科研产出
鸭坦布苏病毒SYBR GreenⅠ实时荧光定量检测方法的建立
《中国兽医学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：根据鸭坦布苏病毒(Duck Tembusu virus,DFV)NS5基因序列特征设计引物,建立基于SYBR GreenⅠ检测模式的实时荧光定量RT-PCR(real-time RT-PCR,RRT-PCR),该方法检测DFV NS5基因2.74×103～2.74×107拷贝/μL反应范围内有很好的线性关系。扩增产物的熔解曲线分析只出现1个单特异峰,无引物二聚体,Tm值为(86.23±0.18)℃,对禽流感病毒、鸭肝炎病毒、鸭源禽1型副黏病毒、鸭减蛋综合征病毒、番鸭呼肠孤病毒核酸均无阳性信号扩增,可重复性好,组内变异系数为0.52%～1.48%,组间变异系数0.71%～2.21%。检测速度快,从样本处理到报告结果仅需4h。
关键词： 鸭坦布苏病毒 SYBR GreenⅠ 实时荧光定量RT-PCR
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鸭坦布苏病毒SYBR GreenI实时荧光定量检测方法的建立
《中国兽医学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：根据鸭坦布苏病毒(DuckTembusuvirus,DFV)NS5基因序列特征设计引物,建立基于SYBRGreenI检测模式的实时荧光定量RT-PCR(real-timeRT-PCR.RRT-PCR),该方法检测DFVNS5基因2.74*10.~2.74*10'拷贝/肛L反应范围内有很好的线性关系.扩增产物的熔解曲线分析只出现1个单特异峰,无引物二聚体,丁m值为(86.23士0.18).C,对禽流感病毒、鸭肝炎病毒、鸭源禽1型副黏病毒、鸭减蛋综合征病毒、番鸭呼肠孤病毒核酸均无阳性信号扩增,可重复性好,组内变异系数为0.52%~1.48%,组间变异系数0.71%~2.21%.检测速度快,从样本处理到报告结果仅需4h.
关键词： 鸭坦布苏病毒 SYBR GreenI 实时荧光定量RT-PCR
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龙眼GPX基因的克隆、原核表达及其在体胚发生过程中的表达分析
《热带作物学报 》 2013 CSCD
摘要：采用RT-PCR与RACE相结合的方法,从龙眼胚性愈伤组织中克隆了长947 bp含有完整开放阅读框的龙眼DlGPX cDNA序列(GenBank登录号为EU364813)和长度为1 736 bp的DNA序列(GenBank登录号为EU680970)。其编码1个含有168个氨基酸的蛋白质。DlGPX基因中含有5个内含子,均符合真核生物内含子通用的GT-AG法则。生物信息学分析显示:该蛋白为亲水的酸性蛋白质,定位于叶绿体;与其他植物的GPX有较高的同源性。将该基因构建成原核表达载体,经IPTG诱导表达了1个分子量约为23 ku的蛋白。利用实时荧光定量PCR(qPCR)技术研究该基因在龙眼体胚发生发育过程中的表达情况,结果显示,从松散型胚性愈伤组织到不完全胚性紧实球形结构阶段,DlGPX mRNA的转录水平逐渐升高,在胚性紧实球形结构阶段降到最低水平,子叶形胚阶段又上升到与不完全胚性紧实球形结构阶段相当的水平。
关键词： 龙眼 体细胞胚胎发生 GPX 克隆 生物信息学 实时荧光定量PCR
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抗真菌转基因水稻种植对土壤有机氮组分的影响
《南方农业学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：[目的]探讨转基因水稻对土壤有机氮组分的影响,为评价转基因作物对土壤供氮能力的影响提供依据.[方法]采用田间小区试验,按抗真菌转基因水稻品种设转品1、转品8两个处理及其亲本非转基因水稻七丝软粘作对照处理,于水稻播种前及收获后采集土样测定分析土壤有机氮组分及真菌数目变化情况.[结果]转基因水稻转品1、转品8和亲本非转基因水稻七丝软粘的土壤有机氮组分在种植前和收获后均无明显差异,外源抗真菌基因的引入对水稻田土壤有机氮各组分含量及其所占全氮比例无明显的影响,土壤有机氮中酸解氮的各组分含量顺序为:氨基酸态氮〉酸解未知氮〉氨态氮〉氨基糖态氮.[结论]外源抗真菌基因的引入对土壤有机氮组分的影响差异不显著.
关键词： 抗真菌转基因水稻 土壤理化性质 土壤有机氮组分 真菌变化
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(木奈)褐变果实均一化全长cDNA文库的构建及部分ESTs序列分析
《热带作物学报 》 2013 CSCD
摘要：以发生褐变初期的(木奈)果肉总RNA为材料,对SMARTTMcDNA合成方法进行改良,并将长距离PCR、DSN处理和定向克隆相结合,成功构建(木奈)褐变果实均一化全长cDNA文库。经检测,该文库的初始滴度为2.0×106pfu/mL,重组率为99%,插入片段大小平均为1.8 kb,文库质量良好。随机挑取720个阳性克隆进行5′EST测序,共获得684条有效的ESTs序列;并将684条有效序列拼接后,58条被组装成21个重叠群(contigs),单拷贝(singlets)基因有626条,共得到647个单基因簇(unigenes),文库冗余率为8.4%。用Blast 2 go在线软件对测序结果进行功能注释和归类分析,结果显示,已知功能基因与能量代谢、蛋白质合成与降解、次生代谢物质、细胞壁代谢和转录因子有关。该文库的构建有利于从分子水平上研究(木奈)果实褐变发生的机制。
关键词： (木奈) 褐变 均一化全长cDNA文库 表达序列标签
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红萍LPC提取方法的研究
《中国食品学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：以卡州萍3001(A.caroliniana Wild.3001)为代表,通过比较直接加热法、酸提法、碱提法、酸化加热法、碱化加热法5种方法,确定酸化加热法为红萍LPC提取的最佳方法。酸化加热法提取红萍LPC的最佳工艺条件是:料液比1∶3,打浆时间4 min,加热温度65℃,加热时间7 min,pH 3.0。影响红萍LPC提取率的主次因素为加热温度>pH值>料液比>打浆时间>加热时间。采用上述工艺条件得到的红萍LPC的提取率为33.28%,得率1.34%。
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苹果酸乳酸转化高活力菌株的选育
《中国食品学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：选育苹果酸乳酸转化活力高的乳酸菌,为果酒的苹果酸乳酸发酵生物降酸提供新菌源。采用适宜的紫外亚硝基胍复合诱变条件处理植物乳杆菌R23,以降酸量及苹果酸乳酸转化活力为指标,对诱变获得的菌株进行筛选。紫外亚硝基胍复合诱变的适宜条件是:菌液浓度107cfu/mL,亚硝基胍质量浓度1.8 mg/mL,诱变时间60min。紫外线照射用功率15 W的紫外灯,距离20 cm,照射时间20 s。最终选育出1株降酸能力和苹果酸乳酸转化活力分别比出发菌提高77.5%与15.4%,遗传性能稳定的优良菌株RF17。
关键词： 乳酸菌 复合诱变 降酸能力 苹果酸乳酸转化活力 选育
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CMS-FA胞质杂交稻不育细胞质和核质互作的遗传效应分析
《福建农林大学学报(自然科学版) 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：利用4个CMS-FA胞质不育系、相应保持系和3个恢复系,研究不育细胞对11个产量相关性状的细胞质效应和核质互作效应.结果表明:CMS-FA胞质杂交稻不育细胞质对千粒重和生育期性状表现出显著正效应,对穗颈长性状表现出显著负效应,其他性状的不育细胞质效应不显著;单株穗数、千粒重、每穗总粒数、结实率、株高,穗长、穗颈长和生育期等性状的核质互作效应均达到了显著或极显著水平;不育胞质与核基因的互作使杂种F1的平均基因型预测值、群体平均优势和群体超亲优势在株高和穗颈长上得到明显增加;CMS-FA胞质杂交稻不育细胞质无不良细胞质效应,不育系可恢复性好,可作为杂交稻育种的优良不育胞质加以利用.
关键词： 杂交稻 CMS-FA 细胞质效应 核质互作 产量相关性状
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