科研产出
维氏气单胞菌弱毒株FS12001及其疫苗对异育银鲫的免疫效果
《水产学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为探究由维氏气单胞菌（Av）弱毒株FS12001制备的疫苗免疫效果，将Av弱毒株FS12001制备活疫苗、灭活疫苗、ISA763A-灭活疫苗和蜂胶-灭活疫苗，腹腔注射免疫异育银鲫，同时设ISA763A佐剂、蜂胶佐剂及0.65%NaCl作为对照组。于免疫后1、3、5、7和14 d经实时荧光定量PCR （qRT-PCR）检测脾脏组织中IgM、IL-1β及LZM的基因表达量；于免疫后7、14、21、28、42和48 d尾静脉采血分离血清，检测IgM抗体水平，测定SOD和LZM酶活性；于免疫28 d后用2株Av强毒株分别攻毒各组实验鱼，连续观察记录7 d，计算各免疫组的相对保护率。结果显示，各免疫组脾脏组织中IgM、IL-1β及LZM的基因表达量高于对照组，且ISA763A-灭活疫苗组和蜂胶-灭活疫苗组的表达量显著高于其他各实验组。各疫苗免疫组血清特异性抗体水平均显著高于0.65%NaCl对照组和佐剂对照组。各疫苗免疫组的LZM活性均在28 d最高，灭活疫苗组、ISA763A-灭活疫苗组及蜂胶-灭活疫苗组SOD活性均在7 d最高。菌株AVCA07攻毒后，活疫苗组、灭活疫苗组、ISA763A-灭活疫苗组和蜂胶-灭活疫苗组的RPS分别为63%、56%、100%和56%；菌株YC170511攻毒后，以上4个免疫组RPS分别为59%、55%、93%和72%。研究表明，用弱毒株FS12001制备疫苗，注射免疫异育银鲫后均可增加脾脏中IgM、IL-1β及LZM的基因表达量，提高血清抗体水平，增强SOD和LZM酶活性，增强其抵抗Av感染的能力。
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折叠萝卜螺卵粒孵化时间及不同饵料对仔螺生长的影响
《上海海洋大学学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为了研究折叠萝卜螺(Radix plicatula)卵粒孵化时间和生菜叶、水生生物附着物、微囊料3种饵料及其部分组合对仔螺生长的影响,其中,生长分0~2、3~5周龄2个阶段,在室内条件下,统计10条新产卵袋卵粒孵化时间,分析投喂不同饵料及组合仔螺体质量等生长参数差异.结果显示:水温25.0~32.5 ℃,折叠萝卜螺卵粒孵化时间6.0~7.5 d,平均孵化率96.37%;水温22.5~32.5 ℃,不同饵料及组合0~5周龄仔螺成活率差异不显著、生长速度差异显著;0~2周龄仔螺投喂水生生物附着物+微囊料生长速度最快,投喂水生生物附着物次之;初始体质量0.005 g的3~5周龄仔螺投喂生菜叶+微囊料生长速度显著快于生菜叶和微囊料;初始体质量0.026 g的3~5周龄仔螺投喂生菜叶和生菜叶+微囊料生长速度快,之间差异不显著.研究表明:水温25.0~32.5 ℃,折叠萝卜螺卵粒孵化时间6.0~7.5 d,平均孵化率96.37%;0~2周龄仔螺投喂水生生物附着物生长速度快,3~5周龄螺投喂生菜叶生长速度快,同时投喂微囊料对0~5周龄螺有促生长作用.本研究可为折叠萝卜螺规模化生产提供依据.
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中华鲎幼鲎生态养殖模式的初步研究
《海洋湖沼通报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：中华鲎被IUCN列入“濒危”名录，进行鲎的人工培育并增殖放流是恢复鲎资源的有效途径，然而目前国内外尚未有适宜的幼鲎批量化生产培育技术。为探索幼鲎人工培育新方法，利用方斑东风螺养殖系统开展了中华鲎幼鲎生态养殖试验。结果显示，中华鲎幼鲎生态养殖模式显著提高了幼鲎成活率，并促进了幼鲎群体生长发育；经过9个月养殖，生态养殖池幼鲎90%以上个体达到3龄及以上，而单养池中幼鲎超过一半个体仍停滞在1龄；单养池和生态养殖池中螺的存活率和经济效益没有显著性差异。试验表明，中华鲎幼鲎生态养殖模式可有效促进幼鲎生长率并提高存活率，且不影响方斑东风螺养殖的经济效益。
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新疆额尔齐斯河高体雅罗鱼个体繁殖力研究
《安徽农业大学学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：新疆额尔齐斯河流域高体雅罗鱼属于自治区二级保护动物,为对其自然群体进行资源修复,于2020年5月,在新疆额尔齐斯河布尔津河段采集高体雅罗鱼117尾,其中雌性Ⅳ期样本53尾,可进行个体繁殖力相关研究.结果表明:繁殖群体由3+~7+龄个体组成,个体绝对繁殖力为(28390~97184)粒,平均为(46955±14102)粒;体长相对繁殖力为(97~253)粒·cm-1,平均为(145±32)粒·cm-1;体质量相对繁殖力为(70~131)粒·g-1,平均为(85±11)粒·g-1;从多元回归分析中可以得出卵巢质量与个体绝对繁殖力和体长相对繁殖力均呈正相关,且卵巢重与个体繁殖力之间的偏相关系数系数高于净体质量、年龄和性腺成熟系数;从最佳拟合方程中可以看出个体绝对繁殖力与卵巢质量的拟合度最高(R2=0.916),关系式为F=1.074 m02+153.347 m0+19611.041.因此,通过卵巢质量与个体绝对繁殖力的拟合方程可以预测额尔齐斯河流域中高体雅罗鱼自然种群的繁殖能力,从而丰富其繁殖生物学资料,为高体雅罗鱼的资源养护和人工繁育提供科学依据.
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3型鲤疱疹病毒白介素10单克隆抗体制备与鉴定
《上海海洋大学学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：白介素（Interleukin,IL）10是脊椎动物Th2细胞（T helper 2 cell）和先天淋巴细胞（Innate lymphoid cell）分泌的一种多效应细胞因子。3型鲤疱疹病毒（Cyprinid herpesvirus 3, CyHV3）ORF134编码IL10样蛋白，本研究构建了ORF134原核表达质粒，在大肠杆菌DE3感受态细胞中表达CyHV3-IL10重组蛋白。SDSPAGE分析结果表明，重组CyHV3-IL10蛋白约为18 ku，主要以包涵体形式表达。将CyHV3-IL10包涵体进行变性和复性，经分子筛凝胶柱层析纯化获得了纯度较高的重组CyHV3-IL10蛋白，利用CyHV3-IL10重组蛋白免疫小鼠制备了单克隆抗体，通过酶联免疫吸附测定法（Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）筛选，获得了2株亲和力强的抗体，并利用激光共聚焦技术和Western blotting对抗体进行鉴定。结果表明，FITC标记的单克隆抗体能够特异性识别HEK293细胞中表达的CyHV3-IL10重组蛋白和感染CyHV3的镜鲤脾和鳃组织中表达的CyHV3-IL10蛋白。CyHV3-IL10单克隆抗体的制备为后续研究CyHV3-IL10蛋白功能和建立CyHV3诊断方法奠定基础，为CyHV3病毒检测试剂盒的研发提供新思路。
关键词： 鲤疱疹病毒3型 白介素10 单克隆抗体 Western blotting 免疫荧光分析
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菌藻协同对大口黑鲈养殖水环境、生长和免疫酶活性的影响
《大连海洋大学学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为探索添加小球藻（Chlorella vulgaris）、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）和小球藻+枯草芽孢杆菌对大口黑鲈（Micropterus salmoides）养殖水环境、生长性能及其相关酶活性的影响，在1 000 L聚乙烯桶中进行试验，共设置空白组（饲喂基础饲料）、小球藻组、枯草芽孢杆菌组和菌藻混合组（水体中同时添加小球藻和枯草芽孢杆菌）4个组，每组设3个重复，每个重复放50尾体质量为（11.71±0.90）g的大口黑鲈，进行60 d的养殖试验。结果表明：试验过程中，与空白组相比，加藻/菌试验组水体中所测理化指标总体上均有所优化，各试验组总氮、总磷和溶解氧含量差异较小，而氨氮、硝酸盐氮和亚硝酸盐氮含量相差较大，尤其是菌藻混合组水体中的氨氮、硝酸盐氮和亚硝酸盐氮含量在多数时间点均达到了最低水平（P＜0.05）;试验结束时，各试验组大口黑鲈的体质量、增重率和特定生长率均较空白组有所增加，但仅菌藻混合组显著高于空白组（P＜0.05）;试验过程中，与空白组相比，加藻/菌试验组鱼肝脏还原型谷胱甘肽（GSH）含量、过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）和溶菌酶（LZM）活力总体上均显著提高（P＜0.05）,丙二醛（MDA）含量显著降低（P＜0.05）,尤其是菌藻混合组的抗氧化效果更好。研究表明，在水环境中添加小球藻或枯草芽孢杆菌均可以改善水质环境，促进大口黑鲈生长，提高其抗氧化和免疫能力，藻菌协同效果更优。
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温度和光照强度对强壮硬毛藻氮磷营养盐吸收效果的影响
《渔业科学进展 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为了解温度和光照对强壮硬毛藻（Chaetomorpha valida）吸收营养盐效果的影响，探索其达到最佳吸收效果的环境条件，本文研究了该藻在不同温度（5、15、25℃）和光照[90 000、180 000、270 000μmol photons/（m~2·s）]条件下对海水中常见营养盐成分的吸收效果。结果显示，强壮硬毛藻在5℃以上和90 000μmol photons/（m~2·s）光照强度以上对水体中的NH4+-N、NO2--N和PO43--P都有较好的吸收效果，但温度和光照对强壮硬毛藻吸收营养盐均有显著影响，在设定范围内，营养盐吸收速率与温度和光照强度均呈正相关关系。极差分析结果显示，温度的影响大于光照强度的影响。方差分析结果显示，光照强度和温度的主效应都极显著，而且具有叠加效应，吸收率最高的条件为25℃/270 000μmol photons/（m~2·s）组合，该条件下，NH4+-N、NO2--N和PO43--P的营养盐吸收率最高，3 h吸收率分别为（99.70±0.52）%、（99.99±0.01）%和（91.31±0.32）%。该藻的广温性吸收能力对我国北方地区低温和高温季节育苗用水和养殖尾水的净化具有非常重要的意义。
关键词： 强壮硬毛藻 营养盐吸收 温度 光照强度 海水养殖水质净化
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Rho A-Rock1信号通路对传染性脾肾坏死病毒感染的调控及作用
《西北农林科技大学学报(自然科学版) 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：【目的】探究传染性脾肾坏死病毒（ISKNV）复制增殖与Rho A-Rock 1通路的关系。【方法】采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测ISKNV感染CPB细胞12,24,48,72和96 h后病毒DNA拷贝数的变化；同时采用RT-qPCR和蛋白免疫印迹方法检测病毒感染CPB细胞12,24,48和72 h后Rho A与Rock 1转录及蛋白表达水平的变化；通过Rho A抑制剂（CCG-1423和Rhosin）、Rock 1抑制剂（Thiazovivin和Y-27632）及siRNA抑制Rho A-Rock 1通路，研究Rho A-Rock 1通路抑制对ISKNV复制增殖的影响。【结果】ISKNV感染12～48 h,病毒的DNA拷贝数无显著变化，感染72 h病毒DNA拷贝数显著上升，感染96 h病毒的拷贝数上升变缓，说明ISKNV感染72 h时病毒正处于复制增殖的高峰期。RT-qPCR及蛋白免疫印迹结果表明，ISKNV感染72 h时，Rho A和Rock 1 mRNA转录水平和蛋白水平均显著上调。Rho A抑制剂Rhosin和CCG-1423及Rock 1抑制剂Y-27632和Thiazovivin均可使ISKNV基因组拷贝数和病变的CPB细胞数显著下调；利用siRNA敲降Rho A和Rock 1时，ISKNV的基因组拷贝数也显著下调。【结论】Rho A-Rock 1信号通路可正调控ISKNV的感染，抑制Rho A-Rock 1通路可显著抑制ISKNV复制增殖。
关键词： 脾肾坏死病毒 病毒复制 Rho A-Rock 1信号通路
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2021-2022年虾类偷死野田村病毒(CMNV)流行情况调查
《渔业科学进展 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：由偷死野田村病毒(covert mortality nodavirus,CMNV)引起的虾类病毒性偷死病(viral covert mortality disease,VCMD)使对虾养殖产业遭受了严重的损失。为掌握近年CMNV在我国主要养殖虾类中的流行情况,本研究2021—2022年间在全国主要虾类养殖地区开展了CMNV流行病学调查和样品采集工作,利用分子生物学、组织病理学和电镜分析等方法对所采集的样品进行了系统分析。期间,从天津、山东、江苏、海南、湖北及新疆等地共采集1 299份样品,样品种类包括凡纳对虾(Penaeus vannamei)、罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)、日本对虾(P.japonicus)、中国对虾(P.chinensis)和克氏原螯虾(Procambarus clarkia)等主要养殖虾类以及养殖池塘中的共生生物。采用TaqMan探针实时荧光定量PCR (TaqMan RT-qPCR)对所采集的样品进行CMNV检测,结果表明,凡纳对虾、罗氏沼虾和日本对虾等主要养殖虾类中均可检测到CMNV阳性,阳性样品采集地包括山东、江苏、海南、新疆、广西和天津等省市;除养殖虾类外,采集的虾类鲜活饵料以及虾类养殖池塘共生生物包括沙蚕(Perinereis aibuhitensis)和卤虫(Artemia sinica)中也可检测到CMNV阳性。2021年和2022年所采集样品中CMNV阳性检出率分别为10.04%(69/687)和11.44%(70/612)。流行病学调查发现,室外池塘养殖对虾中CMNV感染会引起一定程度的累计死亡,室内养殖对虾中CMNV感染主要引起对虾甲壳软化和生长缓慢,通常不会导致其大量死亡。对TaqMan RT-qPCR检测呈阳性的样品进行组织病理和原位杂交分析,患病虾肝胰腺和前中肠盲囊组织中可见嗜酸性病毒包涵体,附肢神经可见空泡化病理损伤,这些发生病理损伤的组织中均有明显CMNV RNA探针紫色杂交信号。本研究结果表明,我国多地养殖虾类以及养殖池塘共生生物中仍存在较高的CMNV阳性检出率,该病毒的流行危害风险仍然较高。建议在甲壳类养殖过程中加强CMNV检测与监测预警,进一步降低其扩散和流行的风险。
关键词： 对虾病毒性偷死病(VCMD) 偷死野田村病毒(CMNV) Taq Man探针实时荧光定量 流行病学
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基于Deep Forest算法的对虾急性肝胰腺坏死病(AHPND)预警数学模型构建
《渔业科学进展 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为预报池塘养殖凡纳对虾(Penaeus vannamei)急性肝胰腺坏死病(AHPND)的发生,自2020年开始,笔者对凡纳对虾养殖区开展了连续监测工作,包括与疾病发生相关的环境理化因子、微生物因子、虾体自身健康状况等18个候选预警因子指标,通过数据标准化处理后分析病原、宿主与环境之间的相关性,对候选预警因子进行筛选,基于Python语言编程结合Deep Forest、Light GBM、XGBoost算法进行数据建模和预测性能评判,仿真环境为Python2.7,以预警因子指标作为输入样本(即警兆),以对虾是否发病指标作为输出结果(即警情),根据输入样本和输出结果各自建立输入数据矩阵和目标数据矩阵,利用原始数据矩阵对输入样本进行初始化,结合函数方程进行拟合,拟合的源代码能利用已知环境、病原及对虾免疫指标数据对目标警情进行预测.最终建立了基于Deep Forest算法的虾体(肝胰腺内)细菌总数、虾体弧菌(Vibrio)占比、水体细菌总数和盐度的4维向量预警预报模型,准确率达89.00%.本研究将人工智能算法应用到对虾AHPND发生的预测预报,相关研究结果为对虾AHPND疾病预警预报建立了预警数学模型,并为对虾健康养殖和疾病防控提供了技术支撑和有力保障.
关键词： 对虾 急性肝胰腺坏死病 预警数学模型 Deep Forest算法 PYTHON语言
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