科研产出
乳糖诱导对重组大肠杆菌表达CGTase的影响
《食品工业科技 》 2015 北大核心 CSCD
摘要:以重组环糊精葡萄糖基转移酶(CGTase)表达菌株BL21(DE3)作为研究对象,比较IPTG和乳糖诱导对重组大肠杆菌表达CGTase量的影响,确定优化诱导方式。以Geobacillus CHB1的基因组DNA为模板,采用PCR技术克隆CGTase基因;利用分子操作技术构建携带有大肠杆菌Omp A信号肽的分泌型表达质粒p EASY-E2-Omp A-CGT,重组质粒热激转化至Escherichia coli BL21中进行表达;在摇瓶发酵条件下,分别以IPTG和乳糖作为诱导剂,通过SDSPAGE分析和测定胞外酶活,确定优化诱导方式。CGTase基因在Escherichia coli BL21中实现表达,且具有一定量的重组CGTase分泌至胞外;乳糖诱导的蛋白表达量优于IPTG诱导,不易形成包涵体;乳糖最佳的诱导起始菌浓度OD600为1.4,诱导浓度、温度分别为0.5%和25℃,分批流加乳糖5次和一次性加入,重组CGTase表达量无明显差异;经初步优化,胞外酶活达19.87 U/m L。Geobacillus CHB1 CGTase基因在大肠杆菌中成功实现胞外表达,乳糖可替代IPTG诱导重组CGTase。
关键词: Geobacillus CHB1 环糊精葡萄糖基转移酶 乳糖 IPTG 诱导表达


沼液对种植狼尾草的山地红壤可溶性有机氮和土壤微生物特征的影响
《水土保持学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要:通过沼液浇灌人工草地定位试验,研究浇灌不同浓度梯度沼液下土壤可溶性无机氮、可溶性有机氮、可溶性有机碳、微生物量碳(SMBC)、微生物量氮(SMBN)、细菌16SrDNA基因、真菌SSU rDNA基因、固氮菌nifH基因丰度及细菌、真菌、固氮菌群落多样性的变化。结果表明,人工草地土壤可溶性氮以有机氮为主,占可溶性总氮含量的77.87%~88.88%,沼液浇灌使人工草地土壤可溶性有机氮含量呈增加趋势,但这种变化未达到显著水平;沼液浇灌能显著提高SMBN、SMBC和MQ,还能显著增加细菌16SrDNA基因和真菌SSU rDNA基因的丰度,降低固氮菌nifH基因的丰度,但对细菌、真菌和固氮菌多样性无显著影响,表明沼液短期浇灌可促进土壤微生物的繁殖,但对微生物群落构成无显著影响;沼液与SMBC、细菌16SrDNA基因丰度、真菌SSU rDNA基因丰度之间显著正相关,SON与土壤真菌SSUrDNA基因丰度显著正相关,与固氮菌nifH基因丰度显著负相关(p<0.05)。
关键词: 微生物量碳 微生物量氮 微生物熵 基因丰度 生物多样性


日本都市农业的发展现状及多功能性
《世界农业 》 2015 北大核心
摘要:日本都市农业经过近半个世纪的发展,已经取得了巨大的成绩。都市农户占日本农户总数的25%,经营耕地面积占总耕地面积的27%,尤其是蔬菜、水果和花卉的种植比例较高。本文从都市农户的结构特征入手,对日本都市农业的发展现状及其做法进行了分析,并阐述了日本都市农业的多功能性。


分子标记辅助选择Pi25基因选育抗稻瘟病三系不育系
《分子植物育种 》 2015 北大核心 CSCD
摘要:稻瘟病是水稻最具毁灭性的病害之一,选育抗稻瘟病三系不育系,是选育抗稻瘟病品种的有效途径之一。本研究以携带抗稻瘟病基因Pi25的材料BL47为抗性供体亲本、福稻B为受体亲本,利用分子标记辅助选择技术和常规育种方法,从F2代起利用分子标记Si13070C检测Pi25基因,从F3代起结合稻瘟病重发病区苗瘟鉴定,从BC1代起对不育系植株进行花粉育性鉴定,筛选出5份具有中抗以上水平的候选不育系,其中不育系CP4A具有良好的不育性和开花习性,所配组合表现出良好的农艺性状。结果表明,利用分子标记Si13070C检测Pi25基因并结合田间苗瘟鉴定在选育抗性育种材料上是有效的。


蜡蚧轮枝菌V3450菌株对榕管蓟马及斯氏钝绥螨的毒力比较
《西北农林科技大学学报(自然科学版) 》 2015 北大核心 CSCD
摘要:【目的】比较蜡蚧轮枝菌V3450菌株对榕管蓟马及斯氏钝绥螨的毒力差异,为利用天敌昆虫和虫生真菌协同控制榕管蓟马等害虫提供技术支持。【方法】室内测定榕管蓟马成虫和斯氏钝绥螨雌成螨受蜡蚧轮枝菌V3450菌株侵染后的死亡趋势,构建时间-剂量-死亡率(TDM)模型,比较供试菌株对榕管蓟马成虫及斯氏钝绥螨雌成螨的LC50和LT50。【结果】蜡蚧轮枝菌V3450菌株侵染后,榕管蓟马和斯氏钝绥螨的死亡趋势均随菌剂浓度的升高及侵染时间的延长而上升,但榕管蓟马的累计校正死亡率及死亡趋势的变幅均明显高于斯氏钝绥螨,其中1.00×107和1.00×108 mL-1蜡蚧轮枝菌V3450菌株侵染10d,斯氏钝绥螨雌成螨的累计校正死亡率分别仅是榕管蓟马成虫的13.30%和27.94%。构建的榕管蓟马和斯氏钝绥螨TDM模型均能通过Pearsonχ2和Hosmer-Lemeshow检验,拟合结果与试验观察结果相吻合,能够无偏地描述蜡蚧轮枝菌V3450菌株对榕管蓟马成虫和斯氏钝绥螨雌成螨的时间-剂量互作效应。蜡蚧轮枝菌V3450菌株对榕管蓟马的剂量和时间效应均明显强于斯氏钝绥螨,5个不同浓度蜡蚧轮枝菌V3450菌株对斯氏钝绥螨雌成螨的LT50均超出TDM模型估测范围,斯氏钝绥螨雌成螨受侵染3d后的LC50是同一侵染时间榕管蓟马成虫LC50的2.51×102~1.29×105倍。【结论】蜡蚧轮枝菌V3450菌株对榕管蓟马的毒力较强,而对斯氏钝绥螨的毒力较弱,榕管蓟马对供试菌株时间-剂量互作效应的响应要远强于斯氏钝绥螨。
关键词: 蜡蚧轮枝菌 榕管蓟马 斯氏钝绥螨 时间-剂量-死亡率(TDM)模型 毒力


杏鲍菇脆片的杀青及干燥工艺优化
《核农学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要:为得到高品质、低能耗的杏鲍菇脆片加工工艺,研究了低温低盐杀青、蒸汽杀青、低温低盐-蒸汽杀青3种不同杀青工艺对杏鲍菇脆片表面颜色变化、POD残留活性及硬度的影响,采用响应面法研究转换含水率、加热板温度、热风干燥温度、热风干燥总时间对杏鲍菇脆片真空冷冻-热风联合干燥工艺的影响。结果表明,杏鲍菇脆片的最佳生产工艺为4℃下低温低盐杀青60min、蒸汽杀青1 min,并经冷冻干燥(加热板温度35℃)至含水率45%后60℃下热风干燥(干燥总时间840min)。该研究为杏鲍菇脆片休闲食品的产业化生产提供了理论依据。
关键词: 杏鲍菇 脆片 杀青 真空冷冻干燥 热风干燥 响应面法


蓝莓休克病毒的RT-PCR快速检测方法建立
《北方园艺 》 2015 北大核心
摘要:以蓝莓叶片为试材,提取病毒RNA,根据已报道的蓝莓休克病毒(Blueberry shock virus,BlShV)外壳蛋白基因序列设计特异性引物,建立RT-PCR快速检测方法,并对采集的20份疑似病例进行检测。结果表明:建立的RT-PCR方法具有良好的特异性和较高的灵敏度。仅从感染BlShV的样品中扩增出与预期大小相符的特异性目的片段,而从其它蓝莓病毒及健康样品中未扩增到目的片段;该方法能检测到RNA原液的10-4倍稀释液,灵敏度较高。疑似病例检测结果与ELISA验证结果完全相符。试验表明,建立的RT-PCR方法能够用于BlShV的现地检测。


橄榄种质资源果实表型性状多样性分析及其数量分类研究
《果树学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要:【目的】分析橄榄种质果实表型性状多样性,并根据其多样性进行数量分类。【方法】参考《果树种质资源描述符—记载项目及评价标准》和《橄榄种质资源描述规范和数据标准》等标准进行观测和描述,应用Q型聚类、R型聚类和主成分分析等方法。【结果】11个数量性状中,单果质量的变异系数最大为42.00%,可食率的变异系数最小为3.44%。16个描述性状平均变异类型2.9个,果实形状的变异类型最为丰富,为5个。Q型聚类分析将60份种质资源在欧氏距离为27.81时分为3个组群,组群内的种质资源以果实的形状、大小和品质聚类;R型聚类分析将27个表型性状在相关系数2.27处聚为3组,多数性状表现两两相关或关系密切;主成分分析结果将27个表型性状简化为8个主成分,包含果实形状等16个表型性状。【结论】橄榄种质资源的果实表型性状存在丰富的多样性,果实形状等16个表型性状对数量分类起重要作用。

