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苏云金芽胞杆菌NBIC-380菌株营养期杀虫蛋白3Aa基因(vip3Aa)在大肠杆菌及芽胞杆菌中的表达

农业生物技术学报 2015 北大核心 CSCD

摘要:营养期杀虫蛋白3A(vegetative insecticidal protein 3A,Vip3A)对鳞翅目(Lepidoptera)害虫具有广谱杀虫活性,具有重要研究意义。本研究以对玉米螟(Ostrinia nubilalis)具有高毒力的野生型苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringienesis,Bt)NBIC-380菌株总DNA为模板,PCR扩增vip3Aa(Gen Bank登录号:KT307982)全长基因约2.4 kb。将vip3Aa基因插入大肠杆菌(Escherichia coli)表达载体p GEX-6p-1和p ET-28a以及Bt表达载体p BMB1A中,构建重组表达载体p GV3、p EV3和p BV3。将p GV3和p EV3转化大肠杆菌BL21(DE3),p BV3转化Bt BMB171和枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis,Bs)168菌株。十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gelelectrophoresis,SDS-PAGE)分析表明,vip3Aa基因在BL21(DE3)、Bt BMB171和Bs168中均有表达,蛋白质相对分子质量为88 k D。纯化后的蛋白及Bt中表达的蛋白对棉铃虫(Helicoverpa armigera)二龄幼虫进行了生物测定,在大肠杆菌表达的蛋白没有杀虫活性,而在芽胞杆菌中表达的蛋白有杀虫活性,半数致死浓度(medium lethal concentration,LC50)值分别为6.185 6(Bt BMB171)和2.984 6 mg/m L(Bs168)。生测结果表明,Bt NBIC-380菌株的vip3Aa基因表达的蛋白对棉龄虫具有一定杀虫活性。本研究为丰富Vip的基础研究和构建高效广谱的工程菌提供基础资料。

关键词: 枯草芽胞杆菌 营养期杀虫蛋白(Vip) vip3Aa基因 克隆与表达

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诺沃霉素植生链霉菌发酵培养基的优化

湖北农业科学 2015 北大核心

摘要:通过优化发酵培养基中的成分及其含量,提高诺沃霉素有效组分的产量。以高效液相色谱检测目标产物的峰面积作为指标,通过单因素试验获得最佳碳源及氮源。使用正交试验等获得最佳发酵培养基:葡萄糖4.0%,酵母浸粉0.5%,豆粕1.0%,磷酸氢二钾0.035%,碳酸钙0.05%,豆油0.1%。相关发酵条件为p H 7.0,种龄96 h,接种量10%,发酵温度28℃,发酵时间120 h。根据高效液相色谱检测结果,在最佳发酵条件下,目标产物产量比对照培养基提高了657%。

关键词: 培养基优化 正交试验 诺沃霉素 发酵条件

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茄科主要经济作物青枯病抗性育种研究进展及综合防治

湖北农业科学 2015 北大核心

摘要:综述了中国茄科(Solanaceae)主要栽培植物番茄、辣椒、茄子、马铃薯和烟草等青枯病病原菌(Ralstonia solanacearum)菌系的分类研究概况。总结了青枯病病原菌侵染过程、青枯病主要抗源材料的结构特征及茄科青枯病抗性遗传规律的研究进展。结合以上研究结果,提出了青枯病防治的主要途径。

关键词: 茄科(Solanaceae) 青枯病 抗病育种 综合防治

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真菌SF-21483产生的活性物质分离纯化及初步确认

湖北农业科学 2015 北大核心

摘要:从武汉地区土壤中分离得到一株真菌菌株SF-21483,其发酵液具有较强的抑制真菌的作用。本研究以真菌SF-21483发酵提取物中的活性代谢产物为研究对象,应用高效制备液相色谱经过2次分离纯化,得到了5个化合物。根据紫外吸收光谱、分子离子峰、物理性状及活性情况等确定组分4、5、7、9、10与冬青生菌素(Ilicicolin)F、E、D、C、H较为相似,对植物病原菌生物活性测试表明,该类组分具有较强的抗菌作用。

关键词: 真菌菌株SF-21483 农药活性物质 分离 纯化 冬青生菌素(Ilicicolin)

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脂肪酸结合蛋白基因与家禽脂质沉积关联研究进展

中国家禽 2015 北大核心

摘要:脂肪酸结合蛋白是脂质结合蛋白超家族成员,是机体脂肪代谢过程的重要调控因子。本文就该基因家族中的心脏型脂肪酸结合蛋白、脂肪型脂肪酸结合蛋白、细胞外脂肪酸结合蛋白、肝脏型脂肪酸结合蛋白和小肠型脂肪酸结合蛋白基因与家禽脂质沉积关联的研究进展作一简要综述。

关键词: 家禽 脂肪酸结合蛋白 多态位点 脂质沉积

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硒矿粉对早稻陵两优211富硒效果的影响

湖北农业科学 2015 北大核心

摘要:利用湖北恩施出产的硒矿粉(含硒量83 mg/kg)在江西丰城(土壤含硒量0.430 6 mg/kg)进行不同硒矿粉施用量(0、10、20、30、40、50 kg/667m2)对早稻(Oryza sativa L.)陵两优211富硒效应研究。结果表明,硒矿粉能够增加水稻子粒与茎秆的硒含量,施用10~50 kg/667 m2硒矿粉的水稻子粒硒含量为0.113 4~0.255 0 mg/kg,比对照0.108 0 mg/kg增加5.00%~136.11%,施用40、50 kg/667 m2硒矿粉的水稻子粒硒含量显著高于其他处理;硒矿粉能够增加水稻茎秆的硒含量,施用10~50 kg/667m2硒矿粉的茎秆硒含量为0.312 6~0.361 2 mg/kg,比对照0.291 9 mg/kg增加7.09%~23.74%,施用50 kg/667 m2硒矿粉的茎秆硒含量显著高于其他处理;子粒和茎秆的硒含量与硒矿粉施用量呈正相关;茎秆硒含量高于子粒,不同处理的茎秆硒含量比子粒硒含量高41.64%~175.66%。

关键词: 硒矿粉 早稻(Oryza sativa L.) 陵两优211 富硒效果

微生物源杀菌剂先导化合物筛选研究

湖北农业科学 2015 北大核心

摘要:以番茄早疫病菌(Alternaria solani)作为产孢病原菌的代表,进行了孢子浓度和培养时间对其敏感性影响的筛选试验;以小麦颖枯病菌(Septoria nodorum Berk)作为不产孢病原菌的代表,进行了菌丝碎片计数,同时比较了接菌浓度和培养时间对其敏感性影响的筛选试验;用两个杀菌剂标准样品进行了筛选稳定性比较试验,同时对576个微生物源提取物进行了筛选试验。结果表明,杀菌剂筛选必须控制接菌浓度和培养时间,从而保持适当的活性敏感度,才能得到稳定的筛选结果。适当降低接菌浓度和缩短培养时间可以提高活性样品的敏感度,有效的减少低活性样品的漏筛。

关键词: 番茄早疫病菌(Alternaria solani) 小麦颖枯病菌(Septoria nodorum Berk) 先导化合物 杀菌活性 微生物源提取物

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非洲甘蓝种质资源遗传多样性的研究与分析

湖北农业科学 2015 北大核心

摘要:利用16对SSR引物对17份非洲结球甘蓝(Brassica oleracea L.var.capitata L)种质资源材料和8个中国结球甘蓝品种进行了遗传多样性研究。结果显示,有10对SSR引物在25个资源材料间表现为多态性。共检测到32个等位基因位点,每对引物的等位基因位点变幅为1~4,平均为3.2,等位基因数为25,平均为2.5。UPGMA聚类分析结果显示,在相似系数为0.534的水平上可将25份结球甘蓝资源材料聚为4大类群。揭示了引进非洲结球甘蓝资源的遗传多样性。

关键词: 结球甘蓝(Brassica oleracea L.var.capitata L) SSR 遗传多样性 聚类分析 非洲

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放射源~(60)Coγ射线的利用效率研究

原子能科学技术 2015 EI 北大核心 CSCD

摘要:应用60 Coγ射线照射量率计算法分析比较了4种放射源排列方法和3种辐照操作方式的γ射线利用效率。结果表明,3种操作方式中,换层操作的效率最高,利用率为1.78,其次是分区操作方式,为1.45,源超界的不换层方式最低,为0.85。实行换层操作时,当吊篮高度在1.2m之内时以3层高度收敛排列法(各层间活度比为0.6∶1.8∶0.6)的60 Coγ射线利用率最高,为1.60;当吊篮高度为1.4 m时,3层轻度收敛排列法(0.9∶1.2∶0.9)的60 Coγ射线利用率最高,为1.72;当吊篮高度达到1.6 m时,3层均匀排列法(1∶1∶1)的射线利用率最高,为1.78。

关键词: 60 Co 放射源 排列 辐照 利用率

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湖北省几种粗饲料的营养价值评定研究

湖北农业科学 2015 北大核心

摘要:对采集的几种常用粗饲料进行常规营养成分分析,并对粗饲料干物质随意采食量、体外干物质消化率、消化能、代谢能及分级指数等指标进行了预测。结果表明,粗饲料营养价值优劣顺序为花生藤>黑麦草>扁穗雀麦>稻草秸秆>玉米秸秆>花生壳>高粱秸秆>菜子秸秆。

关键词: 粗饲料 营养价值 分级指数

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