催化结构域和EF-hand类钙离子结合结构域；SiCDPK9为不稳定的亲水性蛋白，分子质量为64.40 ku,理论等电点为9.08;SiCDPK9蛋白具有48个磷酸化位点和2个棕榈酰化修饰位点，不含信号肽序列；SiCDPK9蛋白结构以α螺旋和无规则卷曲为主，定位于细胞膜；通过氨基酸序列比对与系统进化分析发现，SiCDPK9与水稻小穗育性相关基因OsCPK9的氨基酸序列相似性高、亲缘关系近；外源NaCl处理后，SiCDPK9的表达水平先升后降。以上结果暗示SiCDPK9基因可能通过响应逆境胁迫而参与对谷子产量性状杂种优势形成的调控。
关键词： 谷子 杂种优势 钙依赖蛋白激酶 生物信息学分析 亚细胞定位
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化学发光免疫分析法及其在动物健康养殖中的应用
《动物医学进展 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：化学发光免疫分析法(CLIA)作为一种分析技术，以其高灵敏度和操作简便等诸多优点，在生命科学和临床诊断等领域中有着巨大的应用潜力，并在动物疾病诊断中扮演了举足轻重的角色。论文系统性地回顾了CLIA的基本原理和技术特点，以及该技术的技术演进过程；围绕CLIA在动物健康养殖中的实际应用情况、存在的问题以及未来的发展趋势进行了深入探讨，以期为该技术在畜禽养殖生产检测领域的研究和应用提供参考。
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不同砧木对嘉兴地区'阳光玫瑰'葡萄生长及果实品质的影响
《经济林研究 》 2025 北大核心
摘要：【目的】探究不同砧木对‘阳光玫瑰’葡萄树体生长及果实品质的影响，筛选出综合表现优良的穗砧组合。【方法】以‘阳光玫瑰’/3309、‘阳光玫瑰’/5BB、‘阳光玫瑰’/夏黑共3种穗砧组合为试材，对树体的生长指标（穗砧比、枝条节间长度、叶面积、物候期等）、果实品质（可溶性糖含量、可滴定酸含量、硬度、固酸比及挥发性成分等）等进行调查和测定，并使用隶属函数法等对其综合表现进行评价。【结果】3309砧木结果枝条叶面积大，节间长度长，果实亮度大。夏黑砧木穗砧亲和性佳，成熟期早，结果枝条生长势良好，单粒质量大，果穗质量大，果实表面色彩鲜亮且杂色少，硬度较低，适口性好，口感酸甜。5BB砧木果实可溶性固体含量高，硬度大。在果实香气物质成分方面，不同砧木改变了‘阳光玫瑰’葡萄香气物质成分的种类及数量。青叶醛和芳樟醇作为葡萄香气物质中相对含量高的物质，在3309砧木中含量高且大致相同，分别为28.80%和27.50%;5BB砧木以青叶醛为主，含量为36.90%，几乎检测不到芳樟醇；夏黑砧木以芳樟醇为主，为43.20%，青叶醛含量较高，为26.80%，果实玫瑰香味浓郁。隶属函数法分析结果显示，‘阳光玫瑰’/夏黑综合表现得分为0.66，高于其余2种组合。【结论】与3309砧木、5BB砧木相比，夏黑砧木嫁接的‘阳光玫瑰’葡萄植株的生长状态和果实品质等均较好，综合表现得分高，是嘉兴地区‘阳光玫瑰’葡萄较为适宜的砧木。
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