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重组蛋白CTB-P97R1对猪支原体肺炎活疫苗滴鼻免疫效果的评价

中国预防兽医学报 2019 北大核心 CSCD

摘要:为提高滴鼻免疫条件下猪支原体肺炎活疫苗的免疫效果,本研究设计引物扩增猪肺炎支原体P97R1基因,融合至霍乱毒素B亚单位(CTB)基因下游,构建了重组质粒p ET-CTB-P97R1。重组菌经IPTG诱导表达、分离纯化得到r CTB-P97R1重组蛋白。利用体外神经节苷脂(GM1)结合试验检测r CTB-P97R1的佐剂活性。随后将r CTB-P97R1与活疫苗混合后滴鼻免疫小鼠,免疫后采血和收集小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF),分别检测其中的特异性Ig G抗体和s Ig A抗体的水平评价免疫效果。结果显示,r CTB-P97R1可以特异性结合GM1,具有生物学活性。小鼠免疫后的血清Ig G抗体显著高于活疫苗对照组(p<0.01),同时产生了高水平的P97R1特异性Ig G抗体(p<0.01);小鼠BALF中的s Ig A抗体也显著高于活疫苗对照组(p<0.05)。结果表明,r CTB-P97R1能够显著增强经滴鼻免疫的猪支原体肺炎活疫苗的免疫效力,同时可提升P97R1的免疫应答,有望作为经黏膜免疫的猪支原体肺炎活疫苗的新型佐剂。

关键词: 霍乱毒素B亚单位 P97R1 佐剂 滴鼻 猪支原体肺炎活疫苗

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硝化抑制剂对小麦产量和氮素吸收利用的影响

生态学杂志 2019 北大核心 CSCD

摘要:为了解硝化抑制剂在麦季的施用效果,采用田间裂区试验设计,主区设施硝化抑制剂(3,4-二甲基吡唑磷酸盐,DMPP)和对照2水平;副区设5个施氮量水平(0、210、240、270、300 kg·hm~(-2)),研究硝化抑制剂对扬麦16产量形成和氮素吸收利用效率的影响。结果表明:施用硝化抑制剂,施氮量为240 kg·hm~(-2)处理小麦产量最高,达到7260 kg·hm~(-2),主要是因为小麦单位面积穗数、每穗粒数和千粒重均表现为较高;施氮量为240 kg·hm~(-2)处理,配合施用硝化抑制剂小麦生物产量也表现为最高;硝化抑制剂对小麦经济系数的影响不大;施用硝化抑制剂能够有效提高麦田土壤速效氮含量,加大氮肥投入量后,硝化抑制剂对麦田土壤速效氮素含量的增加幅度下降;施用硝化抑制剂能够显著提高小麦植株氮素累积量,却明显降低了小麦氮素籽粒生产效率;在较低施氮量(210和240 kg·hm~(-2))处理下,施用硝化抑制剂能够获得相对较高的小麦氮素利用效率,其中,小麦氮肥农学利用率、氮肥吸收利用率、氮肥生理利用率和氮肥偏生产力分别平均为16.1 kg·kg~(-1)、69.9%、23.1kg·kg~(-1)和31.4 kg·kg~(-1);在施用硝化抑制剂条件下,麦季氮肥投入量为240 kg·hm~(-2)时,能够保证小麦产量,并提高氮肥利用效率。

关键词: 硝化抑制剂 小麦 产量 氮素累积量 氮素利用效率

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基于高通量测序开发玉米高效KASP分子标记

作物学报 2019 北大核心 CSCD

摘要:SNP(Single Nucleotide Polymorphism)在基因组中数量多、分布广,适用于大规模、自动化基因型检测.本研究利用205份不同来源的玉米自交系全基因组重测序数据鉴定出一系列多态性高的二态性SNP位点并开发出700个KASP分子标记.其中,202个在46个玉米代表系中得到验证的KASP标记进一步用于系统进化树构建及群体结构分析.结果显示,开发成功的KASP标记在染色体上分布均匀,平均PIC为0.463,平均MAF为0.451.基于KASP标记位点和总SNP位点的聚类分析结果高度吻合.KASP标记位点与总SNP位点的遗传距离相似性系数高达89.5%,能成功区分玉米的杂种优势群.该KASP标记可在玉米种质资源分析、连锁群构建以及杂种优势群划分等方面发挥重要作用.

关键词: 玉米 重测序 KASP标记 种质资源

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基于InDel标记的国内绿豆品种遗传多样性分析及指纹图谱构建

植物遗传资源学报 2019 北大核心 CSCD

摘要:绿豆是一种抗逆性强、适应性广的作物。本研究选取19个多态性丰富、条带稳定的InDel标记用于42个绿豆参试品种的遗传多样性分析及指纹图谱构建。19个InDel标记有效等位变异数介于1.0998~1.9955之间,平均为1.750;期望杂合度变幅0.0918~0.5049,平均值是0.421;Nei′s基因多样性指数变幅0.0907~0.4989,平均值为0.416。多态性信息含量变幅0.0866~0.3744,0.25

关键词: 绿豆 InDel标记 指纹图谱 遗传多样性分析

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山羊副流感病毒3型感染MDBK细胞的转录组分析

畜牧兽医学报 2019 北大核心 CSCD

摘要:本研究旨在探究山羊副流感病毒3型(CPIV3)感染MDBK细胞后的转录组基因变化情况,丰富CPIV3转录组信息。取1MOI CPIV3JSHA2014-1病毒液感染MDBK细胞,设非感染正常细胞为对照,于24h后收获细胞,提取总RNA,利用Illumina HiSeqTM2500对感染组与对照组进行高通量测序,并用测序评估、基因注释等生物信息学方法进行分析。结果显示,差异表达基因共261个,其中表达上调140个,表达下调121个,经RT-qPCR方法验证8个差异表达的干扰素信号通路相关基因,结果与高通量测序一致。进一步GO分类结果显示,差异表达基因主要涉及细胞生物学进程、构成细胞的组分以及实现的分子功能三个方面,KEGG分析显示这些基因参与代谢、生物系统、细胞进程、基因信息进程和环境信息进程。本研究为深入探究CPIV3的致病机制奠定了基础。

关键词: 山羊副流感病毒3型 MDBK细胞 高通量测序 转录组

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永瓣藤茎叶中2个新的β-二氢沉香呋喃型倍半萜

中草药 2019 北大核心 CSCD

摘要:目的研究永瓣藤Monimopetalum chinense茎叶的化学成分。方法采用硅胶柱色谱和制备液相色谱技术等多种方法分离永瓣藤的化学成分,并综合运用NMR、HR-ESI-MS等波谱手段鉴定化合物的结构。结果从永瓣藤茎叶甲醇提取物中分离得到2个新的β-二氢沉香呋喃型倍半萜,分别鉴定为1α,6β-二烟酰氧基-9α-乙酰基-β-二氢沉香呋喃(1)、1α,6β-二烟酰氧基-9α-苯甲酰氧基-8α-羟基-β-二氢沉香呋喃(2)。结论化合物1和2均为新化合物,分别命名为永瓣藤素I和永瓣藤素II。

关键词: 永瓣藤属 永瓣藤 β-二氢沉香呋喃型倍半萜 永瓣藤素Ⅰ 永瓣藤素Ⅱ

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侵染我国主要蔬菜作物的病毒种类、分布与发生趋势

中国农业科学 2019 北大核心 CSCD

摘要:【目的】对我国茄科、葫芦科、豆科和十字花科蔬菜主要病毒病开展调查、诊断,明确当前我国主要蔬菜作物病毒病的病原物、优势病毒及其分布,并对其中一些重要病毒引起的病毒病在我国的发生危害趋势进行分析。【方法】2013—2017年,对我国大陆31个省(市、自治区)开展茄科、葫芦科、豆科和十字花科等蔬菜作物主要病毒病发生情况的普查,利用血清学和分子生物学相结合的方法对主要蔬菜病毒病的病原进行鉴定。【结果】我国大陆31个省(市、自治区)共采集茄科、葫芦科、豆科和十字花科蔬菜作物疑似病毒病样品41 653份,共检出病毒63种,其中茄科蔬菜检出病毒达40种,葫芦科蔬菜检出病毒26种,豆科蔬菜检出病毒19种,十字花科蔬菜检出病毒14种。茄科的辣椒检出病毒33种,番茄检出病毒25种;葫芦科的南瓜检出病毒22种,黄瓜检出病毒19种;豆科的豇豆检出病毒14种,菜豆检出病毒12种;十字花科的萝卜检出12种病毒,大白菜检出7种病毒。蔬菜作物中普遍存在多种病毒复合侵染现象,已发现2—6种病毒复合侵染,以2种病毒复合侵染类型居多,其中辣椒、番茄和茄子上存在6种病毒复合侵染。本研究首次在国内发现番茄斑驳花叶病毒(Tomato mottle mosaic virus,To MMV)、西葫芦虎纹花叶病毒(Zucchini tigre mosaic virus,ZTMV)、辣椒脉黄化病毒(Pepper vein yellows virus,Pe VYV)、辣椒隐潜病毒1号(Pepper cryptic virus 1,PCV-1)和辣椒隐潜病毒2号(Pepper cryptic virus2,PCV-2)的侵染;首次发现To MMV、甜瓜蚜传黄化病毒(Melon aphid-borne yellows virus,MABYV)、南瓜蚜传黄化病毒(Cucurbit aphid-borne yellows virus,CABYV)对辣椒的侵染,首次发现ZTMV对黄瓜、烟草轻绿花叶病毒(Tobacco mild green mosaic virus,TMGMV)对南瓜的侵染,首次发现番茄斑萎病毒(Tomato spotted wilt tospovirus,TSWV)可以侵染芹菜、曼陀罗、豇豆、豌豆、党参、大丽花、旱金莲、刺天茄等,首次发现红辣椒脉斑驳病毒(Chilli veinal mottle virus,Chi VMV)可以侵染红茄,另外还首次发现辣椒和番茄为烟草丛顶病毒(Tobacco bushy top virus,TBTV)的新自然寄主。【结论】黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)、烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)、芜菁花叶病毒(Turnip mosaic virus,Tu MV)和蚕豆萎蔫病毒2号(Broad bean wilt virus2,BBWV2)为当前危害我国蔬菜作物的优势病毒,在全国范围内广泛分布且发生严重,特别是CMV发生最为普遍,在31个省(市、自治区)均有分布,且均为这些地区的优势病毒。茄科蔬菜的优势病毒为CMV和TMV,葫芦科蔬菜的优势病毒依次为CMV、小西葫芦黄花叶病毒(Zucchini yellow mosaic virus,ZYMV)、黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)和TMV,豆科蔬菜的优势病毒为CMV和BBWV2,十字花科蔬菜的优势病毒依次为Tu MV、CMV和TMV。番茄褪绿病毒(Tomato chlorosis virus,To CV)、TSWV、CGMMV和To MMV等病毒在部分省区发生严重,扩展蔓延速度极快,具有在全国范围内流行的风险。

关键词: 蔬菜 病毒 种类鉴定 分布 发生趋势

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基因工程抗体在微囊藻毒素检测分析中的应用研究

分析测试学报 2019 北大核心 CSCD

摘要:微囊藻毒素是蓝藻水华过程中产生的一类小分子多肽生物毒素,能对人和动物的肝脏造成严重损伤,属于2B类致癌物质。由于全球性工业和生活废水的大量排放以及气候变暖等现实因素,蓝藻水华现象日趋频繁和加剧,使得微囊藻毒素在水体和土壤中大量蓄积,严重威胁生态环境和农产品质量安全。基于"抗体-抗原"识别原理的免疫学检测方法是当前生物毒素快速检测研究的热点,近年抗体创制技术突飞猛进,现已从传统的多克隆抗体和单克隆抗体逐渐发展到了新型的基因工程人工抗体创制阶段。该文系统阐述了微囊藻毒素产生的内外因素及其对生态系统、人和动物的主要危害风险;全面梳理了基因工程抗体创制技术及其在微囊藻毒素检测应用研究上的最新进展;并结合作者及所在科研团队最新研究成果,深入探讨了基因工程抗体在微囊藻毒素检测应用上的发展趋势、存在的问题以及拟解决的对策。

关键词: 基因工程抗体 微囊藻毒素 农产品 质量安全 免疫分析

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掺混控释肥侧深施对稻田田面水氮素浓度的影响

中国土壤与肥料 2019 北大核心 CSCD

摘要:为了明确掺混控释肥侧深施对稻田氮素损失的控制效果,采用大田试验,以武运粳23号为试验材料,通过设置无机化肥常规用量分次施用(CN)、掺混控释肥梯度减量一次性基施(常规用量、减量10%、减量20%和减量30%)共5个处理,研究了掺混控释肥(RBB)减量对太湖地区稻田田面水不同形态氮素浓度的影响及产量效益。结果表明,与无机化肥常规用量分次施用CN处理(270 kg/hm~2)相比,RBB减量10%~30%不会造成水稻减产。田面水氮素以铵态氮为主,无机化肥施用后田面水氮素浓度在施肥后1~2 d即达到峰值浓度,此后逐渐下降;掺混控释肥处理的3个肥期田面水氮素峰值浓度较低,均显著低于CN处理。由于田面水氮素以铵态氮为主,因此总氮均值浓度降低幅度与铵态氮较一致。其中,基肥期、蘖肥期、穗肥期田面水总氮均值浓度两年降低幅度分别为87.19%~93.87%(2015年)和76.93%~83.48%(2016年),69.74%~79.73%(2015年)和74.46%~87.52%(2016年),94.43%~96.69%(2015年)和95.52%~96.57%(2016年)。RBB减量能够降低前期(基肥期和蘖肥期)田面水氮浓度,总体呈随用量减少而降低的趋势。但减量幅度相近处理的田面水氮素浓度未呈现一致性规律变化。结果说明,RBB施用减少了太湖地区稻田肥期氮素流失风险,RBB肥料用量为189~216 kg/hm~2能够在保证水稻产量的前提下降低前期田面水氮素浓度,减少氮素流失风险。

关键词: 水稻 掺混控释肥 减量 产量 田面水氮浓度

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江苏种养结合猪场粪污处理典型模式分析Ⅰ-政府主导型

中国农学通报 2019 CSCD

摘要:总结归纳江苏养殖粪污处理典型模式,为区域尺度发展种养结合循环农业,实现农业废弃物资源化统筹协调高效利用,提供模式参考及案件借鉴.以政府主导型的武进区农业废弃物综合治理中心(礼嘉站)为例,介绍种养结合模式背景及构架,分析关键技术组成,剖析经济、生态及社会效益,阐明运行机制.结果表明:收集分散服务体系建设形成了养殖业、种植业、第三方服务组织、政府及社会群众之间的利益共同体,破解了小型养殖粪污无害化处理与资源化利用的瓶颈难题,促进了"乡村振兴"的"环境美、农民富"进程.江苏探索的政府主导型养殖粪污集中处理模式,对构建和发展区域尺度种养结合循环农业更具代表性及示范价值.

关键词: 种养结合 粪污处理 典型模式 循环农业 面源污染 农业废弃物

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